高效液相色谱-串联质谱法测定桑叶茶中1-脱氧野尻霉素的含量

目的 建立了桑叶茶中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,1-DNJ)含量的高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法 样品经70%甲醇水超声提取,用xbridge amide柱(2.1 mm×100 mm, 3.5 μm)分离, 以含0.1%(V/V)甲酸溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱, 采用大气压化学电离(Atmosphere Pressure Chemical Ionization, APCI)和多离子检测模式(multiple reaction monitoring, MRM)进行检测,外标法定量。方法 目标物在0.01~0.2mg/L范围内线性相关系数大于0.99; 1-脱氧野尻霉素的定量限为5mg/kg;在5~50mg/kg浓度范围内加标回收试验, 平均回收率在94.2%~98.7%, 相对标准偏差为3.2%~4.7%。结论 该方法具有分析速度快、操作简便等优点,可用于桑叶茶中1-脱氧野尻霉素的含量测定。     

RP-HPLC法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:改进反相高效液相色谱-紫外检测法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的定量分析方法。方法:以9-氯甲酸芴甲酯为柱前衍生试剂,采用RP-HPLC法,色谱柱为Agela odyssilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为V乙腈∶V0.1%冰醋酸=40∶60,流速1.0mL/min,检测波长254nm,柱温30℃。结果:1-脱氧野尻霉素的检测质量浓度在1.158×10-3～2.5mg/mL范围,与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9998),平均回收率为100.9%。结论:本法简便可行,重复性好,准确度高,适合桑叶中DNJ含量的检测。     

荧光衍生化法测定不同季节桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量

目的：建立测定桑叶中1-脱氧野尻霉素（1-DNJ）含量的方法,并比较不同季节桑叶中1-DNJ的含量。方法：采用高效液相色谱法测定,以芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）为柱前衍生化试剂,对衍生化条件进行了优化;色谱柱为Kromasil C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%醋酸（50∶50）,流速1.0mL/min,柱温30℃,荧光检测器激发波长254nm,发射波长322nm。结果：1-DNJ在10～35mg/L范围内线性良好（r=0.99959）,检测限为0.80mg/L（S/N=3）,平均回收率为95.38%,相对标准偏差2.28%（n=5）。桑叶中1-DNJ的含量在不同生长季节间存在显著差异。结论：方法简便、快速、准确,适用于桑叶中1-DNJ含量的定量分析。     

超声波提取桑叶中1-DNJ的响应曲面法优化研究

为了探索超声法对桑叶中1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)进行提取的最佳方案,利用超声波取技术,依次用响应面法考查料液比、提取温度、提取时间以及超声功率对桑叶中1-DNJ提取率的影响,优选出桑叶1-DNJ(1-脱氧野尻霉素)在使用超声法提取装置时提取的最佳工艺。结果显示:响应面法的最佳提取条件为:液料比1∶21.98、提取温度52.11℃、时间34.89min、超声功率75w,预期的1-DNJ得率0.743%。     

响应面法优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺

为优化提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺,采用响应面分析法,以发酵温度、发酵时间及接种量为自变量,1-脱氧野尻霉素含量为响应值,设计三因素三水平响应面回归分析。结果表明:提高发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量工艺的最佳工艺条件为发酵温度30℃、发酵时间5.6 h、黑曲霉∶日本根霉∶绿色木霉=2∶1∶2菌液接种量3.75×107 CFU/100 g,在此条件下发酵桑叶茶中1-脱氧野尻霉素含量为133.882 mg/100 g。     

超高效液相色谱法检测药桑椹中1-脱氧野尻霉素

建立超高效液相色谱测定新疆药桑椹中1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin,DNJ）含量的方法。药桑椹粉经0.05 mol/L盐酸提取,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液条件下,氯甲酸-9-芴基甲酯（9-fluorenylmethyl chloroformate,FMOC-Cl）与DNJ反应生成具有紫外吸收的络合物（DNJ-FMOC）,然后采用超高效液相色谱-紫外检测器测定。液相色谱条件为CORTECSTM C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）,流动相为乙腈-0.5%醋酸（28∶72,V/V）,在流速0.6 mL/min、柱温28 ℃、检测波254 nm条件下检测。结果表明：DNJ与其他组分分离效果良好,方法检出限为0.1 μg/mL（RSN=3）,线性范围在0.5～20 μg/mL,相关系数（r）为0.999 970,加标回收率平均为106.4%。精密度实验、稳定性实验、重复性实验以及回收率实验表明,该方法稳定可靠,可作为测定药桑椹中DNJ含量的有效方法。     

