SPA方法快速检验食品志贺氏菌的研究

ＳＰＡ（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌＰｒｏｔｅｉｎＡ）是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白质成分,具有同人和多种哺乳动物ＩｇＧ分子Ｆｃ段结合的能力。本方法用含Ａ蛋白丰富的金黄色葡萄球菌菌体与志贺氏菌属抗血清在一定条件下混合致敏,让抗体结合到金黄色葡萄球菌细胞壁Ａ蛋白上,制成ＳＰＡ诊断试剂。样品经过增菌后,即可用ＳＰＡ诊断试剂来检验。由于金黄色葡萄球菌表面丰富的Ａ蛋白能结合大量抗体,大大提高了检验方法的敏感性,缩短了检验周期     

硅橡胶增韧改性PHA复合材料的力学性能和结晶性能研究

用硅橡胶(SR)对聚羟基脂肪酸酯(PHA)进行增韧改性,研究了SR用量对PHA/SR复合材料拉伸性能、冲击性能和结晶性能的影响。结果表明:PHA/SR复合材料的冲击强度和断裂伸长率均有所提高,PHA材料的韧性得到了明显改善;PHA/SR复合材料的拉伸强度有所下降,但下降幅度较小,不影响其实际应用。结晶性能测试结果表明:SR在PHA基体中能够起到成核剂的作用,提高了复合材料的熔融温度和相对结晶度。     

SPA方法快速检验食品志贺氏菌的研究

ＳＰＡ是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白质成分，具有同人和多种哺乳动物ＩｇＧ分子Ｆｃ段结合的能力。本方法用含Ａ蛋白丰富的金黄色葡萄球菌菌体与志贺氏菌属抗血清在一定条件下混合致敏，让抗体结合到金黄色葡萄球菌细胞壁Ａ蛋白上，制成ＳＰＡ诊断试剂。     

中草药祛痘复方对痤疮致病菌和外泌酶的影响

通过药敏试验和抑菌试验考察中草药祛痘复方对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,PA)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)和表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)的抑菌功效,同时考察其对3种菌的抑菌时间动力学的影响。采用脂肪酶和蛋白酶水解底物形成的透明圈,研究中草药祛痘复方对PA释放脂肪酶和蛋白酶的影响。结果表明,中草药祛痘复方明显抑制了PA、SA和SE,并呈时间和剂量依赖性关系;中草药祛痘复方抑制脂肪酶和蛋白酶的作用主要是通过抑制PA而发挥作用。     

评估CHROMagar~金黄色葡萄球菌显色培养基在化妆品检验中的应用效果

目的评估CHRO Magar Staph.aureus(CSA)金葡菌显色平板和血琼脂平板(BA)用于化妆品金黄色葡萄球菌的检测效果。方法使用47株球菌菌株在CSA和BA上作典型菌落生长测试和比较CSA和血浆凝固酶反应在鉴定金黄色葡萄球菌中的敏感性和特异性;应用CSA和BA分别检测58件不同类型的化妆品样品。结果CSA和BA对所有金黄色葡萄球菌的菌株均为单一的特征性菌落生长,也有少数凝固酶阴性葡萄球菌表现有假阳性菌落特征;CSA和血浆凝固酶鉴定金黄色葡萄球菌的敏感性和特异性均为100%;CSA和BA在样品中分别检测出7株和1株金黄色葡萄球菌(X2=4.83,P<0.025),总阳性率为12.07%。结论CSA在分离实际样品过程中的筛选效率和敏感性均高于BA,且节省了鉴定菌株所用的时间和费用,建议将CSA作为检测、鉴定化妆品中金黄色葡萄球菌的常规培养基应用。     

生物质石墨烯改性聚酰胺6母粒及纤维的制备和性能

介绍了一种生物质石墨烯改性聚酰胺6母粒(GE/PA6母粒)的制备方法,即采用生物质石墨烯粉体、助剂与PA6粉体混合,经过双螺杆挤出机熔融挤出、造粒、干燥,制备得到GE/PA6母粒。该母粒含水率为5×10~(-5),热稳定性得到提高,过滤压力值(FPV)稳定。通过扫描电镜观察生物质石墨烯均匀分散在PA6中,达到纺丝要求。使用该GE/PA6母粒制备的改性锦纶6具有优越的抗菌性,其对金黄色葡萄球菌的抑菌率达到90%,对大肠埃希菌的抑菌率达到85%,对白念珠菌的抑菌率达到82%;同时也具有优异的远红外功能,其远红外发射率为0.88,远红外辐照温升达到2.3℃。     

