白藜芦醇抑制脊髓损伤兔的NLRP3炎症小体活化

目的：研究白藜芦醇抑制NLRP3炎症小体活化保护兔脊髓损伤的机制。方法：将50只雄性日本大耳兔随机分成5组：空白对照组（CON组）、脊髓损伤模型组（SCI组）、白藜芦醇低剂量组（RSV(L)组）、白藜芦醇高剂量组（RSV(H)组），甲基强的松龙组（MP组），每组10只。除CON组外的其他4组均制备脊髓损伤模型。每日静脉给药，CON组和SCI组给予等量生理盐水，连续14 d。Tarlov法进行兔神经行为学评分，发色底物法测定脊髓组织MDA含量及SOD和GSH-Px活力，Western blot测定脊髓神经组织NLRP3、Caspase1 p20，IL-1β，Sirt1，NF-κB p65的蛋白表达，HE染色观察脊髓组织病理变化。结果：白藜芦醇增加脊髓损伤兔行为学评分，促进损伤组织的修复，降低脊髓组织MDA含量，增加SOD和GSH-Px活力，下调脊髓组织NF-κB p65的表达，上调Sirt1的表达，抑制炎症小体NLRP3的表达（脊髓组织NLRP3、Caspase1 p20、IL-1β的表达均降低）。结论：白藜芦醇可促进脊髓损伤兔恢复，其作用机制可能通过激活Sirt1、调节NF-κB通路和体内抗氧化水平，进一步抑制NLRP3炎症小体的活化来发挥作用。     

甘草次酸减轻放射性炎症反应的作用机制研究

目的: 探讨甘草次酸（glycyrrhetinic acid, GA）减轻放射性炎症的作用机制。方法: 以4Gy X线照射小鼠巨噬细胞RAW264.7为辐射诱导炎症的细胞模型,采用ELISA法检测细胞上清液中的促炎症因子水平,RT-PCR法检测促炎症因子的mRNA表达水平,cell-based ELISA法检测细胞内磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen - activated protein kinase, p38 MAPK）蛋白表达,凝胶电泳迁移实验（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）检测活化蛋白-1（AP-1）的DNA结合活性,荧光酶标仪检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）产生,细胞色素C还原法检测细胞内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH）氧化酶的活性。结果: 甘草次酸通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内促炎症因子IL-6、IL-1β的mRNA表达而降低其分泌。甘草次酸抑制p38MAPK磷酸化及下游转录因子AP-1的DNA结合活性。并通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内NADPH氧化酶活性而减少ROS的产生。结论: 甘草次酸可能通过抑制NADPH氧化酶/ROS/p38MAPK信号通路而抑制电离辐射诱导的炎症反应。     

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的：基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）与橄榄油混合液背部皮下注射的方法，复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日，灌胃给予疏肝健脾方，每天1次，连续12周；HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度，透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况；RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果：病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊，肝细胞索排列紊乱，胶原沉积增加，焦亡小体数量明显增加，肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比，疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度，抑制细胞焦亡，显著下调α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。 结论：疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴，减少细胞焦亡，抑制肝星状细胞活化有关。     

米诺环素抑制炎症小体介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病小鼠的认知能力研究

目的: 研究米诺环素(minocycline, Mino)抑制炎症小体介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病认知能力的作用机制。方法: 脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠神经细胞株PC12构建神经细胞焦亡损伤模型,将细胞分为对照组、LPS组、LPS+Mino组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测炎症小体关键蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3, NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD, ASC)、Caspase-1及pro-Caspase-1的水平以及焦亡执行蛋白Gasdermin-D(GSDMD)、p30-GSDMD的水平,酶联免疫吸附法检测培养基中白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。APP-PS1双转基因小鼠10只,随机分为对照组和实验组,实验组采用50 μg的米诺环素灌胃给药,分别在给药前和给药后3周采用Morris水迷宫实验检测小鼠的认知记忆能力,处死小鼠后取海马CA3区检测组织中NLRP3、ASC、Caspase-1及pro-Caspase-1的蛋白表达,以及炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α、焦亡执行蛋白GSDMD、p30-GSDMD的水平。结果: 米诺环素可以抑制LPS诱导的细胞凋亡,LPS+Mino组细胞活力显著高于LPS组,而细胞凋亡率显著低于LPS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而LPS+Mino组中炎症小体关键蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1的表达低于LPS组,同时焦亡执行蛋白p30-GSDMD低于LPS组,GSDMD高于LPS组,培养基中IL-1β、IL-18、TNF-α的水平低于LPS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。动物实验中,米诺环素可以显著改善小鼠的认知能力;Morris水迷宫实验中,小鼠潜伏期缩短,相比对照组具有统计学意义(P<0.05)。同时小鼠穿越平台次数明显增多,相比对照组具有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠炎症小体关键蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1的表达低于对照组,同时焦亡执行蛋白p30-GSDMD低于对照组,GSDMD高于对照组,炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α的水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: 米诺环素可以通过抑制炎症小体活化,抑制神经细胞焦亡的发生,同时改善阿尔茨海默病小鼠的认知能力。     

