HarpinEa促进烟草和蕃茄生长和诱导抗虫的信号通路

用HarpinEa对野生型烟草进行了处理,结果发现,HarpinEa能够促进植株的生长(Enhanced Plant Growth,EPG),提高内源SA和乙烯的水平,诱导对烟蚜的抗性(Insect Resistance,IR)。相应地,半定量RT-PCR方法检测表明,harpinEa诱导野生型烟草中水杨酸(salicylic acid,SA)信号传导重要调控基因NPR1、效应基因PR-1a、PR-1b以及乙烯信号通路中的ACS6、ETR1、EIN2等基因的表达。在不积累SA的NahG烟草上,harpinEa诱导EPG和IR的能力不受影响,但RP-1a、PR-1b基因的表达水平显著降低。这些结果说明,harpinEa诱导EPG和IR过程与SA信号通路无关,而可能受乙烯信号调节。     

根据基因表达谱与基因功能模块研究大鼠抑郁症发病的分子机制

用Willner法构造大鼠抑郁症模型,由基因芯片检测8例模型和8例正常大鼠的基因表达谱,识别差异表达基因,寻找差异表达基因功能模块并构建基因表达相关网络,研究大鼠抑郁症模型的分子病理机制.在基因本体(GO)功能体系中寻找显著富集差异表达基因的疾病相关功能模块,提取疾病相关功能模块中的基因构造表达相关网络.从中选择显著多地与其它基因共表达的基因定义为HUB基因,并进一步研究其与疾病的关系.筛选得到207个差异表达基因及13个差异表达基因功能模块,主要涉及神经肽激素活性、信号传导通路、核糖体生成以及蛋白质转运与降解.在共表达相关网络中进一步识别了4个差异表达的HUB基因.利用基因功能模块和表达相关网络研究疾病机制的结果显示,抑郁症的发病可能涉及单胺递质的释放、信号传导以及神经肽激素调节等通路协同作用.     

植物抗病防卫基因及其顺式元件的利用

植物抗病防卫基因的表达产物直接参加对病原物侵染的抵抗活动。这类基因都要由不同刺激信号诱导而表达，基因顺式调控元件尤其是激应性元件（ＲＥ）起关键作用。在ＲＥ可以接收的刺激信号中，化学诱导物是人们操纵基因表达、诱发抗病性的有效工具。根据防卫基因的表达调控机制，病原真菌的致病机制和植物的抗病机，一种在化学诱导型ＲＥ、强启动子和增强子调控下的防卫基因重组体的构建，将在转化作物，改造对真菌病毒的抗性方面发挥     

条斑紫菜cDNA微阵列制备及其在世代差异基因表达检测中的应用

为了高通量研究不同世代条斑紫菜的基因表达情况,选择了467个包含诸多功能基因的条斑紫菜基因克隆,经PCR扩增纯化后,点样于多聚赖氨酸包被的基片上制备了条斑紫菜功能基因cDNA微阵列.采用Cy3-dCTP和Cy5-dCTP 荧光分别标记条斑紫菜配子体和孢子体cRNA,与阵列进行杂交后,获得了信号清晰、重复性良好的扫描图像.经对标准化处理后的467个基因的数据进行分析发现:在配子体中表达量上调的基因有55个,其中有21个基因与已知功能基因或推测功能基因相匹配;在孢子体中表达量上调的基因有86个,其中与已知功能或假定功能基因相匹配的基因有24个.实验证明,优化的cDNA微阵列制备技术用于条斑紫菜基因表达分析有较高的效率和可靠的实用性能.     

基于基因芯片的人参作用脑组织抗衰老基因表达谱的研究

针对D-半乳糖造成的小鼠亚急性衰老模型,采用Cy3和Cy5两种不同的荧光染料通过逆转录反应将人参作用前后的小鼠脑组织细胞mRNA分别标记成两种探针,混合后与小鼠基因芯片杂交。借助计算机分析扫描芯片荧光信号图像,寻找出经人参作用后表达有差异的基因。据此研究人参水煎剂对衰老模型小鼠脑组织细胞基因表达的影响,以深入探讨其作用的分子机制。研究表明,微矩阵基因芯片在研究人参作用前后衰老模型小鼠脑细胞基因表达的改变时,具有快速、高通量、高敏度等特点,为运用生物芯片技术研究中药抗衰老机理提供了有价值的方法。     