CNTs阵列增强石蜡/硅橡胶复合相变垫片的散热性能研究

电子技术的高速发展对散热技术提出了更高的要求,热界面材料作为散热技术的关键材料之一,面临着提高热导率以及减小传热热阻的挑战。将垂直碳纳米管阵列(VACNTs)和固-液相变材料石蜡(PA)与硅橡胶(SR)复合,研制了一种新型VACNTs/PA/SR复合相变垫片。研究表明,通过磁场校准方法可以使表面改性的镀镍多壁CNTs在SR中实现垂直定向排列,所得VACNTs/SR垫片较CNTs随机排列的垫片具有更高的热导率,并确定VACNTs/SR垫片中CNTs的适宜含量为6%(质量),对应垫片的热导率可达0.71 W/(m·K)。对于固定CNTs含量为6%(质量)但PA含量不同的一系列VACNTs/PA/SR相变垫片,PA的添加量不大于12.5%(质量)时,相变垫片克服了液态PA的泄漏问题;相变垫片在PA发生固-液相变后表现出硬度显著下降,热阻减少可达55.14%,并具备优异的热可靠性。将最佳VACNTs/SR垫片样品及最佳VACNTs/PA/SR相变垫片样品进行散热性能对比发现,与使用VACNTs/SR垫片的情况相比,使用VACNTs/PA/SR相变垫片时的模拟芯片不仅在温度上升阶段的升温速率更小,而且当芯片温度达到平衡后对应的平衡温度也更低,降低了3.5℃,显示出更好的散热性能。VACNTs/PA/SR相变垫片优良的特性和散热性能使其在电子设备散热领域具有良好的应用前景。     

CNTs阵列增强石蜡/硅橡胶复合相变垫片的散热性能研究

电子技术的高速发展对散热技术提出了更高的要求,热界面材料作为散热技术的关键材料之一,面临着提高热导率以及减小传热热阻的挑战。将垂直碳纳米管阵列(VACNTs)和固-液相变材料石蜡(PA)与硅橡胶(SR)复合,研制了一种新型VACNTs/PA/SR复合相变垫片。研究表明,通过磁场校准方法可以使表面改性的镀镍多壁CNTs在SR中实现垂直定向排列,所得VACNTs/SR垫片较CNTs随机排列的垫片具有更高的热导率,并确定VACNTs/SR垫片中CNTs的适宜含量为6%(质量),对应垫片的热导率可达0.71 W/(m·K)。对于固定CNTs含量为6%(质量)但PA含量不同的一系列VACNTs/PA/SR相变垫片,PA的添加量不大于12.5%(质量)时,相变垫片克服了液态PA的泄漏问题;相变垫片在PA发生固-液相变后表现出硬度显著下降,热阻减少可达55.14%,并具备优异的热可靠性。将最佳VACNTs/SR垫片样品及最佳VACNTs/PA/SR相变垫片样品进行散热性能对比发现,与使用VACNTs/SR垫片的情况相比,使用VACNTs/PA/SR相变垫片时的模拟芯片不仅在温度上升阶段的升温速率更小,而且当芯片温度达到平衡后对应的平衡温度也更低,降低了3.5℃,显示出更好的散热性能。VACNTs/PA/SR相变垫片优良的特性和散热性能使其在电子设备散热领域具有良好的应用前景。     

