稗草皱缩矮化病毒与水稻皱缩矮化病毒之电子显微镜比较研究

本文以电子显微镜观察比较稗草皱缩矮化病毒(Echinochloa ragged stunt virus,ERSV)与水稻皱缩矮化病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)之形态特徵。ERSV以PTA(phosphotungsticacid)负染在电显下可观察到类似fijiviruses之外部形态构造。完整粒子呈球形,直径约80nm,具双层核蛋白及A-spikes构造(图二,三)。不具外层核蛋白的亚粒子为20面体之球形构造,顶与顶间之距离约70nm。一般纯化后负染之病毒粒子都呈球形,其外层核蛋白显然受到破坏,内层亦部分受到破坏,此种粒子直径约54-58nm(图一)。内外层核蛋白均遭破坏的中核,直径约50nm     

用冷冻蚀刻技术研究几种病毒的形态发生

几种大型病毒的冷冻蚀刻研究(痘苗病毒、山羊痘病毒和疱疹病毒等)在我国已有报导。本文拟报导三种中小型病毒的形态结构及形态发生过程。<1>水泡性口炎病毒(vsv)、属弹状病毒科,有囊膜的病毒,大小70×170nm;<2>辜德毕斯病毒(sbv),属披盖病毒科,有囊膜的病毒,直径50—60nm;<3>人腺病毒,属腺病毒科,无囊膜的病毒,直径约70nm。在腺病毒感染的宿主细胞核内,可观察到处于不同装配和成熟阶段的病毒粒子(图A、左不)。在VSV和sbv感染的宿主细胞质中和细胞质空泡内可观察到病毒核衣壳装配的过程,尤其在宿主细胞的表面更清楚地显示出病毒以出芽的方式向细胞外释放的各个细节。(图A     

从患败血症欧洲鳗鲡检出疱疹病毒

本文对2005年、2006年的春、夏和秋季,福建省各养殖区患败血症的欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)进行超微病理学研究,经电镜观察,患败血症欧洲鳗鲡鳃、肝和肠组织细胞内检出疱疹病毒.鳃上皮细胞核内病毒核衣壳,呈圆形或双环状,直径约80 nm～100 nm,核心或致密,或空壳.鳃上皮细胞和成纤维细胞胞浆内可查见成熟病毒粒子,有包膜,呈圆形、核衣壳致密、直径约130 nm～150 nm.肝细胞和肠粘膜上皮细胞核内所查见的病毒核衣壳,呈圆形或双环状,多数核心密度高.文中还讨论了感染细胞核内与疱疹病毒核衣壳共存的直径30 nm～40 nm的微泡样结构的性质.在病鳗感染细胞内所检出病毒的形态学和形态发生学特征符合疱疹病毒科(Herpesviridae)病毒的形态.     

鸭乙型肝炎病毒的形态学及形态发生的超微结构研究

本文报告对上海市清浦县的35只麻鸭的血清及13只麻鸭肝组织的电镜观察结果。所有鸭均为雌性,约1年令。翅静脉取血,分离血清,超离心浓缩病毒,悬液作负染色标本。肝穿组织按常规制备超薄切片标本,透射电镜观察。负染色标本观察表明,鸭血清中的鸭乙型肝炎病毒(DHBV)基本有两种形态,I型病毒呈园球形,直径40—50nm,某些病毒核壳呈20面体排列的亚单位结构,部分色膜破裂的病毒核壳可显示放射状排列亚单位,可能属20面体对称型病毒;Ⅱ型病毒形态不规则。未显示明确的表面结构,大小35—65nm不同个体和不同年令鸭血清中的病毒形态常有差异,     

甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒复合侵染甘薯引起的细胞病理学研究

2011～2012年在浙江杭州连续发现感病甘薯植株具有甘薯病毒病SPVD的典型症状,透射电镜观察发现其叶片包含有长度为600—900nm,直径为12nm的线状病毒粒子。使用特异性引物进行RT—PCR扩增及测序,其病原为甘薯羽状癍驳病毒（Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV）和甘薯褪绿矮化病毒（Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV）复合侵染。运用透射电镜研究SPVD引起的细胞病理学变化,观察到叶肉细胞的细胞质中含有马铃薯Y病毒属特征性柱状内含体,其结构分类为Ⅳ型;线状病毒样粒子以束状平行排列成聚集体的方式存在于细胞质中;叶绿体伸出伪足状结构包裹线粒体。在维管束细胞的筛管和伴胞中观察到弯曲线状病毒样粒子形成的聚集体,其粒子排列交错,与叶肉细胞中平行排列的病毒样粒子聚集体不同,符合毛形病毒属特征。另外还在维管束和叶肉细胞结合的部位发现复合侵染的细胞病理学特征。本研究表明危害甘薯生产的SPVD已扩散蔓延到浙江省。     