表达harpin基因的大肠杆菌DH5（pCPP430）诱导植物抗病性的研究

用表达ｈａｒｐｉｎ基因的大肠杆菌ＤＨ５进行了诱导植物抗病性的研究，发现表达ｈａｒｐｉｎ基因的重组菌除可明显诱发烟草、番茄叶片的过敏反应外，对玉米、水稻叶片也可诱发过敏反应，反应比相应阳性对照病菌速度快，坏死斑也更典型。用ＤＨ５菌悬液喷雾或注射诱导后，番茄对早疫病、水稻对稻瘟病、玉米对大、小斑病、马铃薯对软腐病的抗性均有不同程度的提高，与水杨酸诱导的抗性效果相当或比其略高。     

抗稻瘟病新基因pi-hit-1的克隆与功能研究

采用差异显示法(DD-PCR)寻找易感稻瘟病的突变品系与野生型对照品系中的差异表达基因。结果发现与野生型对照相比,Rubisco小亚基、pi-hit．1(AF450251)和pi-hit-2(AF448491)基因在易感稻瘟病的突变品系中高表达,pi-hit-1和pi-hit-2是功能未知的新基因。进一步采用电子克隆和RT-PCR方法克隆了pi-hit-1基因的全长eDNA(AF514859),该基因编码的蛋白质属于ATP依赖的Clp蛋白酶家族。分析pi-hit-1基因的组织特异性表达发现,此基因在叶片组织特异表达。进一步设计接种诱导实验研究pi-hit-1基因表达与水稻稻瘟病易感性的关系。在易感稻瘟病的突变品系中pi-hit-1受稻瘟病菌诱导,接种后其表达量明显升高,而野生型对照品系pi-hit-1基因表达在接种前后无明显变化。比较易感稻瘟病的突变品系与对照品系pi-hit-1基因序列差异发现,稻瘟病敏感品系中pi-hit-1基因第一外显子发生缺失突变使pi-hit-1蛋白功能缺失,导致突变品系易感稻瘟病。这些实验结果提示野生型pi-hit-1是稻瘟病抗性基因。     

cAMP信号通路在5-羟色胺诱导硬壳蛤卵母细胞成熟过程中的作用

采用体外药物诱导的方法,研究了5-羟色胺(5-HT)诱导的硬壳蛤(Mercenaria mercenaria) 卵母细胞成熟过程中 cAMP 信号通路的作用.结果表明,浓度为0.01～100μM的5-HT 均能够显著地诱导硬壳蛤卵母细胞的成熟,处理 60min 时生发泡破裂(GVBD)发生率均可达到 70% 左右.不同浓度 5-tHT 的诱导作用表现出时间依赖性,但未表现出浓度依赖效应.咖啡因、茶碱和 3- 异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)可以单独抑制卵母细胞的自发成熟,但效果不显著.10mM的咖啡因和茶碱以及 5mM 的 IBMX 能够显著地抑制 5-HT的诱导效果.1mM 的 IBMX 对 5-HT 的诱导效果影响不显著,1mM的咖啡因和茶碱能够促进 5-HT 的诱导作用,但差异不显著.研究结果表明,cAMP 信号通路参与了 5-HT 诱导的硬壳蛤卵母细胞的成熟过程,并且 cAMP 浓度的升高会抑制其成熟,cAMP 信号通路在硬壳蛤卵母细胞的成熟过程中可能起着负调控的作用.     

抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达

人工合成了能广泛识别HIV—1 gp120的单链抗体(SeFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因,将SEA基因第227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT,并对两基因进行密码子优化。构建原核温控型表达质粒pBV—120和pBV—SL120,经条件优化,pBV—120和pBV—SL120分别在E．coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达,表达量分别占菌体总蛋白的27．673％和32．519％。目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV—1抗原条发生良好的结合反应。     

转"全鱼"GH基因鲤鱼胸腺发育差异表达基因的筛选与鉴定

采用显微注射方法,获得了转"全鱼"生长激素(GH)基因鲤鱼(转基因鱼),应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建了4月龄F3转基因鱼胸腺发育差减cDNA文库,筛选并鉴定了与胸腺发育相关的81个与已知基因同源的表达序列标签(EST).这些EST至少代表69个基因.根据基因的作用将其分为5类:18个与免疫和细胞防御有关;23个参与细胞生长、发育和分化等代谢过程;3个参与细胞信号传导和周期调控;8个在转录和表达调节中发挥作用;17个为核糖体蛋白基因,表明转基因鱼胸腺细胞处于活跃的蛋白合成状态.应用RT-PCR和虚拟Northern杂交技术进一步证实其中的若干基因在转基因鱼胸腺组织中的表达量增加.实验结果为阐明转植GH基因促进鲤鱼胸腺发育的相关分子机制提供了依据.     

