实时荧光定量PCR技术在出入境检验检疫中

实时荧光定量PCR是一种将核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起的新技术.由于其检测速度快,且灵敏性高、特异性好、定量准确而被广泛应用于食品中致病微生物的检测.本文主要从食品致病菌、植物病害和动物疫病三方面来总结实时荧光定量PCR在出入境检验检疫中的应用研究进展.     

实时荧光定量PCR技术在出入境检验检疫中的应用研究进展

实时荧光定量PCR是一种将核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起的新技术。由于其检测速度快,且灵敏性高、特异性好、定量准确而被广泛应用于食品中致病微生物的检测。本文主要从食品致病菌、植物病害和动物疫病三方面来总结实时荧光定量PCR在出入境检验检疫中的应用研究进展。     

实时荧光定量PCR技术在出入境佥验检疫中的应用研究进展（连载）

实时荧光定量PCR是一种将核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起的新技术。由于其检测速度快,且灵敏性高、特异性好、定量准确而被广泛应用于食品中致病微生物的检测。本文主要从食品致病菌、植物病害和动物疫病三方面来总结实时荧光定量PCR在出入境检验检疫中的应用研究进展。     

实时荧光定量PCR仪关键参数检测分析

温度和光学是实时荧光定量PCR仪的关键参数,在疫情防控过程中,实时荧光定量PCR仪性能可靠与否,直接关系着病毒是否会被"漏检".本文采用自主研发的实时荧光定量PCR仪专用温度和光学校准装置,对实时荧光定量PCR仪的关键参数进行了检测,检测结果能够真实地反应实时荧光定量PCR仪关键参数的状态,有助于提高实时荧光定量PCR仪的检测结果可靠性.     

实时荧光定量PCR在细菌性食源性疾病中的应用

分析近年来国内外导致食源性疾病的致病微生物检测技术发现七种常见致病菌已建立可行的基于实时荧光定量PCR技术的检测方法。实时荧光定量PCR技术将成为细菌性食源性疾病检测的重要手段。     

实时荧光定量PCR检测系统的研究

实时荧光定量PCR仪是当前临床核酸检测、分子诊断以及生命科学研究的关键设备,目前广泛应用于生物学及医学研究的各个领域。通过对实时荧光PCR检测系统的新结构革新,采用底部快速扫描技术及先进的半导体制冷器控制的升降温系统,使实时荧光PCR检测系统性能得到飞跃,达到国际先进的水平。     

荧光定量PCR仪光学校准方法与结果分析

实时荧光定量PCR仪特异性更强,自动化程度更高,且有效地解决了PCR污染的问题,应用领域及应用量都不断增加。但其设计更为复杂,温度模块和光学系统设计同时影响其性能和实验准确性,为定量PCR仪校准带来了巨大挑战。采用生物试剂等方式对定量PCR仪荧光部分校准缺乏溯源性,无法分析误差来源,存在较大缺陷。本文在对定量PCR仪影响因素和校准现状分析的基础上,采用Cyclertest 3D optical定量PCR仪光学校准系统对ABI 7500 Fast Real-Time定量PCR仪的温场部分和荧光系统进行了检测并对检测结果进行了分析,结果表明对温度模块和光学系统共同进行检测并分析相关性能够更科学全面地评估定量PCR仪性能,满足定量PCR仪校准需求。     

生物微流控PCR荧光芯片微通道动态检测系统研究

研究和建立了生物微流控PCR荧光芯片微流控微通道动态检测系统,对该系统的多光路光纤校准进行了研究,获得了荧光检测的重复性(偏差:2.6%)和稳定性(偏差》2.7%)等.实验结果表明:该系统可用于准分子激光制备高聚物基生物微流控PCR荧光芯片最佳工艺激光制备参数的优化设计;可用于生物微流控PCR荧光芯片生物分析时的实时荧光定量检测;也可用于对激光荧光检测微型化技术与生物芯片光谱检测集成化提供多功能实验基础和性能评估体系.     

一种基于熔解曲线的实时荧光定量PCR仪校准方法

针对实时荧光定量PCR仪光学校准方法的不完善,通过对实时荧光定量PCR仪校准必要性、基本结构和数学原理的分析,基于熔解曲线从C_t值均匀度、C_t值精密度、通道峰值高度一致性、线性灵敏系数、熔解温度漂移和熔解温度比等方面对实时荧光定量PCR仪校准方法进行分析。     

常用的转基因种子检测方法

本文主要介绍了几种常用转基因种子的检测方法,主要包括定性PCR检测方法、实时荧光定量PCR检测方法、特异蛋白检测法和生物表现型检测法,并简要介绍了这些方法的应用和优缺点,可供转基因种子检测研究参考。     

实时荧光定量RT-PCR检测石斑鱼病毒性神经坏死病

用TaqMan探针技术设计探针和引物,建立了检测石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的实时荧光定量RT-PCR方法.对影响PCR反应的主要因素Mg2 浓度和退火温度进行了优化,表明当Mg2 浓度为3.0～3.5 mM,退火温度为58～59℃时可获得最佳的扩增和检测效果.应用鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)NNV主衣壳蛋白基因组片段构建的噬菌体假病毒作为阳性质控品,具有很好的稳定性.鞍带石斑鱼NNV的检测试验表明,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法是检测石斑鱼神经坏死病毒的一种快速、灵敏、准确的检测方法.     