白藜芦醇调控miR-409-3p/FKBP14抑制胃癌细胞BGC823恶性进程

目的：探究白藜芦醇（resveratrol, RES）调控miR-409-3p/FKBP14对胃癌（gastric cancer, GC）细胞恶性生物学进程的影响。方法：CCK-8实验研究RES对BGC823细胞活性的影响；qRT-PCR检测RES对miR-409-3p表达的调控；EdU实验研究RES对BGC823细胞增殖的影响；Transwell实验研究RES对BGC823细胞迁移和侵袭的影响；双荧光素酶报告基因和Western blot实验检测miR-409-3p对FKBP14表达的调控。结果：RES（>200 μmol/L）能够显著抑制BGC823细胞活性。RES通过上调miR-409-3p抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。FKBP14是miR-409-3p的靶基因，RES能够通过上调miR-409-3p抑制胃癌细胞中FKBP14的表达。过表达FKBP14后减弱RES的抑癌作用。 结论：RES可通过调控miR-409-3p/FKBP14信号通路在胃癌中发挥肿瘤抑制作用，RES有应用于临床胃癌治疗的潜力。     

天麻素抑制H2O2诱导的PC12细胞铁死亡

目的：研究天麻素对过氧化氢（H2O2）损伤的PC12细胞的保护作用及机制。方法：建立H2O2损伤PC12细胞神经损伤模型。MTT法检测细胞活力并确定H2O2最佳造模浓度,筛选和确定天麻素最佳处理浓度。试剂盒检测丙二醛（MDA）、总谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）水平和活力变化;流式细胞仪检测细胞脂质活性氧（ROS）水平;透射电子显微镜观察PC12细胞形态变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测p53、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白表达变化。结果：MTT法实验结果显示,50 μmol/L H2O2处理PC12细胞48 h,细胞生长抑制率接近50%;而天麻素（1、5、25 μmol/L）预处理4 h可提高H2O2损伤细胞的存活率,且其作用呈浓度依赖性。MDA、GSH、SOD检测结果表明天麻素降低H2O2处理后的MDA水平,并提高SOD和GSH活力。流式细胞仪检测发现,H2O2损伤后细胞内ROS的含量升高,而天麻素预处理后有效降低H2O2损伤的细胞内ROS的含量。透射电子显微镜观察结果显示,与正常组相比,50 μmol/L H2O2处理后PC12细胞的线粒体脊变厚,线粒体体积变小;天麻素预保护处理后,PC12细胞的线粒体形态趋于正常状态。Western blot结果表明,天麻素预保护后可升高H2O2损伤后GPX4蛋白表达水平,并降低p53蛋白表达水平。 结论：H2O2可通过增加PC12细胞内氧化应激水平引起铁死亡;天麻素预保护后可上调细胞内GPX4蛋白表达和下调p53蛋白表达,从而减少细胞氧化应激产生,抑制细胞铁死亡发生而发挥保护PC12细胞的作用。     

白藜芦醇通过上调miR-26a改善高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤

目的:研究白藜芦醇（RES）对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19损伤的保护机制。方法:高葡萄糖（HG）刺激ARPE-19细胞诱导建立损伤模型。分别采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）实验检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率、DCFH-DA染色流式细胞仪检测活性氧（ROS）生成和定量即时聚合酶链锁反应（RT-qPCR）技术检测miR-26a表达水平。Western blot方法分析相关蛋白表达水平。结果:HG刺激明显降低ARPE-19细胞活力，凋亡率升高及氧化应激损伤加重。RES改善HG诱导的ARPE-19细胞损伤；上调HG诱导的ARPE-19细胞中miR-26a表达，miR-26a沉默部分逆转了RES对HG诱导的ARPE-19细胞损伤的保护效应。另外，RES还可通过上调miR-26a表达降低细胞外调节蛋白激酶（ERK）和Wnt/β-catenin信号通路活化。结论:RES通过上调miR-26a表达，伴随抑制ERK和Wnt/β-catenin信号传导，改善HG诱导的ARPE-19细胞损伤。RES可能成为治疗糖尿病视网膜病变的药物。     

