水产品中15种避孕药的HPLC方法测定

建立高效液相测定水产品中15种激素的鉴别及含量测定方法。水产品经甲醇超声提取,0.45μm滤膜过滤,经高效液相色谱分析。试验证明,15种雌激素得到很好的分离,并得到浓度与峰面积呈正比的线性关系,相关系数R~20.999;重复性(N=6)相对标准偏差均在5%以内;定量限:雌三醇0.75μg/g、雌二醇0.45μg/g、炔雌醇0.45μg/g、雌酮0.45μg/g、炔诺酮0.60μg/g、己烯雌酚0.45μg/g、炔诺孕酮0.75μg/g、醋酸氯地孕酮0.75μg/g、醋酸甲地孕酮0.75μg/g、醋酸甲羟孕酮0.45μg/g、黄体酮0.45μg/g、苯甲酸雌二醇0.60μg/g、戊酸雌二醇0.75μg/g、已酸羟孕酮0.60μg/g、庚酸炔诺酮0.75μg/g;加标回收率均在80%~120%之间。证明该方法用于检测水产品中的激素具有快速、简便、灵敏、准确且样品处理简单等优点。     

气质联用法检测养殖虾中的5种雌激素残留

建立一种加速溶剂萃取-气质联用检测养殖虾中的5种雌激素(雌二醇、己烯雌酚、雌酮、炔雌醇、雌三醇)残留的分析方法。采用加速溶剂萃取仪对养殖虾进行提取、净化,选用乙酸乙酯进行洗脱,氮吹仪浓缩至近干,硅烷化试剂N-甲基三甲基硅基三氟乙酰胺(MSTFA)-三甲基硅烷(TMCS)(99︰1,V/V)衍生后进样气相色谱质谱仪定性定量检测。结果显示,5种雌激素质量浓度在0.01~1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.995;5种雌激素检出限在0.09~0.14μg/kg之间,低(1μg/kg)、中(5μg/kg)、高加标量(10μg/kg)三个不同浓度水平下的加标率在80.6%~93.9%之间,相对标准偏差(RSD)在1.67%~4.72%之间(n=6)。该方法操作简单,灵敏度与准确度高,适用于养殖虾中雌激素的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定水果中的8种环境雌激素

目的建立同时测定水果中双酚A、17β-雌二醇、雌酮、雌三醇、炔雌醇、己烯雌酚、4-辛基酚和4-n-壬基酚的高效液相色谱-串联质谱法。方法样品经乙腈超声提取2次,Oasis HLB固相萃取柱净化,提取液氮吹至干,残渣用甲醇溶解。待测物以乙腈-甲醇(4∶1,V/V)与0.1%氨水为流动相,经ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)梯度洗脱分离后,进行HPLC-MS/MS多反应监测模式(MRM)的定性及定量分析,外标法定量。结果 8种环境雌激素能与杂质较好分离,在5~100μg/L范围内线性良好(均r≥0.99)。方法检出限为0.17~0.51μg/kg,定量限为1.33~2.55μg/kg,加标回收率为67.77%~110.49%,RSD为1.08%~12.74%。应用该方法对实际样品进行检测,均有微量双酚A检出,大部分检测到4-n-壬基酚和炔雌醇,部分检测到17β-雌二醇,其余4种环境雌激素均未检出。结论本方法快速、灵敏、准确,适用于水果中8种环境雌激素的定量及确证分析。     

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定原料奶中5种环境雌激素残留量的研究

建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定原料乳中环境雌激素(雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚、双酚A)的方法.原料乳用NH2-SPE固相萃取小柱进行富集,旋转蒸发浓缩后,采用高效液相色谱串联质谱法测定.实验结果表明:各待测物在0.01 ～ 0.5 μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.9978,加标回收率为68.5％～105.6％,RSD为2.56％ ～7.59％,最低检出限为0.22～0.56μg/L(S/N=3).本方法操作简便,快速灵敏,适合于牛奶中痕量环境雌激素的残留分析检测.     

