水产品中创伤弧菌的分离、鉴定及毒性研究

通过溶血试验和小鼠急性毒性实验,评价市售水产品中创伤弧菌和标准创伤弧菌ATCC27562菌株毒性大小。从市售水产品中分离获得的6株疑似创伤弧菌菌株,经生化鉴定和溶细胞素基因扩增、基因测序后证实,除2号分离菌株基因测序未测出外,其它5株确定为创伤弧菌。创伤弧菌标准菌株ATCC27562菌株扩增出400 bp左右的基因条带,而6株分离株扩增出222 bp左右的典型创伤弧菌溶细胞素基因条带。在溶血试验中,创伤弧菌ATCC27562菌株的溶血圈与菌落直径之比达到3.0,1~6号分离株分别为2.3,2.0,2.8,2.0,2.5和2.1。在小鼠急性毒性实验中,创伤弧菌ATCC27562菌株的半致死量(LD_(50))是3.776×10~7CFU/m L,而3号分离株的LD_(50)为2.218×10~8CFU/m L。创伤弧菌ATCC27562菌株为较强毒株,而3号分离株为弱毒株。     

壳聚糖基创伤修复材料的研究进展

壳聚糖良好的生物活性、生物相容性与可降解性,以及抗菌、止血和促进伤口愈合等作用在医药领域被广泛开发利用。本文总结壳聚糖在创伤修复过程中的主要作用及壳聚糖基创伤修复材料的研究进展,为开发新型壳聚糖基创伤修复材料提供理论依据。     

水产品中创伤弧菌的检测

分析水产品中创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的作用机理及检测方法,并在此基础上,以3%氯化钠碱性蛋白胨水(APW)和改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)琼脂为培养基,进行创伤弧菌等致病性弧菌的选择性培养和分离,通过建立水产品中创伤弧菌的分析方法,从而监控水产品及食物中毒样品中创伤弧菌,促进水产品质量和安全性的提升。     

水产品中创伤弧菌检测方法建立与应用

目的建立一种水产品中创伤弧菌检测方法 ,并对北京市市售水产品中创伤弧菌污染情况进行监测。方法分别使用18株创伤弧菌菌株和水产品中常污染的背景杂菌,定量接种于检测创伤弧菌的选择性增菌液和4种选择性平板,优化出适合创伤弧菌检测的选择性培养基。采用聚合酶链式反应(PCR)法和增菌培养法分别检测样品中的创伤弧菌后进行方法对比,建立PCR和增菌培养法相结合的检测方法 ,并应用此方法研究北京市市售水产品中创伤弧菌污染状况。结果改良后的选择性增菌液适用于创伤弧菌的检测。北京市市售水产品中创伤弧菌检出率为15.7%(18/115),其中贝类、蟹类、鱼类和虾类样品的检出率分别为23.4%(15/64)、8.3%(1/12)、5.3%(1/19)和5.0%(1/20)。结论 PCR法与传统增菌培养法相结合,可有效提高创伤弧菌检测效率。北京市市售贝类等水产品中创伤弧菌污染率较高,需引起食品安全风险监测重点关注。     

低温贮藏条件下创伤弧菌和副溶血性弧菌失活模型的建立

为掌握对虾中创伤弧菌和副溶血性弧菌在5℃和一18~C低温贮藏条件下失活动力学特征,分别采用线性模型、Weibull模型、Logistic模型对创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活曲线进行拟合。研究结果表明,在5~C条件下,创伤弧茵VvHB09的耐冷力较强;．18℃条件下,副溶血性弧菌ATCC17802和创伤弧菌VvSH09的耐冷力较强。线性模型比weibull模型、Logistic模型更适合拟合创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活特征。     