瑞舒伐他汀通过UCP2-SIRT3信号调控脑I/R对神经元的损伤

目的：研究瑞舒伐他汀对脑缺血-再灌注损伤的保护作用及作用机制。方法：（1）建立脑梗死及OGD/R细胞模型,检测不同浓度瑞舒伐他汀对细胞增殖及细胞凋亡的影响;（2）用不同浓度瑞舒伐他汀处理OGD/R细胞模型,观察瑞舒伐他汀对细胞形态和细胞中UCP2/SIRT3表达和定位的影响;（3）构建UCP2沉默的细胞系,观察细胞线粒体形态和细胞中TOMM20及SIRT3分子表达与定位,研究瑞舒伐他汀在OGD/R细胞模型中发挥保护作用的通道和机制;（4）检测线粒体膜电位,PCR检测线粒体生成基因PGC1、Drp1和Opa1表达,研究瑞舒伐他汀对线粒体的保护作用。结果：（1）不同浓度瑞舒伐他汀均可以明显减低OGD/R细胞凋亡,提高细胞存活率;（2）瑞舒伐他汀通过影响细胞UCP2和SIRT3表达,进而发挥细胞保护作用,使细胞免受OGD/R损伤;（3）瑞舒伐他汀通过调控UCP2影响TOMM20表达,增加线粒体跨膜转运和能量代谢,增强线粒体功能,提高细胞存活;（4）瑞舒伐他汀阻止OGD/R细胞膜电位下降,保护线粒体,改善细胞状态,减少细胞凋亡。 结论：瑞舒伐他汀通过调控UCP2/SIRT通路来抑制OGD/R细胞线粒体损伤,从而发挥神经元保护作用。     

二甲双胍抑制高糖培养大鼠肾小球系膜细胞内P38MAPK信号通路与氧化应激

目的：观察高浓度葡萄糖培养大鼠肾小球系膜细胞内p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase，p38MAPK)信号通路与氧化应激的关系及二甲双胍的调控作用。方法：大鼠肾小球系膜细胞(HBZY1)在完全培养基中传代培养，并分成以下5组:（1）正常对照组(NC组)；（2）高浓度葡萄糖培养组(HG组)；（3）二甲双胍治疗组(MET组)；（4）SB203580治疗组(SB组)；（5）N-乙酰半胱氨酸治疗组(NAC)组。流式细胞术检测大鼠肾小球系膜细胞内活性氧(ROS)水平。用比色法和ELISA法分别检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量。实时定量PCR法检测肾小球系膜细胞内P22phox mRNA表达。Western blot法检测肾小球系膜细胞内P22phox蛋白和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达。结果:与正常对照组相比，高浓度葡萄糖培养组细胞上清液中SOD活性降低，相反细胞上清液中MDA含量、肾小球系膜细胞内ROS水平、P22phox mRNA和蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白表达均上升(P<0.05)。当二甲双胍干预后，细胞上清液中SOD活性上升,同时细胞上清液中MDA含量、肾小球系膜细胞内ROS水平、P22phox mRNA和蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白表达均下降(P<0.05)。相似的结果出现在SB203580或N-乙酰半胱氨酸干预后(P<0.05)。 结论:二甲双胍可以减轻高浓度葡萄糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和磷酸化p38MAPK蛋白表达，进而起到了保护肾脏的作用。     

白藜芦醇通过miR-937/FOXQ1信号通路抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖

目的:研究白藜芦醇（RES）对视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:CCK-8方法和流式细胞术分析细胞增殖和凋亡情况；TargetScan软件预测miR-937与叉头框蛋白Q1（FOXQ1）之间的关系，并采用双荧光素酶报告基因系统检测它们之间的相互作用；miR-937和FOXQ1 mRNA和蛋白表达水平分别采用逆转录-定量聚合酶链反应法（RT-qPCR）和Western blot法检测。结果:RES抑制Y79细胞增殖，诱导其凋亡；视网膜母细胞瘤细胞系中miR-937表达水平较正常组织明显降低，而RES可明显诱导Y79细胞中miR-937表达；FOXQ1可以与miR-937直接相互作用，且其表达水平与miR-937呈负相关性；视网膜母细胞瘤细胞系中FOXQ1表达水平较正常细胞明显增高，而RES可明显抑制Y79细胞中FOXQ1表达；与RES单纯处理组相比，RES+miR-937 inhibitor组明显降低miR-937表达，促使了FOXQ1表达，诱导Y79细胞增殖，并降低其凋亡。结论:RES通过上调miR-937水平降低FOXQ1表达，进而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖、诱导其凋亡，提示miR-937/FOXQ1信号通路可能是视网膜母细胞瘤治疗的新靶标。     

