Mg2+浓度对MEF2A基因PCR过程的影响

通过MEF2A基因PCR的实验过程，研究游离性Mg^2＋在不同浓度情况下对Taq酶活性及MgCl．作为一种盐对PCR效果的影响。使PCR反应体系其它成分浓度固定，配制含不同Mg^2＋浓度的缓冲液进行MEF2A基因的PCR过程，研究其对MEF2A基因PCR反应的影响。结果随着Mg^2＋浓度的增加，Taq酶活性逐渐增强，特异条带扩增明显，Mg^2＋终浓度在接近1．75mmoL／L时，扩增条带亮度最强，无非特异扩增条带。说明适当浓度的Mg^2＋可使Taq酶活性达到最强，Mg^2＋终浓度7mmoL／L时完全抑制了扩增。     

应用正交实验法优化DNA重复序列的PCR扩增体系

采用L9（3^4）正交实验法,对与人神经系统疾病相关的DNA重复序列PCR扩增体系中的模板DNA浓度、Taq酶浓度、引物浓度、dNTP浓度4种影响因素进行了优化筛选,发现引物浓度对扩增结果影响的显著性最大．在此基础上进行了引物浓度单因素实验,得到最优DNA重复序列PCR扩增体系在25μL反应体系中各组分的最适浓度分别为：模板3ng／μL、Taq酶0．75U、dNTP0．25mmol／L、引物0．31μmol／L通过优化前后反应体系的对比,扩增目的产物的量均有较大程度的提高．该优化体系的建立为进一步研究与人遗传病相关的DNA重复序列的结构特性及阐明该类遗传疾病的分子机理奠定了基础．     

油葵SSR反应体系的优化

采用改良CTAB法从油葵种仁中提取基因组DNA,用于SSR—PCR反应。对影响油葵SSR—PCR反应的几个重要因子进行了探讨,确定了最佳的反应体系：在总体积为25uL中,DNA为2.0ng／uL,Mg^2＋浓度为1.5mmol／L,dNTPs浓度为0．2mmol／L,Taq酶量为2．0U,引物浓度为0．25umol／L,退火温度为52-54℃,扩增的谱带清晰、多态性丰富。该SSR—PCR反应体系为油葵亲缘关系分析奠定了技术基础。     

单壁碳纳米管对长片段聚合酶链式反应（PCR）增效机理的初步研究

为了开发新型基因扩增技术,采用两步PCR（two-stepPCR）和rpsL保真度实验等方法,对单壁碳纳米管（single．wallcarbonnanotube,SWCNT）在长片段PCR反应中的增效机理进行研究．结果表明：在长片段PCR反应中,单壁碳纳米管最适工作质量浓度为0．8mg／mL;单壁碳纳米管可以在较短的延伸时间增加扩增产物产量,提高DNA聚合酶的反应效率;通过rpsL保真度实验显示,对照组PCR产物的错误率为5．32×10^-6,而实验组的错误率仅为2．39×10^-6．     

濒危植物白木香基因组DNA提取方法的研究

研究了濒危植物白木香基因组DNA的提取方法。结果表明，采用2％CTAB提取缓冲液（2％CTAB；2．5MNaCl；1％PVP-40；2％β-巯基乙醇（用前加入）；100mg／mL蛋白酶K；100mM Tris-HCl，pH8．0；20mM EDTA，pH8．0）提取的基因组DNA纯度高，OD260／0D28。比值在1．8～2．0之间，得率大约为172μg／每100mg干叶，所提取的DNA可以被限制性内切酶完全酶切，用于AFLP分析。     

固定化胰蛋白酶及其用于制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的实验研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂进行胰蛋白酶的固定化实验。实验条件：壳聚糖0．2g，交联剂浓度9％，交联温度30℃，交联时间2h，加酶量0．8mg，pH值8．0，固定化时间1h，固定化温度4℃。实验结果表明：固定化胰蛋白酶的最适温度为55℃，比溶液酶提高了15℃，活力回收率为50．8％。此外进行了利用固定化胰蛋白酶制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的实验，测定了其持钙能力，发现CPPs浓度为0．5g／L和0．2g／L时能完全阻止磷酸钙沉淀生成，浓度为0．1g／L时能使磷酸钙沉淀生成推迟20min，浓度为0．06g／L和0．04g／L时能使磷酸钙沉淀生成推迟10min。     

高含量大豆磷脂酰胆碱的提纯工艺研究

研究了以浓缩大豆磷脂为原料，采用丙酮和乙醇作溶剂，经丙酮脱油、真空干燥、乙醇抽提、减压蒸馏浓缩制备高含量磷脂酰胆碱(PC)的提纯工艺。丙酮和乙醇可回收，反复使用。在丙酮用量200mL、萃取时间15min、萃取温度40℃的最佳脱油工艺条件下得到了丙酮不溶物含量为97．6％的中间产物——粉末磷脂。乙醇提取试验选用L16 4^5。正交表进行，考察了乙醇浓度、固液比、温度、时间、抽提次数对PC含量的影响。结果表明：影响卵磷脂含量的主要因素是温度和乙醇浓度，其最佳条件为固液比1：20、乙醇浓度95％、抽提时间30min、温度35℃、抽提次数2次，PC含量富集到45．1％，提取率可达到62．0％。     