运用数字暗场和结构重构方法测定FePt纳米粒子的正二十面体结构(英文)

小粒子结构一直是人们关注的研究热点,上世纪70年代运用暗场像技术发现了具有多重孪晶结构的正二十面体和正十面体结构.近年来,人们已经能够合成直径只有几纳米、结构复杂的纳米粒子,传统的高分辨像和衍射等方法难以获得这些纳米粒子的结构.本文以直径约6nm的FePt粒子为研究对象,通过系列欠焦像波函数重构获得了该粒子亚埃分辨率高分辨相位像,并对该相位像进行了数字暗场像分析研究,通过结构重构并结合高分辨像模拟测定该粒子具有二十面体结构,为确定具有复杂结构的纳米粒子结构提供了一种新途径.     

齿蕊十大功劳(Mahonia leveilleana Schneid.)茎端分生组织细胞中前片层体的超微结构观察

利用透射镜和扫描透射电镜观察到:齿蕊十大功劳(Mahonia leveilleana Schneid)茎端分生组织细胞中的前片层体为立体的规则菱形网状拟晶格结构。网格的长径约44nm,短径约26nm,管状小泡直径约22nm。黄化质体内的前片层体同白色体内的前片层体相比较,在质体的发育转变过程中略有区别。黄化质体内扁平束泡是由     

人巨细胞病毒在人胚肺细胞内的形态发生研究

以人巨细胞病毒AD-169株感染人胚肺成纤维细胞20分钟后,在电镜下观察到病毒颗粒吸附和穿透过程。感染后18小时,细胞核内出现包涵体。包涵体内有空心的核衣壳、含有病毒核心的核衣壳和二个同心园状的核衣壳。并见到病毒核心样物正在嵌入到核衣壳内的不同阶段形态(图1)。这提示核内包涵体是病毒复制和装配的场所。核内成束的小管状结构,其直径与核衣壳相同,可能是核衣壳结构蛋白或其前体物质的不稳定形态(图2)。胞浆包涵体内除含有成熟病毒和致密体外,尚有许多吞噬溶酶体,空泡和肿洚的内浆网、线粒体等。胞浆包涵体范围以外的胞质内细胞器基本正常,很少病毒颗粒和致密体(图     

应用冷冻蚀刻技术研究几种病毒的超微结构

采用冷冻蚀刻技术研究了GPV、IBRV和NDV等几种病毒的超微结构,初步取得如下结果: 一、在冷冻蚀刻样品中,GPV呈球形(在细胞质内)或近似球形(释放到细胞外),直径约300nm,这与在超薄切片或负染色样品中所见的病毒形态和大小有很大的不同。二、IBRV囊膜的PF和EF面上,均可见到直径5—9nm的膜内微粒。GPV囊膜膜内微粒的数量及其在PF面和EF面上的分布与IBRV不同。细胞质内与细胞外成熟的GPV囊膜的膜内微粒也有明显的差异。三、在GPV毒浆基质中,可观察到由直径5—10nm颗粒的聚集或规则排列形成的弓形、环形、及直径150—400nm大小不等的球形结构。实验结果显示了冷冻蚀刻技术在病毒形态结构和形态发生,尤其在病毒囊膜结构研究中的优越性。对这一技术在病毒学中的应用进行了讨论。     

