华贵栉孔扇贝软体部营养成分分析及评价

对华贵栉孔扇贝软体部营养成分进行了分析测定及营养评价。结果表明,华贵栉孔扇贝软体部(鲜样)中,粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、水分含量分别为14.30%,1.50%,2.30%和78.00%。华贵栉孔扇贝软体部(鲜样)含18种水解氨基酸,氨基酸总量为11.34%,其中必需氨基酸总量为3.96%,占氨基酸总量的34.92%;鲜味氨基酸总量为4.94%,占氨基酸总量的43.56%。华贵栉孔扇贝软体部的限制性氨基酸为缬氨酸、苏氨酸和色氨酸,必需氨基酸指数(EAAI)为77.28。多不饱和脂肪酸(PUFA)占脂肪酸总量的33.52%,其中EPA,DHA含量占脂肪酸总量的21.38%。矿物质含量丰富,尤其铁(Fe)含量较高;维生素E含量也较丰富。表明华贵栉孔扇贝是一种营养价值较高的贝类,具有较好的开发前景。     

麻痹性贝类毒素监测指示贝种的筛选研究

为了解深圳地区贝类麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poison,PSP)染毒情况,对深圳地区主要贝类养殖海域养殖的10种贝类麻痹性贝类毒素染毒情况进行调查。筛选并确定PSP监测指示贝种,进而测定不同养殖海区PSP污染情况。采用AOAC发布的生物法测定麻痹性贝类毒素含量。华贵栉孔扇贝(Chalmys nobilis)和翡翠贻贝(Perna viridis)对PSP蓄积能力强,华贵栉孔扇贝的PSP含量较翡翠贻贝高。确定深圳贝类养殖海域PSP监测指示贝种为华贵栉孔扇贝和翡翠贻贝,全年对两种贝类的PSP监测结果表明PSP含量超过有关标准规定的安全限量的情况时有发生。本研究为实施有效的监测预警管理制度提供了科学依据。     

华贵栉孔扇贝干贝呈味特性评价

我国南方海域华贵栉孔扇贝产量大,价格低,其闭壳肌蛋白含量高,滋味鲜美。以华贵栉孔扇贝闭壳肌为研究对象,对研制的干贝基本成分、游离氨基酸、呈味核苷酸和甜菜碱进行检测分析与评价,并与市售干贝进行呈味特性比较。结果表明:利用华贵栉孔扇贝研制的干贝蛋白含量高达69.28%,脂肪含量约为2.36%,是一种高蛋白低脂肪的产品。干贝中共检测出17种游离氨基酸,总量为1 037.4 mg/100g,其中谷氨酸、甘氨酸和精氨酸的味道强度值分别为1.567、4.538和6.400,表明这3种氨基酸对产品滋味有显著地贡献作用;自制干贝中甜菜碱含量为14.23 mg/g,略高于市售干贝(12.71 mg/g),并且呈味核苷酸总量也高于市售干贝,自制干贝中5'-一磷酸腺苷含量最高,为96.74 mg/100g,TAV值为1.93;呈味氨基酸和呈味核苷酸的味精当量为1.04 g MSG/100 g。华贵栉孔扇贝闭壳肌能生产出鲜嫩味美的高品质干贝产品。     

华贵栉孔扇贝肉的酶解工艺优化及其产物风味的美拉德改良研究

华贵栉孔扇贝具有生长快、产量高、周期短、效益高、蛋白质含量高的特点,但目前对其的加工利用甚少。文章利用蛋白酶对扇贝进行生物酶解,优化酶解工艺参数,并对酶解产物进行美拉德风味改良,以期为扇贝海鲜调味品的开发提供基础数据。从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶这5种常用蛋白酶中选出华贵栉孔扇贝肉的最佳酶解蛋白酶——风味蛋白酶;通过单因素试验、响应面设计试验优化其酶解工艺参数为:pH6.6、温度50.6℃、加酶量3260 U/g原料、酶解时间为3 h;对优化酶解工艺参数条件下的产物进一步进行美拉德风味改良,对其工艺参数进行正交优化:葡萄糖浓度2%、反应时间50 min、pH7.0,在此工艺条件下得到的改良产物味道鲜甜、香味怡人、无苦腥味、颜色为亮黄色,可进一步进行海贝精类调味品的开发。     

冻藏时间对扇贝闭壳肌及裙边理化性质的影响

目的研究冻藏时间对华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)闭壳肌及裙边理化性质的影响。方法通过测定在-18℃冻藏不同时间扇贝的基本成分、氨基酸组成、蛋白质组分、挥发性盐基氮含量及过氧化值,了解其理化性质随时间变化的规律。结果冻藏60 d的闭壳肌和裙边基本成分、水溶性蛋白、盐溶性蛋白含量和氨基酸含量变化不显著,挥发性盐基氮含量略有上升,然而过氧化值变化显著,比原来增长了81%。结论华贵栉孔扇贝在-18℃冻藏60 d,除过氧化值外,其余理化性质变化不明显。     

