FGF8—FGF家族的新成员

成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ＦＧＦ）家族是能够紧密结合肝素，并在核酸序列上具有一定同源性的一组蛋白，在各种不同的生理、病理过程中起着重要的作用。包括：胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、血管发生、肿瘤生长和浸润等。ＦＧＦ家族目前共有１９个成员，其中ＦＧＦ１８是ＦＧＦ家族新发现的的一个。 １９９８年，Ｍｉｃｋｅｙ等人最先用全长的小鼠ＦＧＦ——１８针筛选人心脏λ ＴｒｉｐＥｘ ｃＤＮＡ文库，获得了几个阳性的克隆，这几个噬菌体克隆的ｃＤＮＡ的插入片段插入到ｐＴｒ…     

人角质细胞生长因子的克隆及表达

目的为获得高表达的重组人角质细胞生长因子生物工程菌。方法应用ＲＴ－ＰＣＲ技术,从人胚 胎肺成纤维细胞中,扩增出ＫＧＦ ｃＤＮＡ基因,并插入ｐＵＣ１８－Ｔ载体,构建成了重组人ＫＧＦ基因,经ＤＮＡ测序证实与 文献报道一致。将ＫＧＦ基因定向插入大肠杆菌表达载体ＰＥＴ１１ｂ内,转化大肠杆菌ＨＢ１０１。结果获得的重组子 经ＩＰＴＧ诱导,在相对分子质量为１９０００处表达重组蛋白,约占菌体蛋白的１０％。结论建立了制备重组人ＫＧＦ表 达系统,为今后进一步研究ＫＧＦ的生物学功能奠定可靠的物质基础。     

成纤维细胞生长因子及其受体抑制剂的研究进展

成纤维细胞生长因子受体（FGFRs）是受体酪氨酸激酶（RTKs）超家族的一员,它可以与成纤维细胞生长因子（FGFs）结合,引发靶细胞的多种反应,同时参与许多生物过程,如细胞增殖、抗凋亡及血管生成等,发挥其生理功能。FGFRs分别在癌细胞和内皮细胞中参与肿瘤的发生和血管的生成,因此,FGFRs-靶向药物会产生直接或间接的抗癌作用。简单介绍了FGFs及FGFRs,重点对FGFR抑制剂的研究进展进行了综述。     

CD40与CD40L研究

ＣＤ4 0是肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)家族成员 ,可在多种细胞表达 ,包括各种抗原递呈细胞 (ＡＰＣ)、Ｂ细胞、成纤维细胞 ,上皮细胞、内皮细胞等。ＣＤ4 0配体(ＣＤ4 0Ｌ)是一相对分子质量 330 0 0ＩＩ型膜糖蛋白 ,也属ＴＮＦ家族 ,ＴＣＲ刺激下可在ＣＤ4 +Ｔ细胞上表达[1] 。最初研究显示ＣＤ4 0 ＣＤ4 0Ｌ的相互作用在胸腺依赖体液免疫反应中起重要作用 ,调节ＣＤ4 +Ｔ细胞和Ｂ细胞的同源化相互作用 ,对Ｂ细胞激活、分化及记忆的产生至关重要 ,同时对激活抗原递呈细胞也非常重要 ,是Ｔ细胞激活的关键[1] 。Ｌｅｆｒａｎｃｏｉｓ等的研究显示 …     

以VEGF受体为靶向的融合毒素的研究

肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素构建为融合毒素,特异性定位于肿瘤部位,通过抑制血管的增生达到抑制肿瘤的目的。国外自二十世纪九十年代后期开展这方面研究,国内尚少见此类报道。本文就此类融合毒素的设计及临床研究等方面的进展作一综述。     

反应核酸药物与抗肿瘤研究

现在各国正在利用反义技术发展一类由核酸组成的新型药物,即反义核酸药物。我们合成了５种血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的反义寡聚脱氧核苷酸。测定了它们在Ｓ１８０肿瘤细胞中对ＶＥＧＦ表达的抑制作用,还测定了它们在鼠角膜肿瘤模型上抑制由肿瘤引起的新生血管形成和肿瘤的生长。结果表明,部分硫代的或发夹结构修饰的ＯＤＮｓ均可有效抑制ＶＥＧＦ的表达、肿瘤的生长和新生血管的形成。线性的ＯＤＮ效果不好。两种作用于不同位     