山羊痘病毒囊膜的超微结构与形态发生

痘病毒可以作为研究生物膜形态发生的很好材料。我们应用冷冻蚀刻技术并附以超薄切片、负染色,细胞表面复型和扫描电镜等技术,对一种复制周期很长的痘病毒——山羊痘病毒囊膜的精细结构和发生过程进行了比较研究。病毒发育早期,毒浆周围出现的弧形膜样结构在冷冻蚀刻样品中呈现出间距为15—20nm均匀排列的二层颗粒;未成熟病毒囊膜为圆形,直径约400nm,因其常常从病毒中部断裂,因而可清楚地显示出病毒周缘仍由二层颗粒围绕;细胞质内成熟病毒囊膜为直径320—340nm的规则球体,其的PF面和EF面上均可见到大量直径为7—10nm的膜内微粒。释放到细胞外的成熟病毒囊膜的PF或EF面仅有少量的膜内微粒,囊膜形态呈不规则的球体     

从庚型肝炎病人肝穿组织中发现具有布尼安病毒科（Bunyaviridae）病毒形态特征的病毒颗粒

应用常规超薄切片技术,对单纯HGV感染患者的肝穿组织进行电镜观察。发现肝细胞胞浆内高尔基囊泡增生、扩张,在扩张的囊泡中见到呈芽生性生长和成熟的病毒颗粒。成熟病毒具有双层脂质包膜及表面穗状微突,核心为微细点丝状,直径约70－120nm,根据其形态学及形态发生特征,可以主伙HGV有可能属布尼安病毒科（Bunyaviridae)成员。     

养殖鳗鲡疱疹病毒和支原体共感染的超微形态学证据

2011和2012年福建省各养殖区引进的美洲鳗鲡(Anguilla Rostrata)和双色鳗鲡(Anguilla bicolor bicolor)在玻璃鳗培育阶段普遍发生"红肝病",导致了较高的发病率和死亡率,给养殖生产造成严重的危害。本文应用透射电镜(TEM)对各养殖区患"红肝病"的美洲鳗鲡和双色鳗鲡进行超微病理研究。结果显示:在患病美洲鳗鲡鳃组织的肌肉细胞间质中的纤维母细胞查见胞核内许多排列无序的疱疹病毒核衣壳,多数呈空心双环状,直径约80 nm~100 nm,少数核心致密呈线点状或蝌蚪状。在患病双色鳗鲡鳃上皮细胞核旁胞浆内可查见个别成熟病毒粒子。根据所检出病毒的形态和形态发生学特征可以确定该病毒为疱疹病毒科(Herpesviridae)的成员。另外,在病鳗肾细胞的细胞突起之间和细胞外可查见许多大小不等、形态多样,呈杆状、球形、哑铃形或橄榄形,有双层脂质外膜,无细胞壁的支原体(pleuro-pneumonia-like organism,PPLO)。本研究在国内首次应用TEM显微镜意外地在自然感染的养殖鳗鲡组织细胞中检出疱疹病毒和支原体,为鳗鲡"红肝病"的防控提供了有价值的科学依据。     

三种动物慢病毒形态及形态发生的比较研究

用电镜检查确定了不同感染时间的马传染性贫血病毒 (EIAV)、维斯纳 梅迪病毒 (MVV)和山羊关节炎脑炎病毒 (CAEV)的形态和形态发生。成熟的病毒粒子为电子致密的球形 ,有囊膜 ,直径约 10 0nm ,含有 1个 (有时有 2个或 2个以上 )的核芯。维斯纳 梅迪病毒和山羊关节炎脑炎病毒的核芯为球形 ,马传染性贫血病毒为杆形或锥形。在大部分病毒里能清晰地看到核芯壳 ,成熟的病毒从感染细胞的胞浆膜上出芽 ,在胞浆中还见到了花环状粒子和多板层结构     

适配器-超速离心法提高电镜检测病毒的灵敏度

通过专用超速离心机将病毒直接离心至载网是重要的提高诊断电镜灵敏度的方法,作者尝试建立适配器-超速离心法实现相同目的。设计制造了外形类似离心管的载网适配器,其内部有一平底的凹槽,可以放置电镜载网,添加病毒悬液后,经过超速离心,能够将病毒粒子直接离心到载网上。利用重组腺病毒和重组腺相关病毒为模式病毒,适配器-超速离心法较悬滴法的病毒检测灵敏度提高了50～200倍;对人腺病毒41型（Ad41）细胞培养物进行电镜检测,灵敏度提高了50倍。如果将免疫凝集法（immune clumping）与适配器-超速离心法相联合进行电镜制样,检测灵敏度较常规免疫凝集法提高1～2个数量级。这些结果说明适配器-超速离心法能够高效地富集病毒,可以应用于病毒的电镜检测工作。     

Ultra-high-resolution scanning electron microscopy of vaccinia virus and its recombinant carrying the gag gene of human immunodeficiency virus type 1.