蓝绿藻基因组DNA提取方法的比较研究

分子生物学技术已广泛渗入微藻研究的各个领域,其中DNA的抽提和保存技术尤为重要．作者介绍了商业试剂盒、CTAB和Wizard3种具有代表性的DNA抽提方法,将其应用于绿色微囊藻和铜绿色微囊藻基因组DNA的抽提中,并对这3种方法的抽提有效性、纯度、数量、DNA完整性和PCR扩增能力进行了比较．结果显示：尽管CTAB和Wizard方法提取DNA质量和纯度较高,适合PCR扩增、克隆和酶切反应,但改进的CTAB法是最有效、最经济和最方便的DNA抽提方法．另一方面,我们发现用乙醇固定微囊藻细胞是比较好的策略,通过优化固定时间、固定剂浓度、固定温度可得到高质量的核苷酸用于进一步的分子生物学研究．     

离子交换树脂吸附古龙酸的工艺

应用自行合成的阴离子树脂D02直接吸附发酵液中的2-酮基-L-古龙酸，并研究了其吸附的静态与动态过程．利用Langmuir和Freundlich吸附等温线方程对吸附等温线数据进行拟合，发现2种模型相关性都很好．测定了不同流速、温度、浓度以及pH条件下古龙酸在合成树脂柱中的穿透曲线，当上柱液pH为1．5、质量浓度为10g／L、吸附温度为309K、流速为0．35mL／min时，每g湿树脂的动态附容量为133mg．同时测定了不同洗脱剂、洗脱流速条件下的洗脱曲线．每g湿树脂的动态吸附容量达到了133mg，当温度为283K、洗脱剂为10％H2SO4 CH3OH、流速为0．2mL／min时，洗脱收率可达65．3％．     

利用茶渣制备茶黄素工艺的研究

以茶渣为原料进行化学氧化制备茶黄素的工艺研究．着重研究氧化剂K3Fe（CN）6／NaHC03、FeCl3、Fe2（SO4）3、Fe（NO3）3的氧化效果．结果表明,茶渣浸提液在以上4种氧化剂作用下均可氧化形成茶黄素,而碱性氧化剂K3Fe（CN）6／NaHCO3的氧化效果最好,当质量浓度为40mg／mL、添加量为3％、20℃下反应20min时,茶黄素生成量最高为0．23％．     

从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp．48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260／A280为1.7，DNA产量为0.11mg／g湿菌体。达到下部实验要求。     

双剂抽提法提高FCC柴油氧化安定性

考察了几种抽提剂对催化裂化柴油的精制效果，结果表明，选用糠醛加金属离子为第一络合萃取剂，95％乙醇为第二萃取剂的双溶剂抽提法效果最好，催速安定性沉渣量由114．56mg/100mL减少至0．43mg/100mL，达到了优级柴油的标准要求，同时考察了抽提时间，剂油比，抽提温度等实验条件对催化裂化柴油精制放果的影响，实验表明，抽提时间3min，剂油比1：1，抽提温度30℃，效果最佳，精制后的柴油，色号由5．5下降为1．0，碘值由25．36g(I)/100g下降为20．04g(I)/100g，实际胶质由91．6mg/100mL下降为5．6mg/100mL，总硫脱除率为70．7％，总氮脱除率为95．9％，十六烷值也由精制前的37．3升至精制后的50．0，精制后的催柴，氧化安定性到了显著提高。     

酚类化合物对催化柴油氧化安定性的影响

对催化裂化柴油进行碱-醇抽提,抽提出催化柴油中的酚类化合物。测定抽提前后催化柴油的氧化安定性总不溶物的质量浓度由3.571mg/100mL降至1.257mg/100mL。结果表明,酚类化合物对柴油的氧化安定性有较大的影响。考察酚的类型以及酚的质量分数对催化柴油安定性的影响表明,在酚羟基的邻位上有烷基侧链的酚对柴油有抗氧化作用,而间位上有烷基侧链的酚抗氧不明显。随酚类化合物质量分数的增加,氧化安定性总不溶物的质量浓度先下降后升高,酚类化合物的质量分数在175μg/g时催化柴油安定性最好,同一结构的酚在催化柴油中既可以发生和烃类过氧化自由基结合生成稳定的化合物,也可以发生自身的缩合反应。     

Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件

脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilisLFS-8611合成的β-D-半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力，脆壁克鲁维酵母(K，fragilis)LFS-8611细胞生长和β-D-半乳糖苷酶的合成同步，该茵株生长和产酶的最适碳源为半乳糖，乳糖次之；最适氮源为蛋白胨F403；最适培养条件为：发酵培养基的初始PH值为7，0，摇床的转速为200r／min，培养基中碳源和氮源质量浓度对茵体生物量和β-D-半乳糖苷酶活力有重要影响，以12mg／mL乳糖为碳源，16mg／mL蛋白胨(F403)为氮源，在最适培养条件下培养32h后，茵体生物量和β-D-半乳糖苷酶活力分别为7，56g／L和18，83U／mL。     

活性Al2O3在高氟区地下水水质处理中的应用

采用活性Al2O3对高氟区地下水进行降氟处理，研究了活性氧化铝的除氟机理、最佳投放量及影响因素．试验结果表明，300mL氟化物质量浓度为1．75mg／L的原水样，投加6g活性氧化铝时，氟化物质量浓度降到1．0mg／L以下，且其它各项水质指标也均达到饮用水标准．活性氧化铝在酸性条件下，温度低于26℃，反应20min时除氟效果最佳．处理后的活性氧化铝可利用明矾、盐酸、硫酸铝作为再生试剂进行再生处理．     

离子交换纤维纯化银杏叶黄酮影响因素的正交法研究

采用正交法考察了各因素对浸取纯化黄酮工艺的影响,确立了离子交换纤维纯化黄酮的最佳工艺．获得浸取银杏叶黄酮的最佳条件：以pH值为8的70％的乙醇溶液,在75℃浸提3．5h;强碱阴离子交换纤维吸附黄酮的最佳条件：上柱药液的pH=4,药液流速0．38mL／min,药液质量浓度0．5289mg／mL,固液比1：200;吸附在强碱阴离子交换纤维上的黄酮动态解吸的最佳条件：HCL浓度2mol／L,流速0．5mL／min,解吸剂是体积分数为60％的乙醇,体积60mL．实验结果表明用强碱性阴离子交换纤维提纯黄酮方法可行．     

茶多酚对木瓜蛋白酶的回收及其特性的影响

研究了茶多酚对木瓜蛋白酶特性的影响.采用不同茶多酚浓度、作用温度、pH、缓冲液类型及浓度使2者络合、沉淀及回收,并研究其对络合效果的影响.结果表明:茶多酚与木瓜蛋白酶具有起混活性;最佳络合条件为:茶多酚浓度0.8%,作用温度0~4℃,作用时间90 min,pH4.5,缓冲液为0.1 mol/L的Na2HPO4-柠檬酸,此时获得最大的木瓜蛋白酶活性回收率(92.3%);木瓜蛋白酶与茶多酚络合前后,其最适反应温度及最适pH无明显改变,分别为65℃和7.0左右,最适pH范围有所变窄,但热稳定性显著提高,25℃时的半衰期由原来的4 d延长到超过14 d,0℃贮藏30 d后,残存酶活由原来的49.64%变为84.86%;Lineweaver-Burk图表明,络合后的菠萝蛋白酶Km值由3.07 mg/mL变为5.71 mg/mL.     

恒顺香醋乙酸乙酯萃取物DPPH自由基清除活性的研究

研究了恒顺香醋乙酸乙酯萃取物对DPPH自由基的清除活性．结果表明，清除活性较高的部分为乙酸乙酯酚性和酸性萃取物，半清除率分别为0．49mg／mL、1．39mg／mL．在乙酸乙酯酸性萃取物中以丙酮溶解物的自由基清除活性最高，半清除率为0．71mg／mL．各活性部位对DPPH自由基的清除率与剂量相关．     

茶多酚与DNA相互作用的初步探讨

利用荧光探针溴化乙锭 (EB)研究了茶多酚与DNA相互作用时其荧光光谱的变化。实验表明 ,在实验质量浓度范围内 ,茶多酚对EB -DNA体系的荧光强度的抑制率几乎成线性关系 ,随它们质量浓度的增加 ,抑制率也升高 ,其半抑制质量浓度为0 5mg/mL ;茶多酚的荧光抑制率随质量浓度的变化不存在饱和性 ,且抑制率可达 95 %以上。并对茶多酚与DNA分子相互作用的机理作了初步探讨。     

土壤中产碱性蛋白酶细菌的筛选及产酶条件优化

为筛选碱性蛋白酶的高产菌株，利用酪蛋白水解圈作为筛选模型，从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产碱性蛋白酶能力较高的细菌B1．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为质量浓度60g／L葡萄糖，最佳氮源为质量浓度40g／L NaNO3，最适初始pH值为9．0，最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基，最适接种量为质量浓度200g／L，且培养基中添加质量浓度为0．5g／L的K^＋有利于菌株B1产碱性蛋白酶．该方法简便、直观，很适合大量、快速筛选．