华贵栉孔扇贝富硒蛋白粉的酶法制备工艺优化及其营养评价

通过酶解法利用华贵栉孔扇贝制备富硒蛋白粉,并对其进行营养评价。以水解度和硒溶出率为指标,筛选蛋白酶后,应用响应面优化得到最佳酶解工艺,制备富硒蛋白粉,从分子质量分布、肽质谱、氨基酸组成及矿物质组成对其进行营养评价。以中性蛋白酶进行工艺优化,最佳酶解工艺为：酶解温度53℃、料液比1∶3.8、加酶量4 885 U/g;肽质谱结果显示0～1 200 m/z的肽种类随酶解时间延长而显著增多,酶解6 h,水解度达46.95%,硒溶出率达97.02%,分子质量低于3 kDa组分占酶解产物的67%。所制备的富硒蛋白粉蛋白质含量达82.58%,必需氨基酸含量占总氨基酸量的37.57%,必需氨基酸指数为122.01%,第一限制氨基酸为缬氨酸,硒含量为1.80μg/g远高于食品富硒标准(0.15μg/g),必需微量元素Mn、Cu、Zn等含量较高。华贵栉孔扇贝富硒蛋白粉富含易于人体吸收的小分子肽,矿物质含量丰富,特别是硒含量高,可用于富硒食品或保健品的开发。     

应用PCR-RFLP技术鉴别区分中国沿海四种主要养殖扇贝

扇贝的物种鉴定,通常主要是依据形态学标准来进行。然而,当用于形态辨别的部分被去除时,对扇贝的物种鉴定工作则显得十分困难。本研究利用对扇贝核糖体ITS的PCR-RFLP分析,首次从分子水平上鉴定区分了中国沿海四种主要的养殖扇贝(栉孔扇贝、华贵栉孔扇贝、虾夷扇贝及海湾扇贝)。根据四种扇贝ITS的测序结果,选取三种内切酶(SmaI、MseI及TaqI)应用于PCR-RFLP分析。根据三种内切酶产生的酶切图谱,四种扇贝可被有效鉴别区分。酶切结果在四种扇贝各群体间的稳定性,证明了利用该技术对四种扇贝进行物种鉴定的可行性。本研究同时成功地对扇贝加工品-干贝进行了物种鉴定,证明了该技术在实践中应用的可行性。     

响应面法优化翡翠贻贝糖胺聚糖提取工艺的研究

以湛江地区产量丰富的翡翠贻贝全脏器为原料,通过胰酶和枯草杆菌中性蛋白酶双酶水解、醇沉后得到翡翠贻贝糖胺聚糖粗品。使用二次回归正交旋转组合设计研究液料比、加酶量、酶解时间3个因素对糖胺聚糖粗品得率与糖胺聚糖含量乘积的影响,从而确定翡翠贻贝糖胺聚糖提取的最佳工艺条件。经响应面分析,回归模型具有较高的拟合度。结果显示,最佳提取工艺条件为液料比2.30:1,加酶量0.94%,酶解时间3.46h,在此条件下,重复实验结果与响应面法优化提取翡翠贻贝糖胺聚糖的模型预测值25.50(×10-4)之间的标准误差为1.10%,低于5%。     

基于非靶向代谢组学技术的氨基脲胁迫雌性栉孔扇贝的毒性作用机制研究

目的 本研究基于非靶向代谢组学技术,分析了暴露于50 mg.L^-1氨基脲72 h的雌性栉孔扇贝性腺代谢物组成及含量变化,以探究氨基脲对雌性栉孔扇贝性腺组织毒性及其作用机制。结果 非靶向代谢组学结果表明：与对照组相比,在氨基脲胁迫下,雌性栉孔扇贝性腺组织代谢物发生改变,共有64种差异表达代谢物,其中上调33个,下调31个;在HMDB数据库中进行比对分析,注释到36个差异表达代谢物,主要功能分类为有机酸及其衍生物、脂类和类脂分子及有机氮化合物等。差异代谢物功能通路的富集结果表明：氨基酸代谢、脂质代谢、信号转导、核苷酸代谢和内分泌系统等生物过程受到显著影响。根据筛选出的差异代谢物的生理功能及其涉及的代谢通路分析,差异代谢物鸟氨酸上调,推断雌性栉孔扇贝通过增加鸟氨酸含量,维持其正常生长过程。推测氨基脲可能通过影响栉孔扇贝的AMPKα-2 mRNA表达,进而影响了核苷酸代谢通路和类脂肪代谢作用通路,使得栉孔扇贝体内软脂酸含量下降。氨基脲可能通过对NMDAR的拮抗作用以及对GAD(谷氨酸脱羧酶)的抑制,干扰神经信号传导,导致雌性栉孔扇贝相关行为异常。结论 本研究探究了氨基脲对雌性栉孔扇贝性腺组织毒性作用及栉孔扇贝的响应调控机制,为后期深入研究氨基脲毒性作用机制提供理论依据。     

