CPD5的光动力作用及维生素C抗光毒效果

采用细胞排染试验,观察CPD5对人胰癌细胞（Hs766T）的体外光动力疗法（PDT）作用及维生素C减轻光毒的效果。结果表明：1）人胰癌细胞对CPD5 PDT敏感,在CPD5浓度为2．5μg／mL时。PDT造成胰癌细胞抑制率达97．4％;2）浓度为40μg／mL的维生素C有明显的减轻光毒作用,最高可使细胞存活率提高86．0％。     

拉曼光谱研究不同剂量的光动力作用对肝癌细胞HepG2的杀伤效应

用拉曼光谱技术分析不同剂量的光动力作用对肝癌细胞HepG2的损伤.实验测定了4个光敏剂浓度组(光敏剂浓度为0.2、0.5、1.5、2.5μg/ml)和4个光剂量组(光剂量为6、12、18、24 J/cm2)及对照组HepG2细胞的拉曼光谱.结果表明,光剂量为6 J/cm2、光敏剂浓度为0.2μg /ml的谱线强度和峰位变化都较小,对HepG2细胞损伤较轻.随着剂量的增加各特征峰的强度变化率加大,细胞损伤加重,但光剂量高于18J/cm2、光敏剂浓度高于1.5μg /ml后,峰强变化率趋于平缓,到达平台期.提示光动力作用剂量存在有效杀伤阈值和安全阈值.     

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化,方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3pg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后培养24小时活细胞细胞内钙离子含量,及测定单激光及对照组、光动力学治疗组照光前36秒及照光20分钟至停照光后20-100分钟细胞内钙离子浓度的动态变化,每12秒测定一次.结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组活C6胶质瘤细胞显示钙离子荧光值,在120分钟内变化较小.而光动力学治疗组,初照光5-15分钟内荧光明显慢慢增强,以后就逐渐下降,光敏药剂量大的初5-10分钟内荧光亮度上升很快,以后下降也快,可下降为0,剂量越大变化越明显,且光敏剂ALA较HPD更明显.二光敏剂联合组以上反应更明显,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml与HPD 5μg/ml组动态图相似.结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用.二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒付反应,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml是较合适的剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞影响的研究

目的通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞凋亡及死亡的光敏药用药剂量及与两者单独使用的差别.方法以不同剂量的ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ ml、80μg/ ml、160μg/ ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)、两者联合与C6胶质瘤瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较.以流式细胞仪及倒置显微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量.结果ALA40μg/ml配合HPD2.5μg/ml与C6胶质瘤细胞同时培养,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟组从倒置显微镜及电镜形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小光敏剂剂量.单纯ALA-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80μg/ml),单纯HPD-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5μg/ml).结论ALA40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟是能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗对S180腹水瘤细胞的影响的研究

目的 :通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的光敏药用药剂量及与二者单独使用的差别方法 :以不同剂量的ALA(40 μg/ml、80 μg/ml、16 0 μg/ml)、HPD(2 .5 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml)、二者联合与S180腹水瘤细胞一起培养 ,随后以 6 30nm半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射肿瘤细胞 ,照射 2 0分钟 ,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别 ,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果 :ALA4 0 μg/ml配合HPD2 .5 μg/ml与S180腹水瘤细胞同时培养 ,6 30半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟组从形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小用光敏剂剂量。单纯ALA -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80 μg/ml) ,单纯HPD -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5 μg/ml)。结论 :ALA4 0mg/kg配合HPD2 .5mg/kg ,6 30半导体激光2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟是能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量。     