P-HTPM对荚膜组织胞浆菌和不同分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验

目的通过荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)对荚膜组织胞浆菌(HC)和不同分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验,检测P-HTPM用于组织胞浆菌病(HP)和结核病鉴别诊断的特异性和敏感性。方法用结核分枝杆菌(MTB)和22种非结核分枝杆菌以及荚膜组织胞浆菌(HC)分别致敏豚鼠,经皮内注射结核杆菌纯蛋白衍生物(TB-PPD)、胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B)、P-HTPM或国外同类产品HDS,检测P-HTPM的特异性;将P-HTPM原液分别稀释成1、2、4、8μg/ml,与HDS同时以轮圈法注射于经HC致敏的豚鼠,检测P-HTPM的敏感性;用MTB、MTB+HC和不同浓度的HC分别致敏豚鼠,再分别经皮内注射TB-PPD和P-HTPM,检测交叉反应性。结果P-HTPM与HDS对HC致敏的豚鼠均呈阳性反应,而对结核及其他分枝杆菌致敏的豚鼠均呈阴性反应;不同浓度的P-HTPM均可诱导HC致敏豚鼠的皮肤反应,并随P-HTPM浓度升高,皮肤反应强度略有增强,1μg/ml的P-HTPM即与HDS诱导的皮肤反应等效;TB-PPD及P-HTPM对自身抗原致敏的豚鼠均可诱导较强的皮肤反应,且明显强于MTB+HC混合抗原致敏豚鼠诱导的皮肤反应;TB-PPD对HC致敏的豚鼠个别呈弱阳性,但随HC致敏浓度的升高,其阳性率下降。结论P-HTPM用于HP和结核病的鉴别诊断具有较好的特异性和敏感性。     

抗菌PP/PA6复合超细纤维的研制

以无机抗菌剂、聚丙烯(PP)和聚己内酰胺(PA6)为原料,采用复合纺丝技术制备抗菌PP/PA6复合纤维,对其生产工艺及纤维性能进行了研究。结果表明:抗菌剂的加入,对纺丝工艺没有明显的影响。选择PA6纺丝温度260～270℃,抗菌PP纺丝温度268～280℃,生产的抗菌PP/PA6复合纤维截面稳定清晰,经染整加工后可得到抗菌PP/PA6复合超细纤维。经检测,纤维织物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌、白色念株菌具有抑菌作用,其织物具有吸湿排汗快干功能。     

以霍乱毒素B亚单位为载体的甲型副伤寒多糖结合疫苗理化及生物学特性

目的制备甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A,SPA)O特异多糖(O-specific polysaccharide,OSP)-霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTB)结合疫苗,并初步探讨其理化及生物学特性。方法 SPA OSP多糖原液(简称OSP多糖)经溴化氰活化,己二酰肼(ADH)衍化,在碳二亚胺(EDAC)作用下与CTB偶联,结合物经Sepharose4FF柱纯化,获得多糖-蛋白结合物,对其理化指标、血清特异性、免疫原性及血清体外杀菌力进行检测。结果制备的SPA OSP-CTB结合物(简称OSP-CTB结合物)衍化度为(2. 63±0. 13)%、多糖回收率为(74±0. 2)%;鉴别试验显示OSP-CTB结合物与SPA O诊断血清、CTB抗体均有阳性沉淀线产生;免疫小鼠血清中OSP-CTB结合物抗体滴度显著增长,阳转率达100%,血清体外杀菌抗体滴度为1∶64。结论用溴化氰活化多糖制备的SPA OSP-CTB结合物具有良好免疫原性,可进一步进行疫苗研发。     

金黄色葡萄球菌中毒休克综合征毒素1基因的检测

目的检测编码金黄色葡萄球菌中毒休克综合征毒素l(TSST-1)的tst基因,了解该基因的携带情况。方法用PCR法对产毒素金黄色葡萄球菌染色体上编码TSST-1的tst基因进行体外扩增,并对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行tst基因检测及序列分析。结果对tst基因进行了检测及测序,84株受检的金黄色葡萄球菌中,tst基因阳性株占19.05%(16/84),测序结果与GenBank公布的金黄色葡萄球菌产TSST-1基因的同源性较高。结论用PCR法检测tst基因,具有良好的重复性、特异性和敏感性。tst基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。     