模具表面离子氮化工艺研究

研究了一种利用空气／甲烷混合气体对模具表面进行离子氮化的新工艺,分析了渗层的硬度、组织及物相。结果表明,通过加入甲烷气体,可以实现用空气直接进行离子氮化处理,通过调整甲烷流量,可以获得不同的渗氮硬度和物相。     

Report on ONR Workshop on Fracture Scaling

The paper reports on the discussions at the ONR Workshop on Fracture Scaling, held at University of Maryland in June 1999, under the chairmanship of Z.P. Baant and Y.D.S. Rajapakse. The workshop dealt with size effects in structural failure and scale bridging in mechanics of materials. The lectures at the Workshop were published in Volume 95 of this Journal. The objective of this paper is to present records and interpretations of the extensive discussions prepared by invited specialists. The records show which are the areas of disagreement among leading researchers and which are those where consensus has been reached.     

基于下一代网络的SLEE APIs的研究

对下一代网络业务逻辑执行环境(SLEE)的研究现状作了简要分析，在此基础上给出了业务逻辑执行环境(SLEE)的体系结构。为满足不同层次业务开发者编写业务(或应用)的需要，提出不同抽象粒度的SLEE应用业务编程接口(APIs)的体系框架。最后列举了两个用这些APIs实现的业务的例子。     

基于符号学的产品设计研究

主要运用符号学原理来研究产品设计,把各种设计元素看作符号,研究产品符号的价值构成,产品设计的传达过程和编码规则,帮助设计者树立正确的设计价值观,从而更好地处理产品设计中各种设计元素的关系,指导设计活动的顺利进行.     

星载抛物面天线反射器太阳辐射热流分析

太阳辐射是在轨抛物面天线反射器产生变形并导致其电性能下降的重要因素。针对天线轨道位置的时变性及抛物反射器的几何特点,讨论了太阳辐射光线与轨道面的夹角、进出地球阴影区的时刻等参数。根据抛物面方程以及太阳光辐射向量,运用几何方法分析抛物面天线的自遮挡作用,并给出了相应的判据,同时利用坐标变换实现天线反射面的对地指向不变。该方法实现对在轨抛物面天线反射器的太阳辐射热流的实时分析,为准确分析反射器的热变形或热颤提供条件。     

复合微孔玻璃膜的研制（Ⅱ）

利用由原硅酸四乙酯的水解缩聚反应制得的溶胶作为涂膜液，在多孔陶瓷基体上通过多次涂膜－干燥－加热过程，最后在盐酸中浸沥，可制成多孔的无机复合玻璃膜．探索了复合玻璃膜的成膜工艺因素涂膜方式和次数，加热和酸浸沥条件对膜性能的影响     

制造过程的质量管理探讨

生产过程控制是对“５ＭＥ”质量因素的控制,其控制活动体现在每一个生产工序中。     

基于生活形态的产品设计研究

以现代产品单纯的功能诉求远不能满足市场需要为出发点,分析了设计研究与生活形态关联的重要性。介绍了生活形态的理论及其常用方法,结合现实课题的实践分析,探讨了基于生活形态的前期设计研究思路。通过示范和论述生活形态在设计研究、产品设计中起到的作用,并且以最终概念设计为延伸,提出了如何更好地进行创新的一种设计研究思路。     

基于文献反思参与式设计

目的 分析和反思有关参与式设计(PD)理论形成与实践的文献,并解决三个问题,强调“参与”设计的项目中为什么使用已经淡化了“参与”概念的PD;在商业环境中进行PD实践的前提;PD的核心理念是否应当按照某些指标排序。方法 筛选Web of Science数据库中收录的PD相关研究文献,用自然断裂点分级法划分出PD研究的四个阶段,通过CiteSpace 工具筛选各发展阶段中的重要文献,定性分析各阶段的文献。结果 梳理了PD的发展过程和核心理念,得出了PD的本质,分析了PD实践与PD理论间的隔阂,并探讨了PD未来的研究方向。结论 PD本质是文化、政治思想在设计活动中的表达;设计项目中使用PD可能是为了程序正义;“有用”是商业环境中进行PD实践的前提;对PD核心理念的排序是合理且有用的。     

对等网络技术在网络电视(IPTV)中的应用研究

本文为解决网络电视（IPTV）网络中数据服务器传输瓶颈问题,提出了一种新方法,即引入对等网络技术。文中介绍了对等网络技术原理,将对等网络技术与组播技术进行了比较,研究了对等网络在IPTV应用中的实现方法,总结出对等网络技术的优势,并提出对等网络存在的不足,以及采用DRM技术来弥补不足的方法。