固相萃取-RP-HPLC法测定水体中6种环境激素方法的建立

建立一种采用反向高效液相色谱同时测定水体中雌三醇等6种环境激素(雌三醇、雌二醇、炔雌醇、雌酮、炔诺酮、炔诺孕酮)的分析方法。待测水样品用Oasis HLB固相萃取柱富集,甲醇-乙腈(体积比6︰4)混合溶剂洗脱,浓缩后,用HPLC定量检测。结果表明, 6种环境激素在质量浓度为0.2～10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(R~2)均不低于0.995, 0.2 (低点), 1.0 (中点)和5.0μg/mL (高点) 3点加标回收率均在80%～120%之间,定性检测限为:雌三醇0.08μg·L~(-1)、雌二醇0.10μg·L~(-1)、炔雌醇0.14μg·L~(-1)、雌酮0.16μg·L~(-1)、炔诺酮0.20μg·L~(-1)、炔诺孕酮0.26μg·L~(-1)。6种环境激素检测结果重复性RSD均小于5%(N=6)。该方法前处理简单、灵敏度高、检测结果准确、可靠。     

牛奶中雌性激素的高效液相色谱分析

建立了牛奶中5种雌性激素（雌三醇、雌二醇、炔诺酮、雌酮、己烯雌酚）同时测定的高效液相色谱法.样品经乙腈处理沉淀蛋白质后取上清液浓缩,采用反相高效液相色谱法,以乙腈-水（体积比为1：1）为流动相进行分析.5种雌性激素分离效果良好,平均回收率范围67 0%～95.5%,相对标准偏差为1.8%～6.5%,方法检出限为1.0～2.0μg/L.该方法可满足实际样品测定需要.     

UPLC-MS/MS法测定美容养颜类保健食品中9种雌激素

建立一种快速检测美容养颜类保健食品中非法添加9种雌激素类药物(雌三醇、己烯雌酚、己烷雌酚、己二烯雌酚、17α-炔雌醇、雌酮、17α-雌二醇、17β-雌二醇和己烯雌酚-D8)的UPLC-MS/MS方法。样品经水-甲醇(50:50,V/V)超声提取后,上清液用Oasis HLB固相萃取柱净化,以0.05%的氨水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,经Inertsil ODS-3(2.1 mm×75 mm,2μm)色谱柱分离,目标化合物在ESI源负离子模式下电离,采用多反应监测模式进行定性、定量分析。结果表明:9种雌激素的方法检出限(S/N=3)为0.4~1.3μg/kg,定量限(S/N=10)为1.9~5.4μg/kg。在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为76.9%~109.9%,相对标准偏差(N=6)为1.3%~14.7%。对25批次市售美容养颜类保健食品进行检测,均未发现上述9种雌激素。该方法灵敏高、专属性强,适用于美容养颜类保健食品中雌激素类非法添加的定量及确证分析。     

基于DSPE-LC-MS/MS法的畜禽产品中雌激素的测定

本研究建立了畜禽产品中雌酮(estrone,E1)、雌二醇(estradiol,E2)、雌三醇(estriol,E3)以及己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)残留量的分散固相萃取(DSPE)-液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)分析测定方法。样品经乙腈沉淀蛋白质,无水Mg SO4去除水分后,以N-丙基乙二胺(PSA)极性吸附剂分散固相萃取净化,最后通过液相色谱质谱联用测定。在畜禽产品中添加不同浓度的雌激素后用该方法的回收率最高可达到96.63%,4种雌激素的检出限(S/N=3)为1.32~16.52μg/kg。该方法为畜禽产品中雌激素残留的检测提供了可靠的参考依据。     

超高效液相色谱串联质谱法检测肉制品中八种雌激素残留量

建立了采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测肉制品中八种雌激素(辛基酚、壬基酚、双酚A、己烯雌酚、雌酮、17β-雌二醇、17α-乙炔雌二醇和雌三醇)含量的方法。样品经乙酸乙酯提取2次,HLB固相萃取柱净化后,提取液氮吹至干,残渣用甲醇-水(体积比1:9)溶解。流动相为甲醇和5mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸溶液。经ACQUITYTMBEHC18色谱柱分离后采用多反应监测模式进行检测,外标法定量。方法检出限为0.2～0.3μg/kg。在添加水平为0.5-5.0μg/kg范围内的平均回收率为80%～108%,相对标准偏差为6.7%～11.4%。该方法灵敏度高、操作简单高效,适用于肉制品中8种雌激素的定量及确证分析。     