人羊膜的制备保存及临床应用

人羊膜(human amniotic membrane,HAM)为附着在胎盘胎儿面的半透明双层薄膜,表面光滑,无血管、神经及淋巴,具有一定的弹性,含有胶原蛋白(collagen)、层黏连蛋白(laminin,LN)、整合素(integrin)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)、肝细胞生长因子(hepatic growth factor,HGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、转化生长因子(Transforming growth factor,TGF)等多种成分,具有抗炎、抗菌、抗黏连及免疫原性低的生物学特性,是一种天然的生物移植材料。本文就HAM的制备保存方法及其在医学、组织工程等方面的应用作一综述。     

富自体浓缩生长因子生物学作用的研究进展

富自体浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)为第三代血小板浓缩产物,是再生医疗领域中诱导组织再生分化的一种新型生物材料。CGF通过差速离心可释放出多种生长因子,如血小板衍生生长因子(plateletderived growth factor,PDGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor,IGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮生长因子(epidermal growth fcator,EGF)及成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)等,这些生长因子相互作用,可发挥促进组织再生的作用。本文就CGF在促进细胞增殖及分化、组织再生及修复、软组织愈合等生物学作用中的研究进展作一综述。     

重组碱性成纤维细胞生长因子的生化分析

为验证长春长生基因药业生产的重组成纤维细胞生长因子(ｂＦＧＦ)生产的稳定性及分析产品的结构,采用ＳＤＳＰＡＧＥ法和ＣＮＢｒ裂解法,对3批ｂＦＧＦ进行了相对分子质量测定及肽图分析。结果表明(1)ｂＦＧＦ经ＳＤＳＰＡＧＥ分析出现两条带,以标准蛋白的Ｒｆ值为横坐标,以标准蛋白的相对分子质量的负对数为纵坐标,做标准曲线,得知样品的相对分子质量为17500和23000,23000的蛋白分子为主要成分,见图1;(2)ＣＮＢｒ裂解后的ｂＦＧＦ经ＳＤＳＡＰＧＥ分析出现两条带,与Ｐｒｏｍｅｇａ公司生产的ｂＦＧＦ出现的两条带的位置一致,见图2。(3)3批…     

肿瘤侵袭抑制因子—2对基因重组肝细胞生长因子诱导的人肺…

应用基因重组肝细胞生长因子（ＨＧＦ）可诱导入肺癌细胞运动和侵袭，通过细胞离散，集落扩散和基底膜侵袭实验证明，侵袭抑制因子－２（ＩＩＦ－２）可明显地抑制由ＨＧＦ诱导的作用，该抑制作用可被抗ＩＩＦ－２抗体所阻断，表明ＩＩＦ－２在肿瘤转移的预防和治疗方面可能具有重要意义。     

论肝动脉化疗栓塞对肿瘤血管生成影响的实验研究

目的:对化疗栓塞手术后残存肿瘤组织中微血管密度、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子等内容表达情况、主要意旨的研究。方法:选取Walker256肝癌模型的大鼠60只,以20只为单位随机分配成3个小组,分别为对照组,单纯化疗组和化疗栓塞组。(1)对照组:通过肝动脉灌注一定剂量的生理盐水(0.3毫升即可);(2)单纯化疗组:灌注5-氟尿嘧啶20毫克/公斤;(3)化疗栓塞组:灌注超液态碘油超液态碘油0.5毫升/公斤和5-氟尿嘧啶20毫克/公斤。三个小组分别在进行手术之后14天左右,要利用免疫组织化学方法检测各个小组血管假性血友病因子,乙烯基酯树脂鳞片胶泥及碱性成纤维细胞生长因子的表达情况,及对血管假性血友病因子阳性血管内皮进行微血管密度计数。并结合其病理分布特征进行分析。结论:对照组,单纯化疗组及化疗栓塞组微血管密度值分别是:80.84加减24.24/83.05加减20.29及85.20加减23.91(血管个数/视野),乙烯基酯树脂鳞片胶泥阳性率分别为75%、75%和85%,b FG阳性率分别为30%、25%和30%,3各小组之间没有统计学差别且微血管密度与乙烯基酯树脂片之间具有良好的相关性。     