FL cells infected with vaccinia virus or its recombinant carrying the gag gene of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) were examined by ultra-high-resolution scanning electron microscopy. Virions, whether located extracellularly or intracellularly, had a brick-shaped or watermelon appearance as a whole. Extracellular virions observed on the surface of infected cells had variable surface ultrastructures depending on the manner in which particular virions were wrapped in cell membranes. Most of the intracellular naked virions adherent to the inner face of cell surface membranes clearly exhibited ridgy, rod-shaped or globular surface structures on their surface. HIV-like particles with a diameter of about 100 nm and virions of vaccinia virus were both observed distinctly on the surface of FL cells infected with the recombinant virus.     

猪瘟病毒与辛德毕斯病毒成熟和释放特征的比较研究

电镜下观察了二种有囊膜的正链ＲＮＡ病毒－－猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）与辛德毕斯病毒（ＳｂＶ）感染的宿主细胞。在ＳｂＶ ６Ｋ蛋白突变株感染的ＢＨＫ２１细胞中,可清楚地显示病毒从细胞质膜出芽与释放的过程,并在细胞擀中积累了大量的核衣壳。在ＣＳＦＶ感染的ＭＰＫ细胞中首次观察到较多的病毒核衣壳与成熟的病毒粒子,因而有可能对其成熟与释放方式的不同进行比较研究。此外,对病毒诱导的细胞超微病变特征进行了报道     

Ultrastructure of Felis catus whole fetus (Fcwf-4) cell culture following infection with feline coronavirus

Feline coronavirus (FCoV) consists of two biotypes based on their growth in cell culture and their antigenicity. Infections with FCoV are highly prevalent in the cat population worldwide. In this study, Felis catus whole fetus (Fcwf-4)cell culture was infected with FCoV UPM11C/08. Virus multiplication in cell culture was monitored and examined under the transmission electron microscope. The virus particles revealed the characteristic morphology of feline FCoV represented by envelope viruses surrounded by peplomers. Virus attachment and entry into the cell occurred 15?h post-infection (pi), and the myriad of virus particles were observed both extracellularly and intracellularly after 48?h pi. Thereafter, intracellular virus particles were observed to be present in vacuoles or present freely in the cytoplasm.     

侵染西瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测

黄瓜绿斑驳花叶病毒（ CGMMV）是危害西瓜生产的重要病害,造成西瓜果实腐烂,失去商业价值。应用透射电子显微镜和单抗dot?ELISA技术对采自浙江温岭的西瓜病叶进行快速病原检测,电镜负染色观察到病株汁液中存在大量刚直杆状的病毒粒子,超薄切片观察到细胞质内存在整齐排列的杆状病毒聚集体,与烟草花叶病毒属（ Tobamovirus）的形态特征相符;进一步采用dot?ELISA技术进行血清学检测,显示西瓜病叶与CGMMV特异性抗体呈阳性反应,检测结果表明感染西瓜的杆状病毒为CGMMV。从而为侵染西瓜的CGMMV提供快速检测途径。     

Budding process and maturation of human immunodeficiency virus examined by means of pre- and post-embedding immunocolloidal gold electron microscopy

The techniques of pre- and post-embedding immunocolloidal gold electron microscopy were tested for their usefulness for analyzing the morphogenesis of human immunodeficiency virus (HIV) strain LAV employing U-937 cells persistently infected with the virus (U-937/LAV). By both techniques the following results were obtained. (1) Budding process was restricted to a localized area at the membrane adjacent to the Golgi apparatus. (2) The distribution of viral envelope antigens was restricted to the electron-dense crescent structures on the cell surface. (3) Virions released from the cells could be classified mainly into 2 categories: virions with doughnut-shaped cores or with conical cores at the center of the particles. And p24 proteins localized on the thick electron-dense cores of both types. These findings support the idea that pre- and post-embedding immunogold electron microscopy is very useful for studying the morphogenesis of viruses.