白背三七多糖的结构表征及α-葡萄糖苷酶的抑制活性

采用气相色谱、高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR对白背三七分离多糖GDPs-1和GDPs-2的一级结构进行表征;通过刚果红实验和X射线衍射对其高级结构进行初步探究;并研究各种多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明：DPs-1由D-Fru、L-Rha、L-Ara、D-Xyl、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.2:0.4:1:1:1:2:7;GDPs-2由L-Ara、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.4:2:2:0.1;高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR显示GDPs-1主链重复单元为α-(1→2)-Gal残基,支链由α-(1→3)-Xyl、α-(1→3)-Man、α-(1→2)-Glu、Me-α-Araf构成;GDPs-2主链重复单元为α-(1→3)-Man残基,支链由α-(1→2)-Glu和α-(1→6)-Glu组成;刚果红实验表明GDPs-2分子存在较为稳定的三股螺旋构象;X射线衍射显示2种多糖分子规整性不强,以多晶体无定形态存在;体外降血糖研究表明,白背三七粗多糖GDPs-1和GDPs-2对α-葡萄糖苷酶的抑制活性均极低,提示其并非通过抑制α-葡萄糖苷酶活性来实现降血糖功效。     

莲子红衣多糖的分离纯化及结构表征

以莲子红衣为实验对象,将其中的多糖进行分离、纯化并表征结构。采用酶提醇析法提取莲子红衣粗多糖,选择DEAE-C阴离子交换树脂和Sephadex G-25凝胶柱层析,从莲子红衣粗多糖中分离纯化得到中性多糖和酸性多糖两种组分。经凝胶渗透色谱测定,中性和酸性多糖的重均分子质量分别为3.78×104 D和4.94×104 D,纯度分别为91.16%和90.24%。中性多糖组分由葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖4 种单糖组成;酸性多糖组分由葡萄糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、阿拉伯糖5 种单糖组成。红外光谱证明两种多糖中均含有糖类特征吸收峰,且为α构型的吡喃型多糖。核磁共振氢谱检测又进一步证实了两种多糖均为α构型。     

酵母细胞壁多糖分子量分布和结构的初步分析

以啤酒酵母细胞壁多糖为研究对象,比较了Sevage法和三氯乙酸(TCA)法脱蛋白效果,利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定了细胞壁多糖的分子量分布,用葡聚糖凝胶G-100对多糖进行了纯化,最后用红外光谱法分析了多糖组分D的结构,结果表明:Sevage法脱蛋白效果较好,GPC测定结果得出酵母细胞壁多糖有5个组分,其重均分子量为1.31745×105、7.0863×104、3.6988×104、1.8277×104、8.342×103。红外光谱分析得出多糖组分D在890.51cm-1和808.48cm-1有特征吸收,为β-D-吡喃型结构,在844cm-1处没有吸收峰,不含有或含有少量的α-型糖苷键。     

正红菇子实体多糖HAP-Ⅰ的结构和抗氧化活性评价

以正红菇子实体分离纯化后得到的单一多糖HAP-Ⅰ为研究对象,用高效凝胶渗透色谱(GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用FT-IR、GC、高碘酸氧化和Smith降解、NMR研究HAP-I分子内部结构;通过体外抗氧化法清除自由基DPPH、O2-、OH以及还原力测定,评价HAP-I抗氧化能力。结果表明,HAP-Ⅰ重均相对分子量MW 16860 u;FT-IR显示HAP-Ⅰ具有多糖的特征吸收峰且为含氨基的β型D-葡萄糖环构型;GC结果显示HAP-Ⅰ含鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖4种单糖,摩尔比为1:8.29:7.45:18.13;高碘酸氧化和Smith降解结果表明,HAP-I是含有甘露糖苷的D-吡喃葡萄糖环,包括α构型和β构型,不含有1→4糖苷键,由66.7%1→3糖苷键,22.24%的1→6、1→糖残基和11.06%1→2糖残基组成;NMR表明HAP-I是含有半乳糖基的吡喃糖,既有α构型,也有β构型;体外抗氧化结果表明,HAP-I有较强的清除自由基DPPH、O2-、OH作用和还原能力。     