不同季节桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的测定

建立了柱前荧光衍生-高效液相色谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的方法。并对不同生长季节桑叶药材的DNJ含量进行测定。桑叶经0.05mol/L盐酸提取,在pH8.5的硼酸盐缓冲液条件下,用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)与DNJ反应生成荧光产物,然后用高效液相色谱-检测器测定。流动相为乙腈-0.1%醋酸(55:45,V/V);流速:1.0ml/min;柱温25℃;荧光检测器激发波长254nm,发射波长322nm。线性范围为0.567～34μg/ml(r=0.9999),平均回收率为97.2%。测定结果表明,桑叶中DNJ含量与生长季节、温度有关,七、八月份DNJ含量最高。该方法准确、灵敏度高,重现性好,可用于桑叶中DNJ的定量分析。     

高效液相色谱法测定降糖型保健食品中的1-脱氧野尻霉素

目的 建立柱前衍生高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定保健食品中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin, 1-DNJ)的分析方法。方法 样品经水超声提取20 min, 在0.4 mol/L硼酸钾缓冲溶液(borate buffer solution, BBS)(pH=8.5)中, 1-DNJ与5 mmol/L芴甲氧羰酰氯(methoxycarbonyl chloride, FMOC-Cl)在20 ℃中水浴衍生30 min, 滤液采用HPLC进行检测。以乙腈+磷酸水溶液为流动相, 梯度洗脱。结果 1-DNJ 在1.0~20.0 μg/mL浓度范围内, 线性关系良好, 相关系数(r)=0.9993。回收率为90.96%~101.85%; 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为1.9%~3.4%。结论 该方法前处理简便, 结果准确, 灵敏度较高, 适用于保健食品中1-DNJ含量测定。     

不同产地及季节桑叶中DNJ的含量测定

建立固相萃取-高效液相色谱法测定不同地域及季节桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量,了解不同地域桑叶DNJ含量变化规律从而确定最佳的桑叶采摘区域和采摘期。采用固相萃取对桑叶药材提取液中的DNJ净化、富集,用高效液相色谱测定含量。色谱柱为Shodex Asahipak NH50(4.6 m×250 mm,5μm),蒸发光散射检测器,漂移管温度为100℃,流动相为乙腈-6.5 mmol/L乙酸铵水溶液(82∶18,V/V)等度洗脱,流动相流速为1.0 m L/min,进样量为10μL。DNJ在84.39-421.9 mg/L范围内线性关系良好(相关系数R~2=0.999 7),平均回收率为100.6%,RSD为1.27%。桑叶中DNJ在不同季节和不同地域间存在显著性差异。该方法简便、准确、重现性好,可用于桑叶中DNJ含量的测定。     

桑叶及桑叶茶中脱氧野尻霉素及其影响因素的研究进展

介绍了桑叶茶及其原料桑叶的重要功能成分脱氧野尻霉素(DNJ)及其优点,影响桑叶茶保健成分脱氧野尻霉素含量的因素,DNJ的保健作用,以及桑叶中DNJ的分离、纯化、测定方法,对桑叶以及DNJ以后的开发前景进行了展望.     

薄荷和留兰香嫩叶维生素种类及含量研究

目的：比较不同来源地薄荷(青茎和紫茎)及留兰香资源中上部叶维生素种类和含量差异。方法：水溶性维生素用Luna C18 (2) 100A(200mm × 4.6mm,5μm),流动相0.005mol/L 己烷磺酸钠(用稀磷酸调pH3.2)- 甲醇(7:3,V/V),流速1.0ml/min,柱温30℃,紫外检测波长254nm;脂溶性维生素用Hyperclone BDS C18(150mm ×4.6mm,5μm),流动相甲醇- 乙酸乙酯(95:5,V/V),流速1.0ml/min,柱温25℃,紫外检测波长275nm。结果：在薄荷和留兰香中上部嫩叶中仅检测到VC、VD2 和VK1,它们均具有良好的线性关系,VC、VD2 和VK1 平均空白回收率分别为99.85%、81.61% 和90.27%。所有薄荷材料中,来源四川简阳的薄荷VC 含量最高,达118.41mg/100g,而VD2 和VK1 存在于重庆的两份薄荷材料中,含量相对较高。留兰香中VC 含量普遍低于薄荷中VC 含量,多数紫茎薄荷比青茎薄荷VC 含量高。VD2 和VK1 在薄荷和留兰香间,以及紫茎和青茎薄荷间差异不明显。结论：该方法适用于薄荷资源新鲜叶片维生素含量同时测定。薄荷和留兰香中上部嫩叶中各维生素种类一致,含量不尽相同,存在一些个别维生素含量较高的资源材料,同时薄荷普遍比留兰香VC 含量高。     