东南沿海地区零售海产品中创伤弧菌的监测

目的了解我国东南沿海地区零售海产品中创伤弧菌的污染状况。方法采用3%氯化钠碱性蛋白胨水增菌,改良纤维二糖-多粘菌素B-多粘菌素E(mCPC)琼脂和纤维二糖-多粘菌素E(CC)琼脂分离海产品试样中的创伤弧菌,可疑菌落的鉴定采用生化试验或PCR法。采用最可能数(MPN)法和PCR法检测牡蛎试样的创伤弧菌污染水平。结果天然污染海产品试样创伤弧菌的检出率为19.8%(20/101)。牡蛎试样中45%(55/122)创伤弧菌密度低于3MPN/g的最低检出限。牡蛎中创伤弧菌的污染水平存在季节性差异。结论未来应加强对我国海产品中创伤弧菌污染状况的监测,尤其是在温暖的季节。     

创伤弧菌控制措施与风险评估的研究进展

创伤弧菌为革兰氏阴性嗜盐菌,天然存在于世界各地温暖的河口与海洋环境中,是一种重要的食源性致病菌,人类感染往往与食用受污染的海产品有关。食源性创伤弧菌感染最常见的临床症状是原发性败血症,病死率超过50%。文中介绍了创伤弧菌生物学特性、控制措施及风险评估的研究进展。     

广州地区海产品中创伤弧菌病原学特征分型

目的研究广州地区海产品中分离的创伤弧菌的毒力相关基因与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型状况,初步建立区域PFGE溯源数据库,为该菌的分子流行病学研究和食源性疾病溯源提供支持。方法对68株创伤弧菌进行毒力相关基因鉴定和PFGE分型,采用Bio Numerics软件分析聚类关系。结果海产品中分离的创伤弧菌均为溶血素A基因(vvh A)核酸阳性,vcg C/E和16S rRNA A/B分型结果显示,共有5种基因型别,分别有CB型、EA型、CAB型、CA型和EB型。共检测出42株为BT1型。PFGE分型结果显示68株创伤弧菌有52种PFGE型别。结论广州地区海产品中分离的创伤弧菌PFGE型别多,且相互之间关系分散;毒力相关基因型以CB型为主。     

环介导等温扩增技术检测创伤弧菌方法的建立与应用

根据创伤弧菌vvhA基因设计4条特异性引物,采用环介导等温扩增方法(LAMP)建立创伤弧菌快速检测方法。结果表明,建立的LAMP方法具有高度特异性,经对13株细菌进行扩增,创伤弧菌为LAMP阳性,其他菌株均为LAMP阴性。该方法对培养的创伤弧菌的检测下限为51CFU/mL,可在60min内完成扩增反应。用建立的LAMP方法对120份海产品进行检测,共检出37份LAMP阳性样本,与传统培养方法结果一致。该方法与传统方法相比,可节省大量时间,且对实验仪器和操作人员的要求低,具有良好的实用性。     

生食动物性水产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌污染状况分析

目的 了解生食动物性水产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌污染状况。方法 采用随机抽样方法,在我国13个地区的餐饮店、零售店和批发市场采集生食动物性水产品,共计2 980份,对样品进行副溶血性弧菌和创伤弧菌检测。结果 生食动物性水产品中副溶血性弧菌检出率为14.7%(437/2 980),污染水平＞100 MPN/g的样品比例为2.9%(83/2 909);创伤弧菌检出率为3.5%(104/2 980)。采样于批发市场的样品中副溶血性弧菌检出率、污染水平＞100 MPN/g的样品比例和创伤弧菌检出率均高于餐饮店和零售店。第三季度副溶血性弧菌检出率、污染水平＞100 MPN/g的样品比例和创伤弧菌检出率最高。造成污染的主要原因包括原产地污染,储存不当及加工过程交叉污染。结论 生食动物性水产品中存在副溶血性弧菌和创伤弧菌的污染,其健康风险应引起关注,本次污染状况分析可为标准制修订提供理论依据。     