黄蜀葵胶中的糖分析

目的：分析不同来源的黄蜀葵胶中的糖含量、多糖相对分子质量及其单糖组成。方法：采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定4种黄蜀葵胶中还原糖、总糖和总多糖的含量,并解析其红外吸收光谱图;凝胶渗透色谱法测定纯化后的4种多糖的相对分子质量,气相色谱法分析其单糖组成。结果：4种黄蜀葵胶的还原糖质量分数分别为51.07%、9.00%、53.94%和11.46%,总糖质量分数分别为79.95%、78.99%、91.98%和61.13%,总多糖质量分数分别为28.88%、69.99%、38.04%和49.67%;红外谱图显示AMG-1、AMG-3中主要含α-D-吡喃葡萄糖,AMG-2和AMG-4中主要含有甘露糖;4种黄蜀葵胶中多糖的峰值相对分子质量分别为3.91×103、5.36×105、3.87×103和5.12×105;4种样品均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质量之比分别为0.42:1.00:0.27、1.00:0.15:0.54、0.27:1.00:0.15和1.00:0.12:0.48。结论：不同来源的黄蜀葵胶在还原糖、总糖和总多糖的含量,多糖相对分子质量及其单糖组成上均存在较大差异。     

仿刺参肠道多糖的纯化及理化分析

目的：对仿刺参肠道多糖进行纯化,并对纯化产物进行理化分析。方法：使用葡聚糖凝胶(G-100)层析柱分离出两种仿刺参肠道多糖,选取其中多糖A进行研究。使用葡聚糖凝胶(G-100)柱层析法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度检测,葡聚糖凝胶(G-200)柱层析测定分子质量,高效液相色谱法确定其单糖组分,并结合红外吸收光谱法与核磁共振对其结构进行初步检测。结果：实验所得纯化产物多糖A为均一组分,主要含有氨基糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐和岩藻糖3种单糖,并含有少量的氨基葡萄糖、半乳糖。其中岩藻糖有α和β两种构型,以α-岩藻糖硫酸酯残基、β-岩藻糖硫酸酯残基形式存在。分子质量约为18.8×104D。结论：该纯化产物多糖A为一种酸性多糖,推测其为硫酸软骨素类。     

野阳合多糖及其纯化组分对胆汁酸的结合能力

以野阳合为原料,采用水提醇沉法提取粗多糖,经离子交换柱层析和凝胶柱层析,得到4?种多糖组分YP1-1、YP2-1、YP2-2和YP3-1。采用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用,进行纯度鉴定及分子质量测定,利用柱前衍生高效液相色谱法分析各多糖组分的单糖组成,通过紫外光谱分析、傅里叶变换红外光谱进一步分析多糖结构,并通过模拟肠道内环境,测定多糖体外结合胆汁酸的能力。结果显示：野阳合粗多糖提取率为2.41%,总糖质量分数为96.35%;YP1-1、YP2-1、YP2-2和YP3-1均不含核酸和蛋白质,均为均一多糖,分子质量分别为3.52×106、3.08×106、1.93×106?Da和3.35×106?Da;主要为吡喃型糖苷环骨架,糖苷键以β-构型为主;YP1-1和YP3-1的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,YP2-1和YP2-2的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、岩藻糖、葡萄糖和半乳糖。以上4?种多糖对胆汁酸有较强的结合能力,结合率均高于97%。     