栉孔扇贝多糖的提取及脱色

文中对提取栉孔扇贝多糖的工艺及对2种栉孔扇贝多糖的脱色进行了研究。利用正交实验,根据栉孔扇贝多糖的的得率,优化微波方法对栉孔扇贝多糖的提取工艺。通过对比活性炭与过氧化氢法对栉孔扇贝多糖脱色效果,确定了栉孔扇贝多糖脱色的最佳条件。结果显示:传统工艺提取最佳条件:为90℃提取3 h,固液比1∶40(g∶m L),栉孔扇贝多糖的得率为8.44%;微波提取栉孔扇贝多糖的最佳工艺条件为550 W微波功率,提取8min,固液比为1∶40(g∶m L),栉孔扇贝多糖得率为9.57%。活性炭最佳条件时的脱色率为85.8%,多糖保留率为82.7%。过氧化氢脱色法最佳时间的脱色率为82.4%,多糖保留率为67.9%。     

波纹巴非蛤氨基多糖的分离纯化及其理化性质的初步研究

以波纹巴非蛤全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白、醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(波纹巴非蛤CPG),CPG再经吸附、透析、CTAB络合等方法进行纯化,得到波纹巴非蛤氨基多糖较纯级分(波纹巴非蛤GAG-2)。成分分析表明:波纹巴非蛤GAG-2含有氨基己糖、己糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal)。波纹巴非蛤GAG-2经琼脂糖凝胶电泳可再分为F-1、F-2两个级分;红外光谱与CS-6相似;体外抗肿瘤试验表明:0·5mg/mL波纹巴非蛤CPG对HL-60细胞的抑制率可达32·3%,与抗癌药物5-Fu合用时可使抑瘤率提高到56·7%,具显著增敏作用。     

尖紫蛤糖胺聚糖抑制肿瘤细胞生长作用的研究

采用四氮唑蓝还原法(MTT法)研究了尖紫蛤糖胺聚糖对人宫颈癌细胞(Hela细胞)、人鼻咽癌细胞(CNE-2Z细胞)、慢性髓性白血病细胞(K562细胞)的体外抗肿瘤活性。结果显示:尖紫蛤糖胺聚糖对三种肿瘤细胞具有较强的抑制能力,并存在一定的量效关系;尖紫蛤糖胺聚糖与阳性药物(5-Fu)合用呈单纯相加作用或增强、协同作用。     

菲律宾蛤仔氨基多糖的分离提取及其抗肿瘤活性的初步研究

以湛江地区盛产的菲律宾蛤仔全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白后醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(CRG),再将所得的CRG经一次纯化(吸附、透析)、二次纯化(CTAB络合)、醇沉等方法进行纯化,得到菲律宾蛤仔纯化产物(PRG)。PRG含有氨基已糖、乙糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal),琼脂糖凝胶电 泳可分为F—1、F—2两个级分。红外光谱与CS—6相似。体外抗肿瘤实验表明,1.0mg/mL菲律宾蛤仔CRG具有显著的抗肿瘤活性,24h内对HL—60细胞的抑制率达59.8％。     

灵芝生物转化蛋白核小球藻发酵粗多糖的抑瘤实验

在灵芝基础培养基中添加小球藻粉,灵芝能对小球藻细胞进行生物破壁,同时进行牛物转化：藻粉添加量以10g／L为最佳,产生的多糖最高达0．29mg／L。提取转化的多糖,并与灵芝多糖、小球藻提取多糖的混合物进行抗肿瘤实验：结果表明,产生的转化多糖抗肿瘤效果最好,仡最适剂量（0．2g／kg·d）时,抑瘤率为76．2％。     

尖紫蛤全脏器糖蛋白的提取及其对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长的影响

探讨用盐提法对尖紫蛤全脏器进行提取,并对提取物糖蛋白的抗肿瘤活性进行初步分析.结果表明:以0.5 mol/L NaCl为浸提液,料液比1:25,75℃水浴浸提85 min,60℃旋转蒸发浓缩,总糖含量,蛋白含量和得率分别为15.27％,4.42％和5.03％,醇沉乙醇终浓度达到60％提取效果最佳；采用四氮唑蓝还原法(M...     