芪藤消浊颗粒介导miR-339-5p对慢性肾小球肾炎大鼠炎症指标的影响

目的：探讨芪藤消浊颗粒通过miR-339-5p对慢性肾小球肾炎（chronic glomerulonephritis, CGN）大鼠炎症指标的影响。方法：大鼠尾静脉注射阿霉素制备CGN模型，用芪藤消浊颗粒（21.6、10.8、5.4 g/kg）连续灌胃30 d，通过HE染色和电镜观察CGN大鼠肾脏组织中的病理变化情况，qRT-PCR、ELISA、Western blot检测大鼠血清及肾脏组织中的IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的含量，Western blot检测miR-339-5p、Syk、p-Syk蛋白相对表达量，qRT-PCR检测miR-339-5p mRNA及Syk mRNA的相对表达量。结果：模型组大鼠出现基底膜增厚，肾小球萎缩等病变，与正常组相比，模型组大鼠的miR-339-5p和IL-10表达明显下调，IL-1β、IL-6、TNF-α、Syk的表达显著上调，芪藤消浊颗粒组可显著降低肾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、Syk的蛋白及mRNA的表达水平。 结论：芪藤消浊颗粒治疗CGN大鼠的炎症症状可能是通过miR-339-5p下调炎症因子的表达水平。     

薯蓣皂苷抑制NF-κB信号通路改善尿酸诱导的肾小管上皮细胞炎性损伤的机制研究

目的：利用尿酸诱导的小鼠肾小管上皮细胞（mouse tubular epithelial cells, mTECs）观察薯蓣皂苷及NF-κB P65抑制剂BAY11-7082对于尿酸导致的细胞炎症损伤的影响。方法：1.2 mol/L尿酸诱导mTECs细胞后，分别给予25 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L薯蓣皂苷或者10 μmol/LBAY11-7082干预，利用Western Blot、免疫荧光染色和real-time PCR检测细胞中IκB-α、NF-κB P65、PP65、NLRP3、IL-1β、β-actin的表达。结果：Western Blot、免疫荧光染色和real-time PCR结果显示，薯蓣皂苷及BAY11-7082可下调尿酸诱导mTECs细胞中PP65/P65比值、NLRP3及IL-1β的表达（P<0.05），同时薯蓣皂苷上调IκB-α的表达（P<0.05）。 结论：薯蓣皂苷可通过抑制NF-κB信号通路减轻尿酸诱导的细胞炎性损伤。     

参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的疗效及对NLRP3炎症小体的影响

目的:探讨参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）的临床疗效及对NOD样受体-3(Nod-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体的影响。方法:入选UC患者100例，随机分为对照组和观察组，各50例。对照组给予美沙拉嗪1.0 g qid，观察组给予美沙拉嗪1.0 g qid+参苓白术散6.0 g tid。疗程8周。比较两组患者的临床疗效；检测肠黏膜中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase）-1 mRNA表达水平；检测外周血血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的情况。 结果:治疗后，观察组的临床症状改善总有效率（86.00%）显著优于对照组（73.00%），差异有统计学意义（P<0.05）。观察组肠黏膜NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达(4.08±0.85、3.75±0.91、3.86±0.93)较对照组(5.26±0.96、4.66±0.95、4.97±0.99)明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血清中CRP、ESR、IL-1β、IL-18［（6.74±2.45） mg/L、（11.63±4.58） mm/h、（44.27±8.58） pg/mL、（263.37±60.34） pg/mL］较对照组［（15.32±5.68） mg/L、（18.45±5.12） mm/h、（51.11±9.26） pg/mL、（371.18±61.25） pg/mL］明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:参苓白术散联合美沙拉嗪治疗UC具有良好的临床疗效，其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的形成，进而抑制炎症反应有关。     