油酸在人肝癌HepG2细胞内转化生成9,10-二羟基硬脂酸

目的以人肝癌细胞株HepG2验证油酸转化生成9,10-二羟基硬脂酸(DHSA)途径。方法将HepG2细胞消化传代接种于24孔培养板,24h贴壁后分别加入含50μmol/L和100μmol/L油酸的无血清MEM培养液,培养24h和48h后测定细胞裂解液及上清液中DHSA和油酸(OA)的含量。结果添加50μmol/L和100μmol/L油酸培养24h后,HepG2细胞裂解液中DHSA浓度分别为(3.29±0.38)ng/ml和(6.33±1.99)ng/ml,无油酸对照组为(2.08±0.61)ng/ml;OA含量分别为(645.07±142.81)ng/ml和(1341.6±349.69)ng/ml,对照组为(359.68±12.06)ng/ml;上清液中DHSA和OA含量亦显著高于对照组。培养48h后,油酸组细胞裂解液中OA含量仍高于对照组,DHSA含量仅100μmol/L油酸组高于其他组;细胞上清液中OA含量仅100μmol/L油酸组高于对照组,DHSA含量各组间无显著差异。结论油酸可在HepG2细胞内代谢生成DHSA。     

ALA联合HPD光动力学治疗鼠S180肉瘤研究

目的通过鼠肿瘤动物模型确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的疗效及光敏药物最佳用药剂量。方法以不同剂量的ALA口服(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)、HPD2.5μg/ml静脉注射、24小时后,以630nm半导体激光250mW/cm2照射,每光斑照射20分钟剂量,照光前及照光后不同时间以肉眼、肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察单纯ALA-PDT、HPD-PDT、二者配合的疗效差别并与未作光动力学治疗的空白对照组模型作比较,寻找最佳的光敏药物配合的剂量。结果ALA20-40μg/ml口服配合HPD2.5μg/ml静脉注射作半导体630nm激光250mW/cm2照射20分钟组光动力学治疗组,从形态学观察,肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察是能达到较佳的肿瘤坏死变性、细胞凋亡、肿瘤消失的最小用光敏剂剂量。结论ALA20-40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光250mW/cm2,照射20分钟是能到小鼠S180肉瘤肿瘤模型光动力学治疗最佳疗效的最小光敏剂剂量。     

TNF-α对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响及罗格列酮的干预作用

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响及罗格列酮的干预作用。方法采用不同浓度TNF-α(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)处理3T3-L1脂肪细胞48h、采用20μg/ml TNF-α处理不同时间(6h、12h、24h、48h)及罗格列酮(10μmol/ml)预处理6h的3T3-L1脂肪细胞与20μg/mlTNF-α作用48h;以2-DG摄入法检测细胞对葡萄糖的摄取率。结果与对照组比较,5μg/L、10μg/L和20μg/LTNF-α作用各组分别使葡萄糖摄取率减少了25%(P<0.01)、43%(P<0.01)、58%(P<0.01);20μg/L TNF-α处理3T3-L1脂肪细胞6h、12h、24h、48h使葡萄糖的摄取率分别减少10%(P<0.05)、28%(P<0.01)、40%(P<0.01)、57%(P<0.01),罗格列酮预处理能使20μg/ml TNF-α组脂肪细胞对葡萄糖的摄取率增加37%(P<0.01)。结论TNF-α以浓度和剂量依赖方式导致脂肪细胞胰岛素抵抗;罗格列酮能明显改善此作用。     

ALA-PDT破坏K562和HL60白血病细胞实验条件选择的研究

目的研究在5 -氨基乙酰丙酸( 5 -aminolaevulinicacid ,ALA)介导的光动力疗法(PDT)灭活K5 62和HL60白血病细胞株的实验中,光敏剂的浓度、暗室孵育时间、光源波长及ALA -PDT后继续培养对细胞存活率的影响。方法用不同浓度( 0 .5、1、1.5、2mmol/L)的ALA避光孵育细胞不同时间( 1、2、4、6、12h) ,给予不同波长( 4 10、5 77nm)光源照射后,即刻处理或继续培养,采用MTT法检测细胞存活率。结果ALA 光照能对白血病细胞产生灭活作用。细胞存活率随ALA浓度的增加而降低,在细胞密度为2×10 5个/ml,ALA浓度2mmol/L ,暗室孵育4h细胞存活率最低,光源波长为410nm时细胞存活率低于偏离此波长时的存活率。PDT后2 4hK5 62细胞的存活率较PDT后即刻的升高,而HL60则进一步降低,ALA -PDT对正常外周血单个核细胞及外周血干细胞存活率影响不大。结论ALA -PDT能够灭活K5 62和HL60白血病细胞。较理想的实验条件是2mmol/LALA避光孵育2×10 5/ml细胞,4h、光源波长410nm ,PDT后2 4h。在此条件下,K5 62细胞对PDT的反应不如HL60细胞敏感,对PBMC无灭活作用,对外周血造血干细胞影响较小。     

ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞基因P16及P53变化的研究

目的研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞瘤基因P16及P53变化.方法以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪测试基因P16及基因P53的变化.结果本实验中未作PDT治疗的对照组,肿瘤细胞生长良好,可见P16值小于6.59%.P53值小于4%.而PDT治疗组随着光敏剂剂量的加大P16及P53基因值逐渐上升,是未作PDT治疗组的3-4倍,且两光敏剂混合组,P16及P53基因值大于单纯ALA或HPD-PDT治疗组.HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml就能达到HPD5μg/ml PDT治疗组P16基因及P53基因水平.结论推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml光动力学治疗能达到HPD常规剂量5μg/ml PDT的效果,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应.     

MTT法测定两种光敏剂对大肠癌细胞株HR－8348的光动力效应

用人大肠癌细胞株ＨＲ－８３４８对激光光敏剂藻蓝蛋白（Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ）和蚕砂卟啉（ＣＰＤ４）作光动力学治疗，ＭＴＴ法测定结果．在含有藻蓝蛋白１００μｇ／ｍｌ，５０μｇ／ｍｌ，２５μｇ／ｍｌ的１６４０培养液处理大肠癌细胞，采用波长６３０ｎｍ的铜泵染料激光照射（１２Ｊ／ｃｍ２）后，测定细胞生存率分别为２２．１％，３７．６Ｋ，８９．７Ｋ，各组间Ｐ值均小于０．００１．同样方法蚕砂卟啉含有１０μｇ／ｍｌ，５μｇ／ｍｌ，２．５μｇ／ｍｌ测得细胞生存率分别为２０．１％，２５．９％，３１．５％。ＭＴＴ法快速，简便，可用于多种光敏剂的筛检试验．     

A radio-frequency coupling network for heating of citrate-coated gold nanoparticles for cancer therapy: design and analysis

Gold nanoparticles (GNPs) are nontoxic, can be functionalized with ligands, and preferentially accumulate in tumors. We have developed a 13.56-MHz RF-electromagnetic field (RF-EM) delivery system capable of generating high E-field strengths required for noninvasive, noncontact heating of GNPs. The bulk heating and specific heating rates were measured as a function of NP size and concentration. It was found that heating is both size and concentration dependent, with 5 nm particles producing a 50.6 ± 0.2 °C temperature rise in 30 s for 25 μg/mL gold (125 W input). The specific heating rate was also size and concentration dependent, with 5 nm particles producing a specific heating rate of 356 ± 78 kW/g gold at 16 μg/mL (125 W input). Furthermore, we demonstrate that cancer cells incubated with GNPs are killed when exposed to 13.56 MHz RF-EM fields. Compared to cells that were not incubated with GNPs, three out of four RF-treated groups showed a significant enhancement of cell death with GNPs (p<0.05). GNP-enhanced cell killing appears to require temperatures above 50 °C for the experimental parameters used in this study. Transmission electron micrographs show extensive vacuolization with the combination of GNPs and RF treatment.     