肝癌细胞上清液对成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白、环氧合酶-2和肝细胞生长因子的影响

目的观察小鼠肝癌细胞上清液对成纤维细胞增殖及表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响。方法制备小鼠成纤维细胞,并分别用普通培养液、小鼠肝癌细胞上清液的条件培养液及含转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的培养液培养成纤维细胞。采用MTT法检测3种培养液培养的成纤维细胞的增殖活力;RT-PCR和免疫组织化学法检测3种培养液培养的成纤维细胞中α-SMA、COX-2、HGF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达情况。结果条件培养液及含TGF-β1的培养液对成纤维细胞的增殖均有促进作用,但条件培养液的促进作用更强。普通培养液培养的成纤维细胞在第5天时α-SMA基因mRNA的转录水平最高,含TGF-β1的培养液及条件培养液培养的成纤维细胞在第3天时α-SMA基因mRNA的转录水平最高,且明显高于普通培养液在第5天时的转录水平,第3天以后转录水平稳定;普通培养液培养的成纤维细胞中无COX-2和HGF转录;条件培养液及含TGF-β1的培养液培养的成纤维细胞在第5天时COX-2和HGF基因mRNA的转录水平最高,第5天后无明显下降。不同培养液培养的成纤维细胞中α-SMA蛋白在胞浆、胞膜均有不同程度的表达;普通培养液培养的成纤维细胞中COX-2和HGF蛋白不表达,而含TGF-β1的培养液及条件培养液培养的成纤维细胞中COX-2和HGF蛋白为阳性表达,表达部位均为胞浆。结论小鼠肝癌细胞上清液能有效、稳定地将成纤维细胞激活为稳定表达COX-2和HGF的肌成纤维细胞,其有望成为在细胞移植中促进移植细胞存活及血管重建的细胞。     

表皮生长因子受体在肿瘤发生、发展中的研究进展

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的膜表面蛋白,普遍表达于人体的表皮细胞和基质细胞,并在人类多种肿瘤细胞中高表达。EGFR在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,对促进肿瘤细胞生长、细胞增殖、血管生成、肿瘤细胞侵袭、转移及细胞凋亡均有一定的调节作用。EGFR的表达水平可作为判断多种肿瘤预后的指标。本文主要对EGFR在肿瘤发生和发展中的研究进展作一综述。     

泛素结合酶E2C与肿瘤发生的研究进展

泛素结合酶E2C(UBE2C)属于E2酶家族中的成员,它在泛素-蛋白酶体途径中具有重要的生物学作用,泛素结合酶E2C是细胞周期进展和周期蛋白降解所必需的。泛素结合酶E2C在多种肿瘤组织中高度表达,与肿瘤的发生发展密切相关。本文就结合国内外最新报道,对泛素结合酶E2C与肿瘤相关性研究进展作一综述。     

透明质酸与癌症的研究进展

透明质(HA)是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-葡糖胺两种单糖重复组成的线性多糖。HA在进化上十分保守并在细胞外基质(ECM)、细胞表面甚至细胞内部大量表达。作为一个简单的多糖,HA具有多种生物学功能,HA与各种蛋白质或糖蛋白组织成ECM维持着组织的动态平衡。HA能与细胞表面受体结合,激活不同的信号转导通路,从而控制着肿瘤的发展和转移。从基质的生物学角度阐述了HA的特性,首先引入HA潜在的生物合成和生物降解原则,接着介绍了HA与多种不同蛋白和蛋白多糖的相互作用,然后阐述了HA在癌症中的作用,以期对HA潜在的生物学功能及作用机制有更深的了解。     

