黑曲霉固态培养生产纤维素酶的研究

黑曲霉突变株ＤＭ－１是一株产纤维素酶菌株，其中β葡萄糖苷酶活性特别高。采用粗纤维原料固体培养，发酵９６小时（培养温度３１℃），其滤纸酶活和β葡萄糖苷酶活分别为９５和１２００ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。本试验系统研究了各种营养成份和培养条件对ＤＭ－１菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为：稻草杆（或麦杆）∶麦麸为６０∶４０、硫酸铵３．０、硫酸镁０．３、玉米浆３．０，加水２００％，自然ｐＨ；环境湿度８５％－９０％。酶反应最适温度和ｐＨ分别为５５℃－６０℃和ｐＨ５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ３．０－８．０范围内处理１小时，残余酶活力在８５％以上，该酶经５５℃处理３０ｍｉｎ，剩余酶活力为８６．０％。     

里氏木霉液体发酵纤维素酶的研究

里氏木霉突变株ＲＭ－２７是一种高产纤维素酶生产菌。本文对里氏木霉ＲＭ－２７摇瓶发酵产酶条件及小型自动发酵罐工艺条件等进行了系统的研究。试验结果表明，在通风量０．２－０．６ｖｖｍ，搅拌转速为２５０－４００ｒｐｍ、发酵温度２９℃及控制发酵液ｐＨ在５．０－５．５的条件下，在２５Ｌ发酵罐上发酵１０４小时左右，其滤纸酶活和羧甲基纤维素酶活分别为３１．８和５１６０ｍｇ葡萄糖／ｍｌ，发酵滤液用硫酸铵盐析沉淀得固     

黑曲霉纤维素酶的特性研究

在黑曲霉突变株ＤＭ－１所产生纤维素酶中，β－葡萄糖苷酶活力较高。采用固体发酵培养，其滤纸酶活和β－葡萄糖苷酶分别为９５和１２００ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。本试验系统研究了该酶的固体发酵培养过程，最适反应温度，热稳定性，最适反应ｐＨ以及ｐＨ对酶稳定性的影响，为该酶在酿造行业中的广泛应用提供参考依据。     

黑曲霉液体发酵纤维素酶的研究

在黑曲霉ＤＭ—１液体深层发酵所产纤维素酶系中，β－葡萄糖苷酶活性特别高。系统研究了ＤＭ—１菌株的摇瓶产酶条件及２５Ｌ发酵罐发酵工艺。２５Ｌ发酵罐试验结果表明，在通风量０．４～１．０ｖｖｍ、搅拌转速２５０～５００ｒ／ｍ、发酵温度３１℃及控制发酵液ｐＨ在４．０左右的条件下，发酵１０４小时，其β－葡萄糖苷酶活和ＣＭＣ分别为３３０和２４１ｍｇ葡萄糖／ｍｌ。发酵滤液经硫铵盐析沉淀、过滤或离心及干燥等过程得固体纤维素干酶粉。其中β－葡萄糖苷酶活为１３５００ｍｇ葡萄糖／ｇ，平均收率８０．２％。     

几丁质固定化无花果蛋白酶的研究

载体几丁质通过甲酸和戊二醛活化共价偶联无花果蛋白酶，固定化反应在给酶量为１．０ｍｇ／ｇ载体，ｐＨ７．５，４℃进行１５ｈ。制备的固定化酶表观Ｋｍ值（酪蛋白）为０．９５ｍｇ／ｍｌ，溶液酶的Ｋｍ值为０．３８ｍｇ／ｍｌ，固定化酶的最适ｐＨ范围变宽，由溶液酶的最适ｐＨ７．５－７．８变为在ｐＨ６－８范围内酶活性保持稳定；固定化酶的最适温度由溶液酶的６０℃变为３７℃。重复水解酪蛋白７次后，固定化酶保持原酶活性５     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

黑曲霉HD9478纤维素酶固体发酵条件的研究

通过激光诱变筛选，获得一株高产纤维素酶的突变株ＨＤ９４７８，在以稻草，麦麸为主要原料的固体培养基上进行发酵培养，所产纤维素酶的固体曲，以羧甲基纤维钠为底物的纤维素Ｃｘ酶活力为３５００Ｕｇ，以滤纸为底物的纤维素ＣＬ的酶活力的２６０Ｕ／ｇ，以水杨素为底物的β－葡萄糖苷酶活力为１２００Ｕ／ｇ，发酵培养的条件是培养基起始ｐＨ６．０～７．０，培养温度２８～３２℃，培养时间７２ｈ。三种酶作用的最适ｐＨ分别为３     