药桑叶多糖提取工艺优化及其降血糖活性研究

采用Box-Behnken试验设计对药桑叶多糖提取条件（液料比、提取温度、提取时间）进行优化,并用对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷（p-NPG）法对药桑叶多糖进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定。结果显示,药桑叶粗多糖提取最佳工艺为：在液料比25∶1（mL∶g）,提取温度90 ℃、提取时间3 h条件下,药桑叶粗多糖提取率最高为（13.39±0.53）%。降血糖初步研究结果为：药桑叶粗多糖对α-葡萄糖苷酶有较好的抑制活性,其半抑制浓度（IC50）为0.96 mg/mL。     

HPLC法测定龙眼肉中的几种核苷类物质

目的:建立HPLC法测定龙眼肉中腺苷、尿苷和腺嘌呤的含量。方法:采用NucleosilC18反相柱(250mm×4mm),以0.01mol/L的KH2PO4:乙腈=92:8为流动相,流速为1ml/min,检测波长为254nm,柱温40℃,用外标法,测定了龙眼肉中腺苷、尿苷和腺嘌呤的含量。结果与结论:分析中选取腺苷的线性范围0.1～20.0μg/ml,相关系数r=0.9999,回收率94.59%,RSD3.10%;尿苷的线性范围0.05～10.0μg/ml,相关系数r=1,回收率97.49%,RSD4.50%;腺嘌呤线性范围0.05～10.0μg/ml,相关系数r=1,回收率103.11%,RSD1.90%。该方法简便快速,线性关系良好。     

桑叶多糖的含量测定

用蒽酮-硫酸比色法测定了桑叶中多糖的含量。测定波长620nm,多糖换算因子f=3.07;在10～60μg/ml范围内吸收度与被测物含量呈良好的线性关系,r=0.999005;多糖的平均回收率为98.81%,RSD为2.08%(n=5)。测定结果表明,10月份桑叶中多糖含量最高。本法简便、准确、重现性好,可作为桑叶中多糖的含量测定方法。     

固相萃取-离子对液相色谱法测定保健品中的叶酸

建立了一种快速、准确、灵敏的固相萃取- 离子对反相高效液相色谱测定保健品中叶酸的方法。用Chromabond-SB 萃取小柱富集保健品中的叶酸,以四丁基溴化铵为离子对试剂,优化了色谱条件。采用 Lu-Na C18色谱柱(250mm × 4.6mm,5μm),SPD-6AV 紫外可见吸收检测器,流动相为0.05mol/L KH2PO4-0.01mol/L 四丁基溴化铵- 乙腈(88:2:10,V/V),用磷酸调节 pH5.5,流速 1.0ml/min,检测波长284nm。结果表明：叶酸在0.06～2.40μg/ml 浓度范围内,峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9996,最小检出限为0.008μg/ml,加标回收率为 95.14%～102.87%。     

高效液相色谱法测定饮料中的新红、诱惑红及赤藓红

利用高效液相色谱法测定饮料中的新红、诱惑红及赤藓红含量,确定了检测条件为：Agilent C18 (150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温25 ℃,流动相为乙酸铵-甲醇(92∶8, V/V),流速1.0 mL/min,进样量10 μL,检测波长254 nm。结果表明,新红、诱惑红及赤藓红在0～50 μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 8),平均加样回收率为91.0%～96.8%,平均相对标准偏差(RSD)为0.4%～2.9%,新红、诱惑红及赤藓红的检出限分别为0.10 mg/kg、1.00 mg/kg及0.70 mg/kg。该方法快速准确,适用于饮料中的新红、诱惑红及赤藓红含量的测定。     

荷叶生物碱提取响应曲面优化研究

以荷叶为材料,在提取温度、提取时间、乙醇体积分数和液料比4 个单因素试验的基础上,利用响应曲面试验设计法对荷叶生物碱提取条件进行研究,并通过回归方程和响应曲面,得到的最佳提取工艺为：提取温度84℃,提取时间2.01h,乙醇体积分数90.65%,液料比29.74:1(ml/g)。验证实验结果显示,此条件下荷叶生物碱提取率为0.858%。荷叶碱在6.40～32.00μg/ml 范围内具有良好的线性关系,r =0.992,荷叶中荷叶碱占荷叶生物碱提取物的比例为7.952%,荷叶中荷叶碱的含量为0.186%。