快检技术在食品安全监管中的应用和发展前景

介绍了各种食品快检技术,包括:化学比色法、酶联免疫法、免疫胶体金试纸、荧光定量PCR技术、生物芯片、生物化学发光检测仪和便携式检测仪器等在食品现场快速检测中的研究进展及应用,探讨了快检技术在食品安全监督中的应用和发展前景。     

LAMP实时浊度法快速检测大肠杆菌方法的建立与优化研究

根据大肠杆菌的特异性基因（malB）,设计与筛查环介导等温扩增（LAMP）的引物,通过对甜菜碱用量、环引物的浓度、反应温度、dNTPs用量等反应条件的优化,得到较佳的LAMP反应体系,建立了LAMP实时浊度法快速检测大肠杆菌;在较优条件下,先后对9株非大肠杆菌菌株进行特异性检测和5株大肠杆菌的进行同源性检测。此外,结合课题组自行研制的多通道浊度仪,对LAMP扩增产物进行实时浊度监测。结果表明：LAMP实时浊度法检测大肠杆菌的灵敏度达16.010 ng/L,与实时荧光定量PCR的检测限相当。因此,建立与优化LAMP实时浊度法可为食品中大肠杆菌的现场快速检测提供了有力手段。     

PCR分析仪器关键技术及其相关标准制定初探

目前,以实时荧光定量PCR分析仪为代表的PCR仪器已经实现了从PCR扩增到PCR分析过程的高度自动化及智能化。PCR分析仪器主要包括温度控制系统、光电检测系统和计算机控制及处理系统,集成了计算机、机械、电子和传感器等领域的最新技术成果。PCR分析仪器及技术在生物学及医学等诸多研究应用领域发挥着越来越重要的作用．     

转基因玉米TC1507基体标准物质协同实验及不确定度评定

7家实验室共同采用实时荧光定量PCR方法,对转基因玉米TC1507基体标准物质A、B、C3种含量水平的量值,进行了协同实验研究,并对得到的参考值进行了不确定度分析.实时荧光定量PCR方法协同实验结果表明,转基因玉米TC1507基体标准物质转基因含量的参考值分别为0.41％±0.22％、1.1％±0.4％、4.5％±1....     

荧光定量PCR仪计量校准结果的影响因素分析及控制

分析了荧光定量PCR仪计量校准过程中,温度检测部分和核酸样品定量检测部分的影响因素和控制方法,为校准实验室减小试验误差,提供准确可靠的荧光定量PCR仪计量校准结果提供参考。     

生物气溶胶监测仪的校准方法比较

生物气溶胶监测仪利用荧光光谱法检测空气中的生物性物质,对疾病防控以及生物防恐预警意义重大.研究发现目前的国产生物气溶胶监测仪在采集空气中的生物颗粒时并不能区分不同细菌状态,得到的为总细菌数.通过实时定量PCR法和菌落计数法检测BioSampler采集瓶中的微生物,发现总细菌数和可培养的细菌数差异显著.利用扫描电子显微镜...     

使用光纤实现荧光定量PCR检测

阐述了光纤在荧光定量PCR检测中的应用特点和荧光产生机理,给出了光纤耦合效率的计算公式。介绍了试验装置的构成和工作原理,列举了限制荧光检测的实际问题并提供了消除模块背景的方法。试剂检测的结果证实了使用光纤的检测系统具有很高的检测分辨率和8个数量级以上的动态线性范围,完全满足荧光定量PCR检测的要求。     

转基因食品的检测方法

随着转基因技术的快速发展,转基因作物的种类在不断增加,对转基因食品的定性、定量检测方法也在逐步完善.目前采用的转基因成分检测方法包括核酸检测和蛋白质检测,前者主要有定性PCR、定量PCR、印迹法和基因芯片技术.后者主要有ELISA和Western杂交.文章就这些检测方法进行综述,同时对其面临的问题及未来发展方向进行初步探讨和展望.     

转基因

正Q:转基因产品如何检测?目前应用的转基因检测方法有很多,一是以检测外源基因为目标,二是以检测外源蛋白为目标。其中基于核酸水平主要有:定性PCR检测、实时荧光定量PCR检测、核酸杂交方法、基因芯片法等;基于蛋白质检测手段主要有:免疫杂交方法,免疫试纸条,酶联免疫吸附法等,此外还有生物传感器筛选法、近红外线光谱法及电化学发光等转基因