耐热性纤维素酶的研究及在酒精生产中的应用

耐热性纤维素酶的生产、性质及在酒精生产中的初步应用，采用粗纤维原料固体培养，最佳培养条件为：温度为３０℃，自然ｐＨ。酶作用的最适ｐＨ为４．６，稳定性较好，反应最适温度为５５℃～６０℃，该酶经６０℃处理９０ｍｉｎ，剩余酶活力达８０％以上。最适发酵培养基为：玉米芯∶麸皮＝２∶４，加水比是１∶１．５，发酵周期为４天左右。在此条件下，其滤纸酶活为２８４．９ｕ／ｇ。纤维素酶应用于以瓜干为原料的酒精生产，在其最适使用工艺条件下，原料出酒率达３５．３６２３％，比对照提高１．２６％。     

里氏木霉液体发酵法生产纤维素酶

通过比较几株霉菌产纤维素酶活力，发现里氏木霉ＲｕｔＣ－３０活力最高；采用Ａｖｉｃｅｌ与麸皮复合碳源，以及使用ＫＨ２ＰＯ４－Ｋ２ＨＰＯ４缓冲系统控制发酵液ｐＨ，２８℃摇瓶发酵６ｄ，最高酶活达到ＣＭＣａｓｅ１００－１２５Ｕ／ｍｌ，ＦＰＡ９－１２Ｕ／ｍｌ。采用２．５升发酵罐培养，通过控制ｐＨ和溶氧，纤维素酶活力为ＣＭＣａｓｅ１３３．４Ｕ／ｍｌ，ＦＰＡ１１．６７Ｕ／ｍｌ。用硫铵盐析法提取制得纤维素酶干粉，其活力为ＣＭＣａｓｅ３０７４．９Ｕ／ｇ，ＦＰＡ１６６．７Ｕ／ｇ。     

短小杆菌酶促合成二肽甜味剂Aspartame

研究多种因素对短小杆菌酶催化Ｌ－天冬氨酸（Ｌ－Ａｓｐ）和Ｌ－苯丙氨酸甲酯（Ｌ－ＰｈｅＯＭｅ）合成二肽甜味剂Ａｓｐａｒｔａｍｅ能力的影响。结果表明，反应最适ｐＨ为６．０，最适温度为４０℃，反应１０ｈ，催化能力为０．４７５ｇＡＰＭ／ｇ菌体，产率８０．５％，收率８１．０５％。     

酶法水解文蛤肉的研究

以海产文蛤肉为原料，用酶水解获得复合氨基酸水解液。水解液中含有１８种氨基酸，牛磺酸，多种维生素及微量元素，酶水解的最适条件为：水解时间４－６ｈ、温度５０－５５℃，初始ｐＨ７．０，酶添加量１．５－２．０％。酶解后，游离氨基酸含量可达５４．６２ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，其中必需氨基酸占５０％以上，牛磺酸为２６６ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，蛋白质的水解率为５６．７８％。     

对苯醌活化法固定化脂肪酶的研究

研究了对苯醌活化法在纤维素滤纸膜载体上固定化猪胰脂肪酶的最佳条件。结果表明,当对苯醌浓度为０．０１ｇ／ｍｌ,活化６０ｍｉｎ,与浓度为０．００５ｇ／ｍｌ的酶的ｐＨ８．０的磷酸盐缓冲溶液于４℃交联２４ｈ,获得的固定化酶活最高,为０．４４Ｕ／ｃｍ＾２。固定化酶最适温度３５℃,最适ｐＨ９．０。     

里氏木霉纤维素酶在酒精生产中应用的研究

本文探讨了里氏木霉纤维素酶的生产、性质及在酒精生产中的应用。采用固态培养法生产纤维素酶，最佳培养条件为：ｐＨ４．４￣４．６，温度２８￣３０℃，物料水份６８￣７０％，培养４￣５天，在此条件下，其ＣＭＣＮａ酶活可达９０００￣１２０００ｍｇＧ／ｇ·ｈ。纤维素酶应用于以玉米为原料的酒精生产，其最适使用工艺为：添加量每克原料１２单位，１／３的纤维素酶在调浆时加入，２／３的纤维素酶在糖化后加入。在此试验条件下     