金蒸气激光光敏疗法治疗膀胱癌的临床研究

报道经多种治疗后再生的膀胱癌患者７０例，共３１６个肿瘤，用光纤输出功率２Ｗ，带有球型弥散刀头石英光纤传输的金蒸气激光，通过膀胱镜作肿瘤及全膀胱血卟啉光敏治疗，经６～４６个月的随访，痊愈５４例，占７７．１４％，显效１２例占１７．１４％，好转４例，占５．７％，再生８例，占１１．４３％。     

GaSb基的InAs/GaSbⅡ类超晶格背景载流子浓度的测量

高质量的InAs/GaSbⅡ类超晶格(SLs)材料生长在晶格匹配的GaSb衬底上,由于GaSb衬底具有良好的导电性,传统的霍尔测量难以直接得到外延超晶格材料的载流子浓度等电学参数,所以,如何准确地获得InAs/GaSb超晶格外延材料中的载流子浓度成为了研究人员关注的焦点之一。主要介绍了InAs/GaSbⅡ类超晶格背景载流子浓度测量的四种典型的方法:低温霍尔技术;变磁场霍尔技术以及迁移率谱拟合;衬底去除技术;电容-电压技术。并给出了各种方法的基本原理,评价了每种方法的优缺点。     

飞秒激光制备阵列孔金属微滤膜

选用不锈钢、铜和铝三种金属薄膜作为实验材料,厚度10~50μm.对不锈钢、铜和铝三种金属薄膜进行飞秒激光加工,研究了所形成的微纳米孔直径与飞秒激光加工参数的关系.结果表明,飞秒激光加工的微孔直径随单脉冲能量和脉冲数的平方根的增大而增大.不锈钢薄膜适于飞秒激光制作金属微孔膜,在25μm厚的不锈钢薄膜上制备了大面积阵列微孔,孔直径为2.5~10μm,孔间距为10~50μm.与传统烧结金属微孔过滤膜比较,飞秒激光制备阵列微孔金属膜具有膜孔尺寸均匀一致、直通孔形、膜孔尺寸和间距可控等特点,可获得较高的孔隙率,有利于提高透过水通量.     

Enhancement of the transforming activity of simian adenovirus S5 and of the DNA from human adenovirus type I by benzo(a)pyrene and TPA

Benz(a)pyrene in a concentration of 2.5 micrograms/ml produced a 3.3-fold increase in the transforming activity of simian adenovirus S5 in primary cultures of rat kidney cells. Under analogous conditions TPA increased (2.1 times) the transforming activity of DNA of human adenovirus of type I (AdI). PX5 cells (cotransformed by S5 and benz(a)pyrene) induced tumours in 100% of syngeneic and 81% xenogeneic animals. PX4 cells (transformed by S5 only) induced tumours in 60% of syngeneic animals. Cells transformed by DNA AdI and DNA AdI + TPA did not induce tumours in animals.     

Quantitative immunoenzyme determination of the lactoferrin and alpha-lactalbumin in the blood serum of cancer patients

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has been used for quantitative determination of lactoferrin (Lf) and alpha-lactalbumin (alpha-La) in human blood serum. The mean concentration of Lf in normal serum was 265 +/- 21 ng/ml and that of alpha-La did not exceed 5 ng/ml. The increased Lf level (above 450 ng/ml) was found in 16 of 30 (53%) patients with gastrointestinal cancer, in 11 of 25 (44%)--with lung cancer, in 13 of 42 (31%)--with breast cancer and more rarely--in other cancer patients. The increased alpha-La level (above 5.0 mg/ml) was found in 5 of 42 patients with breast cancer and very rarely--in other cancer patients. A conclusion is drawn that serological measurements of Lf and alpha-La were of no diagnostic value for breast cancer.     

一锅水热法制备炭-铁磁体复合材料及红外消光性能研究（特约）

通过一锅水热法制备了炭包铁氧体前驱体，并在950 ℃氮气保护条件下焙烧得到了炭包铁磁体复合材料。通过XRD、FT-IR、SEM等方法，分析了复合材料的形貌、成分，研究了反应时间、淀粉和葡萄糖的配比等因素对复合材料形貌及红外消光性能的影响。采用傅里叶红外光谱仪的KBr压片法测试并计算了各材料在2.5~25 μm区间的红外消光系数。研究结果表明:反应时间为20 h和18 h，淀粉与葡萄糖的配比为9:3和6:10时，焙烧后样品的球形形貌较好，5号和7号样品在4~10 μm波段范围内消光性能较好，消光系数均大于0.3 m2/g，最高可达到0.37 m2/g。