应用ELISA法检测静脉注射用人血免疫球蛋白抗补体活性

目的　建立检测静脉注射人血免疫球蛋白的抗补体活性的ELISA方法及其相应的标准品。方法用C1q包被酶标板 ,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA HRP)作为酶标记物 ,邻苯二胺为底物。结果　应用ELISA法检测静脉注射用人免疫球蛋白抗补体活性具有准确性高 (97 2 % ) ,精确性好 (试验内精密度为6 7% ,试验间精密度为 9 1% ) ,特异性强 ,灵敏性高 (测定限度为 0 2ACA单位 ,测量限度为 0 3ACA单位 )等特点。结论　ELISA法检测抗补体活性简便、快捷、准确     

静电纺丝紫苏醛/甲基-β-环糊精包合物纳米纤维的制备与表征

为提高紫苏醛(PA)的热稳定性和水溶性,扩展其应用,以甲基-β-环糊精(MβCD)为主体分子,PA为客体分子,通过静电纺丝技术制备了PA/MβCD包合物(PA/MβCD-IC)纳米纤维(PA/MβCD-IC-NF)。采用SEM、¹HNMR、XRD、TGA、FTIR和分子模拟对PA/MβCD-IC-NF进行了表征和分析,测试了其相溶解度,评价了其抗氧化活性和抑菌性能。结果表明,PA已被成功地包裹在MβCD空腔中,形成PA/MβCD包合物;PA/MβCD-IC-NF为非晶体结构,直径分布较均匀且表面光滑,平均直径为(134±60) nm。质量浓度为12 g/L的PA/MβCD-IC-NF(2 cm×2 cm)在1 s内可完全溶解。与PA相比,PA/MβCD-IC-NF中PA的热稳定性和水溶性都显著提高。PA/MβCD-IC-NF的抗氧化活性明显高于PA,对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑制率分别为96.2%±0.1%和94.0%±0.3%。     

酚类植物提取液抗菌PA6纤维的制备及性能研究

以酚类植物提取液为抗菌剂,聚己内酰胺(PA 6)为载体,制备抗菌母粒;采用抗菌母粒与PA 6切片共混纺丝,制备抗菌PA 6纤维,研究了其可纺性及抗菌性能。结果表明:该抗菌剂具有较好的抗菌效果,且对纺丝过程无明显影响;抗菌母粒中酚类植物提取液质量分数为10%,260℃时热失重率为4.2%,纺丝温度应小于260℃;共混纺丝时,抗菌母粒质量分数为3%,纺丝温度230~255℃,拉伸倍数5.3,纺丝顺利,无断头现象,所得抗菌PA 6纤维断裂强度为5.95 c N/dtex,断裂伸长率为35.3%,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌率均达99%以上;抗菌PA 6纤维经高温染色后,抗菌性能略有下降,高温热水条件下耐久性欠佳,宜采用原液着色。     

葡萄球菌蛋白A的纯化新工艺

目的建立一种高效、简便、实用的分离纯化葡萄球菌蛋白A(SPA)的工艺。方法采用超声波破菌和IgG-Sepharose4B亲和层析分离纯化SPA;以Lowry法检测蛋白含量;双向琼脂免疫扩散法测定效价和特异性;用还原和非还原SDS-PAGE法检测纯度和相对分子质量。结果此法制得的3批SPA的蛋白含量分别为4·7、4·4和5·4mg/ml,收率分别为2·70、2·64和3·78g/100g湿菌。对人IgG的免疫双扩散效价均为1:64;与正常人、豚鼠、家兔和小鼠的血清反应均出现一条沉淀线,而与鸡和羊不出现沉淀线。经非还原SDS-PAGE检测只呈现一条蛋白带,相对分子质量约为160000～180000;经还原SDS-PAGE检测呈现两条蛋白带,相对分子质量分别约为67000和34000。结论已成功建立了分离纯化SPA的新工艺。     

抗菌PA66/氧化镁晶须复合材料的制备及性能表征

通过共混的方法制备了PA66/MgO抗菌复合材料,并测试了复合材料的力学性能、流变性能和抗菌性能。结果表明:PA66/MgO复合材料的拉伸性能和弯曲性能随MgO用量的增加先增加后减小,但与纯PA66相比,均有不同程度的提高;复合材料的韧性随MgO用量的增加逐渐下降。MgO的加入增大了PA66的表观黏度,且随MgO用量的增加,复合材料的表观黏度先增加后减小;PA66/MgO复合材料的非牛顿指数随MgO用量的增加先减小后增加。PA66/MgO复合材料对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌率均高于90%,属于抗菌材料。因此,MgO的引入有效地改善了PA66的抗菌性能。     