雪菜中芥子苷酶解特性的研究

借助于硫脲紫外分光光度法，对雪菜中的芥子苷的酶解性质进行了研究。经检测，实验用雪菜中芥子苷含量为０．０７％。单因素实验显示，芥子酶的最适ｐＨ６．０～７．０，最适温度７０℃，Ｖｃ对芥子酶有明显的激活作用，而０．５％ＮａＣｌ对芥子酶有显著的抑制作用。正交试验表明，ｐＨ是影响芥子酶活的高度显著性因素，ＮａＣｌ浓度为显著性因素。ＲＳＡ优化试验得出，在室温２０℃下２０％雪菜汁中芥子苷酶解的最佳条件为：ｐＨ６．５６，ＮａＣｌ浓度３．４７％，冷冻干燥芥子酶粗酶粉添加量５．３７ｍｇ（５ｍｌ２０％雪菜汁中），反应１ｈ，最大酶活可达７．６７ｕ。研究结果可供腌制雪菜加工参考使用。     

饲用β—葡聚糖酶固体发酵的研究

研究了黑曲霉Ｇ－４１５固体发酵中碳氮比例，无机氮源，大麦粉及发酵时间对β－葡萄糖酶酶产量的影响，该菌在２８℃培养５０ｈ，β－葡聚糖酶活力可达６２６８８ｕ／ｇ（干曲），酶最适反应温度４０℃，最适ｐＨ５．５。     

圆弧青霉PG37碱性脂肪酶的研究

圆弧青霉突变株ＰＧ３７是一株高产碱性脂肪酶生产菌，摇瓶酶活为５０５２ｕ／ｍｌ，作者对ＰＧ３７发酵产酶工艺及脂肪酶的酶学特性等进行了系统的研究。结果表明圆弧青霉ＰＧ３７的摇瓶最适工艺条件为：装液量５０ｍｌ／５００ｍｌ三角瓶；摇瓶转速２５０ｒｐｍ；培养温度及时间分别为２８℃和９６小时；起始ｐＨ７．５；发酵过程中第３６、５４和７２小时洛流加０．４％棉籽油。ＰＧ３７肥肪酶的最适作用ｐＨ为１０．０－１０．５     

β—葡聚糖酶高产菌株的选育及发酵条件的研究

从土样中筛选到一株产β－聚精酶的曲霉ＦＳ６８野生菌株,经ＵＶ,ＮＴＧ等五代诱变,获得变株ＦＳＵＮ－５１。对该菌株产酶条件优化实验结果表明：最佳培养基配方（％）：大麦粉５,黄豆饼粉 ２, ＦｅＳＯ_４· ７Ｈ_２Ｏ ０． ０１, Ｎａ_２ＨＰＯ_４ ０． １, ＣａＣＯ_３ ０． ５, ＭｇＳＯ_４ ０． ０３, ＮａＮＯ_３ ０． ４;最适的发酵条件为产酶ｐＨ为６．５,温度为３１℃,在２５０ｍｌ三角瓶中装量为２５ｍｌ,发酵周期为７２ｈ,摇瓶相对酶活比野生菌株提高６９％。     

脂肪酶固定化工艺

研究了以纸纤维素为载体,对－β－硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）为活化剂共价偶联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明：醚化反应最适ｐＨ为１０．０,偶联最适条件为ｐＨ８．０,酶量控制在８００μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｇ）,所获得固定化脂肪酶具有较高的酶活和酶回收率,且有较好的稳定性,其半衰期为３７５ｈ．     

长梗木霉ANU3—958菌株原生质体诱变选育

本研究是以在食品工业生产中有较广泛应用前景的纤维素酶的产生菌－－长梗木霉ＡＮＵ３－９５８为出发菌株，探讨用溶壁酶对菌丝体进行破壁，提取原生质体再用秋水仙碱进行诱变处理，再生后经多次筛选，从中选育出三株酶活较高的菌株，提高最多的与出发菌株相比，ＦＰ酶活提高７７．２％，酶活达２３７．６ｍｇ／ｇ．ｈ；ＣＭＣ酶活提高１７．５％，酶活达２４５７ｍｇ／ｇ．ｈ。并有高峰期提前，产孢子较少的优点。