杏鲍菇多糖组分的分离纯化及结构鉴定

目的 对含有岩藻糖(fucose, Fuc)的杏鲍菇多糖进行分离纯化, 并分析其结构。方法 通过水提分级醇沉得到60%乙醇醇沉杏鲍菇多糖(Pleurotus eryngii polysaccharides, PEP)。杏鲍菇多糖经离子交换层析和凝胶层析分离纯化, 采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography, GPC)测定PEP各组分的相对分子质量; 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测岩藻糖; 傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectrum, FT-IR)、X-射线衍射(x-ray diffractometer, XRD)分析、原子力显微镜(atomic force microscope, AFM)观察等方法对PEP各组分进行结构表征。结果 PEP经分离纯化得到PEP-1、PEP-2和PEP-3共3种多糖组分, 分子量依次为1.585×106、4.266×104和1.995×103 Da。岩藻糖存在于PEP-1组分中; FT-IR显示PEP-1和PEP-2存在C-O-C键拉伸和吡喃环构型; PEP-2存在β型糖苷键, PEP-3为β-葡聚糖。XRD结果显示3个组分多糖结晶指数分别为38.89%、47.22%和20.00%。AFM观察结果显示, PEP-1整体呈现流星状结构, 多糖粒子聚集; PEP-2为链状螺旋结构且以小球状体聚集; PEP-3呈现小螺旋棒状结构。结论 PEP分离纯化得到3个组分多糖, 岩藻糖存在PEP-1组分中。     

黄桃水溶性多糖的化学结构分析

采用水提醇沉法从黄桃果肉中提取出水溶性多糖HTP,HTP先后经DEAE-Sepharose离子交换色谱和Sephacry1G-300凝胶过滤色谱纯化得到HTP1和HTP2,经高效分子排阻色谱法(简称HPSEC)鉴定其纯度及计算分子量,HTP1和HTP2均为单一多糖,分子量分别为52107和59855。HTP1和HTP2经完全酸水解后,分别经TLC和HPLC分析,发现HTP1单糖组成为D-Glc、D-Gal、D-Arb和L-Rha,其摩尔比为1.0∶4.2∶14.5∶1.5;HTP2单糖组成为D-GalA、D-Man和D-Gal,其摩尔比为34.3∶5∶1。经高碘酸氧化、Smith降解、紫外光谱、红外光谱和核磁共振等方法分析其连接方式和构型,结果表明,HTP1多糖主链为α-(1→3)键连接的阿拉伯半乳糖结构,侧链含有少量的D-Glc和L-Rha;HTP2多糖主链为α-(1→3)键连接的D-GalA,侧链含有部分D-Man和D-Gal。     

桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

黑加仑果实降解多糖理化特性、结构及体外降血糖活性

本实验以微波辅助溶剂法提取的黑加仑果实多糖为原料，采用超声辅助Fe2＋-VC-H2O2降解，经Sepharose 6B柱层析法分离，得到两种多糖（DP-1和DP-2）。经液相色谱测定DP-1和DP-2分子质量分别为1.29×106 Da和1.07×106 Da；气相色谱测定结果表明，DP-1和DP-2由相同的6 种单糖构成，但组成比例不同。傅里叶变换红外光谱、高碘酸氧化及核磁共振分析结果表明，DP-1和DP-2糖链上都含有α-、β-吡喃环，且主要是由6 种糖残基构成。功能特性测定结果显示DP-1和DP-2具有一定的吸湿性、保湿性及热稳定性。活性实验结果证实多糖DP-1和DP-2对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶具有显著的抑制活性，质量浓度为2.0 mg/mL时，对α-葡萄糖苷酶抑制率最高，分别为（67.45±3.45）%和（73.22±0.48）%；对α-淀粉酶抑制率也最高，分别为（64.74±2.08）%和（73.28±2.52）%。此外，两种多糖对α-淀粉酶的抑制属于可逆竞争型。本研究可为黑加仑果实多糖的进一步利用提供理论参考。     

桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性

研究液体发酵桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换柱层析分离分级得到多个级分,以较大分子质量的中性多糖为主。凝胶渗透色谱分析表明桑黄菌胞内多糖的重均分子质量范围为5.7×103～6.1×106D,由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,其分子物质的量比为15:4:1,多糖含量为41%,特性黏度为12mL/g。通过体外抗氧化模型,发现桑黄菌胞内多糖均能较好的清除 ·OH、O2－ ·和螯合Fe2+,且对O2－ ·具有明显的清除作用。     

