固定化脂肪酶催化合成富含共轭亚油酸的甘油酯

选择3种大孔树脂AB-8、HZ-802、HZ-841吸附固定化Thermomyces lanuginosus脂肪酶液,用AB-8树脂固定化的脂肪酶比酶活最高,达到37451U／g。用此脂肪酶催化生产CLA甘油酯,发现其对底物甘油酯种类没有特异选择性。在CLA乙酯与食用油（甘油酯）摩尔比为3：1,酶加量为7％,反应温度为60℃的条件下催化酯交换反应,CLA转酯化率可以达到47％以上。以AB-8弱极性大孔树脂固定化的脂肪酶有较高稳定性,连续反应8批以后,CLA转酯化率仍可以达到42％。     

交联剂固定化假丝酵母脂肪酶及其催化反应研究

以价格低廉的无纺布为固定化载体,添加聚丙烯酸酯作为交联剂,生产固定化脂肪酶。这种固定化方法对脂肪酶的纯度等性质要求不高,制备工艺操作简单。交联剂对酶液的活力没有影响,且具有一定的成膜特性,能够为脂肪酶分子催化提供良好的微环境。固定化脂肪酶酶活损失较少,在25%以内。制备的固定化脂肪酶在棕榈酸异辛酯酯化反应体系可以重复催化达到47批次,酯化率在80%以上;在酯交换生产脂肪酸甲酯反应体系可以连续反应25批次,转酯化率在90%以上。     

Lipozyme~CALB L固定化及催化合成EPA/DHA甘油酯的研究

研究利用树脂对脂肪酶LipozymeCALB L进行固定化,然后将固定化酶用于催化富含二十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的脂肪酸乙酯与甘油进行酯交换反应合成甘油酯。在17种常用树脂中,环氧树脂(ECR8285)在缓冲液p H 5、缓冲液离子浓度1 mol/L、酶加量120mg/g(以载体质量计)时,通过共价结合固定化的LipozymeCALB L酶活力最高,可以达到22 967U/g,蛋白质吸附率为91.88%。以ECR8285固定化的LipozymeCALB L催化富含EPA和DHA的脂肪酸乙酯与甘油反应合成甘油酯,在叔丁醇体系中催化PUFA乙酯与甘油反应8 h后,PUFA乙酯的转化率可以达到51.1%;将叔丁醇回收后,在真空状态下继续反应24 h,PUFA乙酯的转化率可以达到91.7%,产物中甘油三酯的含量可以达到70%以上。     

固定化脂肪酶催化大豆油制备生物柴油

研究了脂肪酶固定化及其催化大豆油制备生物柴油的工艺。采用溶胶-凝胶法对脂肪酶进行了固定化,考察了固定化酶催化大豆油转酯化的生产工艺中酶用量、醇油比、含水量、反应温度、反应时间、溶剂等参数对转酯过程的影响。实验结果表明,当大豆油4.5 g时,最佳的反应条件为：固定化酶646 mg,醇油摩尔比4∶1,含水质量分数为6%,40℃,甲酯的最终转化率为96.33%。     

固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶转酯化大豆油合成生物柴油

对固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶催化大豆油和甲醇合成生物柴油的工艺进行了研究。通过甲基三甲氧基硅和四甲氧基硅缩水和水解反应形成的硅胶包埋固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶。研究了酶用量、醇油摩尔比、反应温度、含水量对合成生物柴油的影响。优化的转酯化反应条件为：醇油摩尔比4：1,含水量5％,固定化脂肪酶15％,反应温度50℃,48h后转化率可以达到96．4％。固定化脂肪酶经多次使用后活力未见明显下降。     

壳聚糖/二氧化硅杂化膜固定化糖化酶的研究

利用正硅酸乙酯与壳聚糖通过溶胶-凝胶反应制备了壳聚糖/SiO2杂化膜,用来固定糖化酶.对固定化酶的酶学性质进行了研究,结果表明:SiO2含量为4%的杂化膜相对酶活最高,达到了77.91%.固定化酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH为5.2,固定化酶的耐受热性及pH稳定性较游离酶有所提高.     

反应条件对固定化脂肪酶转酯化合成维生素A棕榈酸酯的影响研究

目的:以维生素A醋酸酯和棕榈酸为底物,对影响固定化酶转酯化合成维生素A棕榈酸酯的条件因素进行系统研究。方法:以转化率为主要指标,辅以考虑降解,研究有机溶剂、加酶量、反应时间、底物物质的量、底物浓度和反应批次对转酯化的影响。结果:有机溶剂疏水性增加,转化率呈现幂指数形式增加,降解率随之降低;转化反应对加酶量、反应时间及底物物质的量有量的依赖效应,即在数量较低的条件下对转化率有影响,而在数值较高时对转化率没有影响;转化时间越长,降解率越大;底物物质的量比越大,降解率越低。随着底物浓度的增加,转化率呈现负幂指数形式降低,而降解率呈线性增加;乘幂函数模型比线性模型能更好地描述固定化脂肪酶反应初速度与底物浓度的关系。固定化酶在反应转酯化合成维生素A棕榈酸酯过程中的稳定性好,可以连续使用多次。结论:阐明了条件因素对酶法转酯化合成维生素A棕榈酸酯的影响,初步优化了反应条件,为进一步工艺优化提供了基础数据。     

固定化脂肪酶转酯化菜籽油合成生物柴油

采用无溶剂体系,对固定化洋葱假胞菌脂肪酶催化转酯化菜籽油和甲醇合成生物柴油的工艺进行了考察。优化的转酯化反应条件为：醇油比4：1,含水量4％,固定化脂肪酶10％,反应温度50℃．12h后转化率达到了93．6％。固定化脂肪酶具有良好的操作稳定性,经多次使用后活力未见显著的下降。     

包埋固定化酶降解牛奶αs1-酪蛋白过敏性研究

利用海藻酸钠固定化蛋白酶,探求其对牛奶过敏原αs1-酪蛋白的特异性降解。以固定化酶的活力回收率为指标,探究了固定化的条件、固定化酶的部分性质以及固定化酶在去除牛奶过敏原蛋白的应用。结果表明:最优固定化条件为,海藻酸钠质量分数为4.0%,Ca Cl2的质量分数为3.0%,固定化时间0.5 h,固定化酶量为V(海藻酸钠)∶V(酶液)为1∶3,固定化效率达到67.5%;固定后的酶最适反应温度70℃,最适反应p H 10.0,连续使用6次后剩余酶活达到40.0%以上;将固定化酶作用于2.0%脱脂奶粉溶液中,60℃条件下反应25 min过敏原αs1-酪蛋白得到特异性降解。     

酶促乙酯化和分子蒸馏联用制备高DHA乙酯的工艺

利用固定化脂肪酶催化乙酯化反应将裂殖壶菌总脂转化为乙酯,并借助分子蒸馏手段制备得到了高DHA含量的乙酯产品。实验考察了反应温度、时间、底物质量配比和脂肪酶添加量等参数对酶促乙酯化反应的影响。在较优条件下(反应温度40℃,反应时间24h,底物质量比10∶2,Lipozyme 435添加量为油脂质量的6%),固定化脂肪酶的操作稳定性良好。采用分子蒸馏技术富集酶促醇解所得裂殖壶菌乙酯中的DHA,可得到DHA含量高于80%的乙酯产品,通过多级分子蒸馏和将轻相组分回流的方式可以显著提高DHA含量乙酯的得率。