高效液相色谱法同时测定食品中9种水溶性维生素

目的建立同时测定食品中9种水溶性维生素的高效液相色谱分析方法。方法采用C18色谱柱进行分离,以pH 2.5,25 mmol/L KH2PO4-乙腈二元体系为流动相进行梯度洗脱,最后用高效液相色谱二极管阵列检测器对9种维生素进行测定。结果在优化实验条件下,测得维生素C的线性范围为0.04~100μg/mL,硫胺、核黄素、烟酰胺和吡哆醇的线性范围为0.02~100μg/mL,泛酸的线性范围为0.08~400μg/mL,生物素的线性范围为0.08~200μg/mL,叶酸的线性范围为0.01~50μg/mL,氰钴胺的线性范围为0.04~100μg/mL;线性相关系数为0.9997~0.9999,相对标准偏差为0.28%~1.35%,检出限范围为3~45 ng/mL,加标回收率为90.6%~105.4%。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定营养强化食品中多种水溶性维生素。     

固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时测定饲料中5种雌激素

建立了固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(SPE-UPLC-MS/MS)同时测定饲料中双烯雌酚、己烯雌酚、己烷雌酚、17α-雌二醇和17β-雌二醇5种激素的检测方法。饲料样品采用乙醚振荡提取、三氯乙酸除蛋白和正己烷除脂,提取液通过Max固相萃取柱净化,经过Athena C18-WP色谱柱(2.1×150 mm,5μm)分离,以0.25‰氨水和乙腈进行梯度洗脱,负离子电喷雾电离多反应监测模式进行定性和定量分析。同时优化液相色谱条件和质谱参数,以提高灵敏度,并以17β-雌二醇-D3和己烯雌酚-D8为内标进行定量。结果显示,5种激素在0～10μg/L范围内线性相关系(r)≥0.9994;5种雌激素的定量限均为1.0μg/kg;各雌激素的加标浓度为1.0μg/kg、2.0μg/kg、5.0μg/kg时,其加标回收率均在70.20%～114.37%之间,相对标准偏差为0.15%～9.08%(n=6)。结果表明,该方法前处理简单、准确可靠,适用于饲料中5种雌激素的检测。     

雌酮免疫分析方法的研究

对实验室制得的雌酮特异性抗体A—E1和针对雌酮、雌二醇、雌三醇的广普性抗体A一17E2进行了效能指标的系统评价，建立了雌酮测定的直接竞争ELISA方法。其结果两者检测雌酮的灵敏度分别可达1．3μg／L±0．06μg/L和1．5μg／L±0．05μg／L，检出限分别可达0．04μg／L±0．01μg／L和0．07μg／L±0．01μg／L。此外，A-17E2对于雌二醇和雌三醇的检测灵敏度分别可达1．5μg／L和18μg／L，对两者的检出限分别可达0．04μg／L和0．2μg／L，证明此种广普性抗体可有效检测雌酮，同时对雌二醇、雌三醇也有良好的检测效果。     

分散固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定 土壤中雌酮、雌二醇和乙炔基雌二醇

目的建立土壤中雌酮、雌二醇和乙炔基雌二醇的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定方法。方法土壤样品经乙腈提取和PSA+C_(18)分散固相萃取,采用UPLC-MS/MS多反应模式(MRM)进行分析测定,流动相为甲醇/乙腈(50:50,V:V)和0.1%氨水。结果雌酮、雌二醇和乙炔基雌二醇在1~200μg/kg范围内呈现良好线性,相关系数(r~2)均不低于0.9974,方法的检出限(S/N=3)分别为0.0012、0.0036和0.0058μg/kg。土壤中10、50和500μg/kg 3个添加水平下的回收率为82.9~103.6%,RSD小于7.7。结论该方法简便、快速、灵敏且节省溶剂,适于土壤中雌激素物质的检测。     

气相色谱质谱联用法检测奶粉中四种雌激素

本实验建立了对复杂基质本底的奶粉中四种雌激素雌酮、雌二醇、雌三醇和炔雌醇的气相色谱质谱联用检测方法.结果显示该方法各组分分离良好,在低浓度下加标回收率为61.2-85.4%,线性范围为2-500 ng/g,在低浓度下RSD均低于15.0%,检测限为0.13-0.3ng/g.该方法可实现对奶粉中四种雌激素准确、灵敏的定性...     