紫苏籽多糖分离纯化及抗肿瘤活性

为了探究紫苏籽多糖（Perilla frutescens seed polysaccharide,PFSP）的抗肿瘤活性,利用传统方法从紫苏籽中提取粗多糖,利用DEAE-52纤维素和葡聚糖G-100柱层析分离纯化获得紫苏籽多糖,并测定该多糖对H22荷瘤小鼠免疫系统的影响。结果表明,紫苏籽粗多糖得率为8.38%,分离纯化后得到3 个组分,分别命名为PFSP-1、PFSP-2和PFSP-3。PFSP-1由甘露糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.01∶0.06∶0.11∶0.81）组成,PFSP-2由甘露糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.28∶0.28∶0.41）组成,PFSP-3由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.013∶0.024∶0.040∶0.080∶0.120∶0.700）组成;3 个组分均具有多糖特征吸收峰,为吡喃环型多聚糖。抗肿瘤实验表明,PFSP-2抑瘤率显著高于PFSP-1和PFSP-3（P＜0.05）;对PFSP-2进一步研究发现,与模型组相比,PFSP-2可显著降低乳酸脱氢酶、醛缩酶和白细胞介素（interleukin,IL）-10质量浓度（P＜0.05）,提高IL-2、肿瘤坏死因子α质量浓度（P＜0.05）,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax表达（P＜0.05）,说明PFSP-2通过提高小鼠自身免疫能力抑制体内肿瘤细胞的生长。     

沙棘果水溶性多糖的分离纯化、组分分析及抗氧化活性的研究

用热水提取沙棘果多糖，乙醇沉淀，并用正交实验确定最佳条件，Sevage法去蛋白，酸性乙醇分级沉淀，分出A、B、C及D四个组分，其中C用DEAE柱层析进一步纯化出C1和C2两个级分，Sephadex G-75及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明C1为单一组分，C2为两种多糖混合组分，经薄层层析分析，C1中含葡萄糖。C2的主要级分中含木糖和一未知组分。抗氧化实验表明沙棘多糖具有抗氧化活性，且抗氧化作用随浓度增加而加大。     

花生非淀粉多糖的纯化技术研究

以冷榨花生粕为原料,采用高温热水提取花生多糖(PPS)。通过正交实验优化酶解法去除花生粗多糖中淀粉的最佳工艺条件,并利用DEAE-52纤维素离子交换柱层析对花生多糖进行分离纯化。结果表明:在最佳工艺条件下,耐高温α-淀粉酶和糖化酶酶解除淀粉后的花生多糖纯度明显提高;DEAE-52柱层析主要得到中性多糖PPS-1和酸性多糖PPS-2,其含量分别为17.79%和66.93%;紫外扫描结果显示PPS-1和PPS-2均不含核酸,PPS-1含有少量的蛋白。     

DEAE琼脂糖凝胶纯化龙胆多糖及其分子特性

以龙胆为原料提取龙胆多糖,纯化后对其分子特性进行研究。通过正交试验确定了龙胆多糖的最佳提取参数：浸提时间2.5 h、浸提温度90 ℃、液料比20∶1（V/m）,得率为12.80%。利用DEAE琼脂糖凝胶柱对龙胆多糖粗品进行纯化,得到F1和F2两个分离组分,得率分别为14.1%和63.4%。化学组成分析表明龙胆多糖粗品、F1和F2是由不同含量的总糖、蛋白质、硫酸根和糖醛酸组成的,单糖组成主要包括阿拉伯糖和半乳糖,同时含有少量的葡萄糖、鼠李糖、甘露糖和木糖。采用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统对多糖的分子质量及分布进行分析,结果表明龙胆粗品、F1和F2分子质量（Mw）为67.2×103～788.4×103 u,回转半径（Rg）为90.2～321.1 nm。研究确定了龙胆多糖的提取参数,并通过离子交换柱进行纯化,分析了龙胆多糖的分子特性,为下一步的生物活性研究奠定了基础。