透明质酸与癌症的研究进展

透明质(HA)是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-葡糖胺两种单糖重复组成的线性多糖。HA在进化上十分保守并在细胞外基质(ECM)、细胞表面甚至细胞内部大量表达。作为一个简单的多糖,HA具有多种生物学功能,HA与各种蛋白质或糖蛋白组织成ECM维持着组织的动态平衡。HA能与细胞表面受体结合,激活不同的信号转导通路,从而控制着肿瘤的发展和转移。从基质的生物学角度阐述了HA的特性,首先引入HA潜在的生物合成和生物降解原则,接着介绍了HA与多种不同蛋白和蛋白多糖的相互作用,然后阐述了HA在癌症中的作用,以期对HA潜在的生物学功能及作用机制有更深的了解。     

防晒原料的体外生物学评测方法

总结了不同波长紫外线损伤皮肤的生物学效应,分析了防晒剂体外生物学评测的步骤、原则和影响因素,重点介绍了角质细胞、成纤维细胞、黑色素细胞、固有免疫细胞等细胞水平的防晒剂测试方法,以及离体皮肤、3D皮肤等三维组织的评测方法,提出利用多重功能防晒原料优化配方的思路,最后总结了不同体外方法的权重及选择原则。     

人血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化

目的　为了获得大量重组人血管内皮细胞生长因子（ Ｈｕｍａｎ Ｖａｓｃｕｌａｒ ＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＧｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ, ｈＶＥＧＦ）,以研究其在心血管和药学领域具有的潜在药用价值。方法　用ＰＣＲ方法扩增目的基因ｈＶＥＧＦ１６５,连接到 ｐＥＴ－３ａ载体上,并转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中,建立可高效表达的ｐＥＴ－３ａ／ｈＥＶＧＦ１６５重组质粒,经ＩＰＴＧ诱导表达, Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测表达产物的抗原性,通过 Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子层析和ＦＰＬＧ　Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２分子筛柱层析,进行初步纯化,用 ＭＴＴ法检测其生物学活性。结果 　ｐＥＴ－３ａ／ｈＥＶＧＦ表达产物经纯化后,其纯度可达到９０％以上,表达的ｒｈＥＶＧＦ１６５能 呈剂量依赖性地促进人静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的增殖。结论组建了天然形式ｈＥＶＧＦ１６５的大肠杆菌菌株,并摸索 出一套纯化工艺,为大规模生产重组ｈＥＶＧＦ１６５奠定了基础。     

细菌纤维素纳米纤维的细胞相容性评价

细菌纤维素是一种天然的纳米纤维材料,在组织工程材料领域具有广阔的应用前景。在前期研究的基础上,以细菌纤维素(BC)及细菌纤维素/聚丙烯酰胺双网络水凝胶(BC/PAM)复合材料为研究对象,大鼠成纤维细胞L929及血管内皮细胞为细胞模型,采用扫描电子显微镜观察细胞在材料上的黏附形态,并通过MTT法对细胞的增殖行为进行评价,以此考察BC及BC/PAM复合材料的细胞相容性,初步评价上述纳米纤维作为组织工程材料的应用可能性。结果表明,内皮细胞在纯BC材料上表现出良好的黏附形态和增殖行为,而成纤维细胞在纯BC及BC/PAM复合材料上的增殖趋势均低于空白对照组。     

人肝细胞生长因子杂交瘤细胞株的建立

目的　建立能分泌人肝细胞生长因子（ｈＨＧＦ）的杂交瘤细胞株。方法　从４～５月龄的人胎肝中分 离贮脂细胞,与次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（ＨＧＰＲＴ）缺陷型人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）融合成杂交瘤细胞,用 超滤膜对培养上清液初步分离,并用Ｈ３－ＴｄＲ掺入法测定各组分中ｈＨＧＦ的生物活性。结果　培养上清液中相对分 子质量 １０ ０００～ ３０ ０００的组分ｈＨＧＦ活性显著增高,对小鼠肝细胞增殖有明显的促进作用,并存在量效依赖关系,而 相对分子质量小于１０ ０００或大于 ３０ ０００的组分与对照相比 ｈＨＧＦ活性无明显改变。结论 ｈＨＧＦ杂交瘤细胞的建 立可作为获得ｈＨＧＦ的一条新途径。