白灵侧耳发酵全液多糖提取及抗肿瘤活性研究

液体发酵白灵侧耳，从发酵全液中提粗多糖，研究其体内抗肿瘤活性。用0.2、0.4、0.8g/kg三个剂量组对荷S180小鼠进行灌胃。结果发现，白灵侧耳发酵全液粗多糖得率为0.97g/100ml，多糖含量为32.9%；低中高三个剂量组对肿瘤的抑制率分别为46.15%、55.42%和58.67%，同时能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。白灵侧耳发酵全液多糖具有抗肿瘤活性。     

联合使用羧甲基壳聚糖与阿霉素抗肿瘤效应

为了研究羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl-chitosan,CM-CTS)与阿霉素(Adriamycin,ADM)的联合抗肿瘤作用。通过细胞平板克隆实验、细胞划痕实验来评价羧甲基壳聚糖和阿霉素对Hela细胞增殖和迁移能力的影响,B16实体瘤模型用于评价体内抗肿瘤活性。结果表明,CM-CTS与ADM联合使用对Hela细胞克隆形成的抑制率为72.65%,极显著高于单独使用CM-CTS(31.47%)或ADM(44.09%)(p<0.01)。CM-CTS与ADM联合使用对Hela细胞迁移的抑制率为84.48%,极显著高于CM-CTS(37.47%)或ADM(56.29%)(p<0.01)单独用药时的抑制作用。体内动物实验结果显示,CM-CTS和ADM单独使用时,在活的有机体内对肿瘤细胞的生长抑制率分别为27.68%、16.96%,当两种药物联合使用时,对肿瘤生长的抑制率为47.32%,具有协同效应。结果说明,联合用药可以显著抑制宫颈癌细胞Hela的增殖和迁移。     

樟芝菌丝体的不同提取方法及其抗肿瘤活性的研究

采用不同的方法对樟芝菌丝体进行提取,使用高效液相(HPLC)对提取物进行了分析,选定乙醇为提取溶剂;并用不同浓度的乙醇在不同时间下提取樟芝菌丝体,确定95%乙醇超声波提取的三萜产量最高,在1g菌丝体中可以获得25.24mg的三萜;并对其进行体外抗肿瘤活性试验,结果表明,80%乙醇浸提18h,在50μg/mL时,体外对小鼠淋巴白血病细胞L1210和人肠癌细胞SW620都有很强的抑制作用。     

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性分析

采用水提醇沉法制备桑黄菌丝体粗多糖，分别用终浓度为30%、45%和60%的硫酸铵溶液对桑黄菌丝体中粗多糖进行粗分离，并比较所得各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。对其中活性强的组分采用离子交换树脂柱色谱纯化，采用高效排阻色谱-折光示差检测器-多角度光散射仪对纯化多糖进行均一性分析和分子量测定。结果显示，45%硫酸铵分离多糖IPS45显示最强的抗肿瘤活性及较好的清除超氧阴离子活性，IPS45经DEAE-52纤维素离子交换柱纯化得到四个级分，经高效排阻色谱分析，其中蒸馏水洗脱级分（IPS45-W）为均一多糖，重均分子量为79.1 kDa；气相色谱分析其单糖组成为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:未知单糖，摩尔比为1.57:8.38:1.09:1.00。IPS45-W可抑制HepG2细胞生长，当浓度为50μg/mL时，对HepG2细胞的抑制率为56.74%，高于前期研究的乙醇沉淀分离所得桑黄菌丝体均一多糖同浓度下11%～35%的抑制率。该结果为不同组成的桑黄多糖的分离和应用提供依据。     

脆江蓠多糖体内抗肿瘤活性及其作用机制

目的：研究脆江蓠多糖（Gracilaria chouae polysaccharides,GLP）的体内抗肿瘤活性。方法：以GLP为受试物,考察其对S180肉瘤荷瘤小鼠的抗肿瘤活性,同时通过测定小鼠机体免疫系统各项生化指标,初步探讨GLP的抗肿瘤作用机制。结果：GLP对S180荷瘤小鼠具有较强的抑瘤活性,当小鼠的GLP腹腔注射剂量为100 mg/（kg•d）（以体质量计）时,抑瘤率达到34.75%,高于中剂量灌胃组（200 mg/（kg•d））的抑瘤率（31.35%）。同时,S180荷瘤小鼠免疫器官指数极显著增大（P＜0.01）,GLP还激活了S180荷瘤小鼠淋巴细胞的增殖分化,S180荷瘤小鼠白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平极显著上升（P＜0.01）,IL-10水平极显著下降（P＜0.01）,GLP对免疫系统显示出较好的保护作用。结论：GLP具有较强的抗肿瘤活性,且腹腔注射给药效果优于灌胃给药。GLP对小鼠机体免疫调节作用可能是其抗肿瘤作用的主要机制之一。