PA 6/PBAT共混物熔融加工流动性能研究

以聚(己二酸丁二醇酯-对苯二甲酸丁二醇酯)(PBAT)为共混组分,对羟基苯甲酸(PHA)为添加剂,利用转矩流变仪对聚酰胺6(PA 6)进行熔融共混改性,并采用差示扫描量热仪、热重分析仪和旋转流变仪对共混物的热行为和熔融流动性能进行了测试。结果表明:共混后PBAT组分产生了结晶行为,未添加改性剂PHA的PA 6/PBAT共混物热稳定性明显偏向于PA 6,而其流动性能则随共混比例变化相应靠近含量相对较多的组分;添加质量分数为2%的PHA可提高共混物的热稳定性,且热性能和流变性能相对较为稳定;合适的共混工艺为共混温度220℃,转矩流变仪转子转速50 r/min。     

金黄色葡萄球菌表面蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

目的在原核细胞中表达金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(fibronectin-binding protein A,FnBPA),制备其多克隆抗体。方法筛选FnBPA抗原表位富集区,优化基因序列,分别克隆至质粒pGEX4T-2和pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pGEX4T-2-fnbpa和pET-28a-fnbpa,分别转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,分别用High Affinity GST-NTA resin和High Affinity Ni-NTA resin进行纯化。以纯化后的FnBPA-His融合蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,以FnBPA-GST融合蛋白为检测抗原,采用间接ELISA法检测血清效价,Western blot法检测特异性。结果经双酶切及测序鉴定,证明质粒pGEX4T-2-fnbpa和pET-28a-fnbpa构建正确;在相对分子质量约42 000和19 000处,分别可见FnBPA-GST和FnBPA-His融合蛋白的表达,表达量分别约占菌体总蛋白的30%和20%,均以可溶性形式表达,纯度均在90%以上;免疫新西兰大白兔后获得高效价的特异性兔抗血清。结论2种标签的融合蛋白均具有较好的免疫原性和抗原性,所制备的多克隆抗体具有较好的特异性,为金黄色葡萄球菌检测方法的建立奠定了基础。     

奇异变形杆菌-金黄葡萄球菌-铜绿假单胞菌吸附联合疫苗的制备及其对小鼠的保护效果

目的制备奇异变形杆菌-金黄葡萄球菌-铜绿假单胞菌(Proteus mirabilis-Staphylococcus aureus-Pseudomonas aeruginosa,PSP)吸附联合疫苗,并检测其对小鼠的保护效果。方法通过不同生产工艺制备奇异变形杆菌胞膜抗原(Proteus mirabilis membrane antigen,PMA)、金黄葡萄球菌胞质抗原(Staphylococcus aureus cytoplasmic antigen,SCA)金黄葡萄球菌类毒素抗原(Staphylococcus aureus toxoid antigen,SEA)及铜绿假单胞菌类毒素抗原(Pseudomonas aeruginosa toxoid antigen,PEA),按照一定配伍方式与Al(OH)_3佐剂形成PSP吸附联合疫苗,经腹腔注射小鼠,测定其保护效果。结果 6价PMA抗原对奇异变形杆菌6株疫苗株保护率为50%~100%;PSP吸附联合疫苗对奇异变形杆菌PM104的保护率为80%,对铜绿假单胞菌PA101的保护率为100%,对2株金黄葡萄球菌SA79和CMCC26002的保护率分别为90%和60%,对金黄葡萄球菌CMCC26002 α-毒素的保护率为70%。PSP吸附联合疫苗对同群异源菌株交叉保护率达70%以上的比例为:奇异变形杆菌占61.11%;金黄色葡萄球菌占50%;铜绿假单胞菌保护率占92.86%。结论 PSP吸附联合疫苗对疫苗株具有保护性,也对同群菌株具有保护性,为进一步临床研究提供了理论基础和技术支持。