不同碳源对阿魏菇菌丝生长量及多糖产量的影响

阿魏菇是一种极具发展前景的食药两用大型真菌,实验用液体摇床培养法与平板培养法培养阿魏菇,对其在不同碳源培养基中的胞外多糖产量及菌丝生长情况进行了研究。结果表明,蔗糖为阿魏菇生长利用的最佳碳源,液体培养基中菌球长势好,胞外多糖产量高,平板培养菌丝生长速度快。葡萄糖作碳源培养前期胞外多糖量增加快,但胞外多糖产量和菌丝量不如蔗糖作碳源时高。以麦芽糖作碳源液体培养菌球生长不完整。阿魏菇对乳糖利用情况最差,胞外多糖产量及菌丝量均为最低。     

氮源对小球藻光合作用和色素积累的影响

本文研究了自养培养条件下尿素、NH4NO3、(NH4)2SO4和NaNO3四种氮源对小球藻(Chlorella sp.TCCC45058)生长、光合作用以及叶绿素a产率的影响。实验结果显示,NaNO3是Chlorella sp.TCCC45058生长的最佳氮源,以NaNO3为氮源时得到最高细胞密度4.1×107个/mL;而尿素对藻细胞色素积累最有利,最高叶绿素a产率达到21 mg/g。培养过程中,不同氮源会对培养液pH造成不同影响,以NaNO3为氮源时,随着NO3-的消耗培养液pH会出现显著的上升;以(NH4)2SO4为氮源时pH呈下降趋势;而尿素和NH4NO3则不会对其产生明显影响。将pH维持在中性不会对各组氮源培养效果产生显著影响,因此实际生产中无需对培养基pH做全程控制。     

Actinobacillus succinogenes NJ113利用豆饼粉为氮源发酵制备丁二酸

考察了不同廉价氮源对A.succinogenes NJ113发酵产酸的影响,结果显示豆饼粉效果较佳。考察A.succi-nogenes NJ113以豆饼粉为氮源发酵制备丁二酸对菌体生长和产酸的影响。结果表明,A.succinogenes NJ113能够利用豆饼粉作氮源发酵制备丁二酸。单独以豆饼粉为氮源时菌体最多能消耗50 g/L初糖。在3 L发酵罐上进行分别以15.53 g/L豆饼粉和10 g/L酵母粉为氮源对A.succinogenes NJ113进行发酵,其中以豆饼粉为氮源时丁二酸产量为35.20 g/L,收率为70.40%,与酵母粉发酵效果相当,副产物甲酸、乙酸浓度分别由9.49 g/L和6.27 g/L降至4.44 g/L和1.14 g/L,乳酸浓度由0.44 g/L增加至2.91 g/L,发酵时间由20 h延长至48 h。以葡萄糖为碳源时,豆饼粉最多能替代6 g/L酵母粉进行发酵,并且最多能消耗100 g/L初糖,丁二酸产量达71.30 g/L。     

Physiological role of the D-amino acid oxidase gene, DAO1, in carbon and nitrogen metabolism in the methylotrophic yeast Candida boidinii

A methylotrophic yeast, Candida boidinii, exhibits D-amino acid oxidase activity (DAO, EC 1.4.3.3) during its growth on D-alanine as a sole carbon or a nitrogen source. The structural gene (DAO1), encoding DAO, was cloned from a genomic library of C. boidinii. The 1035-bp gene encoded 345 amino acids and the predicted amino acid sequence showed significant similarity to those of DAOs from other organisms. The DAO1 gene was disrupted in the C. boidinii genome by one-step gene disruption. The DAO1-deleted strain did not grow on D-alanine as a carbon source but did grow on D-alanine as a sole nitrogen source (with glucose as the carbon source). These results suggested that, while DAO is critically involved in growth on D-alanine as a carbon source, there should be another enzyme system which metabolizes D-alanine as a nitrogen source in C. boidinii. We also showed that the three C-terminal amino acid sequence of DAO, -AKL was necessary and sufficient for the import of DAO into peroxisomes.     