液相色谱-串联质谱法测定牛奶中4种雌激素残留

建立了液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)同时测定牛奶中雌酮、17α-雌二醇、17β-雌二醇和雌三醇4种雌性激素残留的方法。牛奶样品用乙腈振荡提取,经过NaCl脱水和低温冷冻除脂,然后用C18固相萃取柱净化,最后分析物采用Hydrosphere C18色谱柱分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,负离子电喷雾电离多反应监测模式进行定性和定量分析,同时优化液相色谱条件(流动相、柱流速和柱温)和质谱参数以提高检测灵敏度。以基质匹配外标法定量,方法线性相关系数r0.999;雌酮、17α-雌二醇、17β-雌二醇和雌三醇定量限均为0.2μg/kg;各雌性激素的浓度添加水平均为0.2μg/kg、0.4μg/kg、1.0μg/kg时,雌性激素加标回收率范围在69.7~108.0%之间,相对标准偏差在4.3~10.5%之间。结果表明,该方法准确、可靠,适用于牛奶中雌性激素残留的检测。     

香精中8种防腐剂的超高效液相色谱-串联质谱法测定

采用甲醇涡旋振荡提取,超高效液相色谱-串联质谱检测,建立了香精中苯甲酸、山梨酸、水杨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯8种防腐剂含量的检测方法。8种防腐剂的的线性范围在0.01μg/mL～5.0μg/mL之间,3个水平加标平均回收率介于85.8%～103%之间,相对标准偏差为1.9%～4.5%,定量限介于0.1～2.5μg/g。该方法适用于香精中8种防腐剂的含量分析。     

高效液相色谱法测定月饼中3种防腐剂

利用高效液相色谱法测定5种月饼样品中的3种常见防腐剂苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的含量。样品经提取、脱蛋白、膜过滤后,用高效液相色谱进行测定。结果表明,3种防腐剂的测定线性相关性均在0.99以上,检测线性范围为10μg/mL～200μg/mL。该方法应用于5种月饼中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的测定结果表明,5种样品均检出山梨酸,3种样品检出有脱氢乙酸,均未检出苯甲酸。     

超高液相色谱-串联质谱法测定淡水水产动物中6种激素残留

目的 研究建立超声提取-GPC净化-UPLC-MS/MS法检测淡水水产动物中的雌酮、炔诺酮、炔雌醇、米非司酮、己烯雌酚和己酸羟孕酮残留量的分析方法。方法 取淡水水产动物可食部分,粉碎机粉碎后,准确称取5.0g试样,置50 mL塑料离心管中,加30 mL甲醇,均质机均质后,置超声仪中超声提取20 min;取出放冷至室温,置高速冷冻离心机中离心5 min,离心后的溶液GPC净化后,氮吹至近干,残渣加1 mL甲醇溶解,0.45 μm滤膜过滤,上UPLC-MS/MS仪定性、定量检测。结果 炔雌醇、雌酮、己烯雌酚、炔诺酮、米非司酮和己酸羟孕酮在浓度范围0.01-10.00μg/mL之间线性关系良好,相关系数(r)均大于0.995;检出限在0.121-0.285 μg/kg之间;加标回收率均在90.0-110.0%范围内;重复性RSD(n=6)均在5.0%以内。结论 实验证明,此方法专属性好、灵敏度高,适用于淡水水产动物中极微量激素残留的检测。     

高效液相色谱法同时测定保健品中15种激素

目的建立高效液相色谱法同时测定保健品中雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、泼尼松龙、氢化可的松、可的松、倍他米松、地塞米松、曲安奈德、醋酸泼尼松、睾丸酮、甲基睾丸酮、氯倍他索丙酸酯、黄体酮等15种激素的分析方法。方法用甲醇直接溶解提取,C_(18)固相萃取柱净化,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流量为1.0 mL/min,采用二极管阵列检测器双波长检测,波长分别为204、245 nm。结果 15种激素的线性范围为0.1～5mg/L,相关系数r0.99,添加回收率为85.0%～105%之间,相对标准偏差5%,定量限0.05 mg/kg。结论该方法简便、快捷、准确,适用于保健品中15种激素的测定。     

溶剂诱导分相微萃取/液相色谱法测定牛奶中雌激素

采用溶剂诱导分相微萃取/反相液相色谱法测定牛奶中炔雌醇、己烯雌酚和双烯雌酚三种雌激素。色谱条件为:Diamonsil C18柱(5μm,250×4.6i.d.),柱温:室温;甲醇∶乙腈∶水(体积比20∶40∶40)为流动相,流速1.0mL/min;检测波长230nm。考察了萃取剂和诱导剂用量对回收率的影响。炔雌醇、己烯雌酚和双烯雌酚在0.5-100mg/L范围内有良好线性,回收率在80.2-87.9%之间。相对标准偏差低于4.9%。