茯苓液体发酵条件研究及保健饮料研制

对茯苓液体发酵的碳源、氮源,pH值及发酵时间等进行研究,结果表明,最佳碳源是葡萄糖与蔗糖,氮源为麸皮,碳源浓度为8%,pH为5.0,发酵时间为5d.将发酵后的菌丝发酵液经过处理生产茯苓保健饮料.通过正交实验,确定了茯苓保健饮料的最佳配方为：茯苓发酵原液为6.7%,白糖7%,柠檬酸0.02%.并对成品进行了卫生微生物指标检测.     

蜂胶化学成分与地理源、植物源的研究进展

本文对于蜂胶的来源、类型、化学组成以及与植物源相关性进行的研究,通过查阅国内外研究文献,对蜂胶的地理来源、化学成分和胶源植物进行总结,发现蜂胶的化学成分取决于蜜蜂采集的树脂的地区和植物,由于不同地区的树脂化学成分存在差异,所以不同胶源植物的蜂胶化学成分也存在差异。同时发现虽然蜂胶来源广泛,化学组成复杂,但是与其植物源的特征性成分具有明显相关性,所以可根据胶源植物对蜂胶进行分类。通过对蜂胶进行分类,可以更有针对性地对不同类型的蜂胶化学成分进行研究,为蜂胶质量的标准化提供基础与依据,同时可以带动胶源植物化学成分的研究,进而极大地促进蜂胶及胶源植物的开发与利用。     

一株产酯化酶细菌的筛选

从汾酒大曲（后火曲、红心曲、清茬曲）中筛选出1株产酯化酶较高的菌株,从菌落外形及显微镜观察初步确认是葡萄球菌。该菌株在液体发酵培养基中,以37℃恒温摇床培养48 h,发酵液酶活力可达25.00 U/mL;对该菌株的发酵培养基进行碳源和氮源优化。结果表明,以豆饼粉作氮源,玉米粉为碳源,于37℃、180 r/min下摇床培养48 h,酶活力可达到33.33 U/mL。     

氮源对2株海洋微藻生长及脂肪酸合成的影响

以三角褐指藻、扁藻为材料,研究了NaNO3、尿素和NH4Cl等不同氮源对其生长、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白、干重、总脂及脂肪酸含量的影响。结果表明:以尿素为氮源时,三角褐指藻的生物量、生长速率、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白的含量最高,NaNO3和NH4Cl次之;以NH4Cl为氮源时,细胞内的总脂含量最高,占干重的47.5℅。与三角褐指藻不同,以NH4Cl为氮源时,扁藻的生物量、生长速率、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白的含量最高,尿素和NaNO3次之;当以NaNO3为氮源时,细胞内的总脂含量最高,占干重的38.5℅。     

链霉菌9-1-1产几丁质酶的发酵条件研究

从烟草根际土样中分离、筛选得到1株几丁质酶活性比较高的链霉菌9-1-1,为评价该菌株利用价值,对其发酵条件(碳源、氮源、初始pH、表面活性剂及发酵时间)进行了研究.结果表明:该菌株的最佳发酵条件以1%胶体几丁质为碳源,发酵液初始pH值为6.5,以1%蛋白胨为氮源,0.1%吐温80作为表面活性剂,发酵时间为96 h,接种量为1%,最高酶活达到56 U/mL.     

A preliminary study of caffeine degradation by Pseudomonas sp. GSC 1182

Several microorganisms isolated from soil were tested for their ability to utilize caffeine as the sole carbon and nitrogen source. The isolate identified as Pseudomonas sp. GSC 1182 showed 80% degradation of caffeine in 48 h when caffeine was used as the sole carbon and nitrogen source. In the presence of sucrose (5 g/l), 100% degradation of caffeine was achieved within 36-40 h. The degradation rate was also found to increase when fructose, lactose and galactose were used as carbon source. The isolate showed decreased level (<10%) of caffeine degradation in the presence of glucose. At an initial pH of 6.0, the complete degradation of caffeine was attained in 24 h. The addition of urea and ammonium sulfate as external nitrogen source decreased the caffeine degradation to 35% and 70% respectively.