天麻钩藤饮抑制铁死亡-脂质代谢保护鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤

目的：研究天麻钩藤饮（TGY）对鱼藤酮（Rot）诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的影响及可能的机制。方法：采用Rot建立和培养PC12细胞神经损伤模型并利用MTT比色法测定细胞存活率,确定Rot的最佳造模浓度以及TGY的有效干预浓度。流式细胞仪检测细胞的脂质活性氧（ROS）水平并用荧光倒置显微镜观察细胞荧光强度的变化;生化试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽（GSH）的水平和活力变化以及丙二醛（MDA）含量的变化。透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化,蛋白免疫印迹法检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）,长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）,溶血卵磷脂酰基转移酶3（LPCAT3）蛋白表达。结果：0.6 μmol/L Rot处理细胞24 h后,细胞存活率接近50%（56.7%±9.9%）,TGY预处理12 h后可抑制Rot的损伤程度。同时,减少乳酸脱氢酶（LDH）的漏出率,并呈现一定的量效关系。Rot处理后的细胞内脂质ROS含量升高,而给予TGY预处理后有效降低Rot损伤的细胞内脂质ROS的含量,降低Rot处理后的MDA水平,并提高SOD活力和GSH水平。通过透射电镜观察到与正常组相比,0.6 μmol/L Rot处理后细胞的线粒体皱缩,TGY预保护处理后,PC12细胞的线粒体形态有一定程度的改善。Western blot的结果呈现出TGY预处理后可以在一定程度提高Rot损伤后GPX4的表达,下降ACSL4、LPCAT3的表达。 结论：TGY可以上调GPX4蛋白的表达,下调ACSL4、LPCAT3蛋白的表达,抑制不饱和脂肪酸的氧化,降低脂质过氧化水平和ROS的含量,从而改善神经损伤。     

樟芝多糖通过降低NLRP3 Caspase1炎性小体表达改善帕金森小鼠神经行为学的机制研究

目的:研究樟芝多糖通过降低NLRP3-Caspase1炎性小体表达改善6-OHDA构建的帕金森小鼠模型的行为学机制。方法:利用6-OHDA脑内注射构建帕金森小鼠模型，通过酪氨酸羟化酶（TH）免疫组化染色和行为学判定小鼠模型的构建成功。利用樟芝多糖进行干预，分别在干预前、干预后的第1、3、7天4个时间点进行神经行为学实验，分别采用转棒实验、爬杆实验检测小鼠自主行为能力以及协调能力，4个时间点取小鼠尾静脉外周血采用ELISA法检测外周血中Caspase1和IL-1β的表达，樟芝多糖干预第7天时待进行完行为学实验后小鼠断颈处死，取小鼠脑组织-纹状体，Western blot法检测纹状体中Caspase1、proCaspase1、NLRP3的表达，高效液相色谱检测纹状体中单胺类神经递质的表达，RT-QPCR检测Caspase1、NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-6的mRNA表达。NISSl染色检测小鼠脑组织神经细胞凋亡情况。 结果:6-OHDA脑内注射可以造成小鼠帕金森样病变，且TH蛋白表达显著下调，樟芝多糖干预后小鼠的行为学得到显著改善（P<0.05），纹状体中Caspase1、proCaspase1、NLRP3的表达显著下调，与模型小鼠相比具有统计学差异（P<0.05），且相关炎症因子Caspase1、NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-6的mRNA表达下调（P<0.05），纹状体中单胺类神经递质表达上升（P<0.05）。结论:樟芝多糖可以通过下调NLRP3-Caspase1炎性小体表达来改善6-OHDA构建的帕金森小鼠模型行为改善，这可能是樟芝多糖治疗帕金森的机制之一。     

川芎嗪通过14-3-3γ/Bcl-2减轻阿霉素引起的心肌毒性

目的：探讨川芎嗪（TMP）对阿霉素（Dox）心肌毒性的影响以及14-3-3γ/Bcl-2蛋白表达在其中的作用。方法：原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为Control组、Dox组、TMP+Dox组、TMP+Dox+pAD/14-3-3γ-shRNA组。48 h后,MST法检测细胞存活率,比色法检测培养液乳酸脱氢酶（LDH）活性、细胞半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量;Western blot法检测细胞14-3-3γ与线粒体Bcl-2表达;流式细胞法检测细胞ROS生成、线粒体膜电位及线粒体渗透压转换孔（mPTP）开放;TUNEL法检测细胞凋亡。结果：Dox处理48 h后,心肌细胞存活率显著降低,培养液LDH活性升高;细胞SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量增加,ROS生成增加;线粒体膜电位减小,mPTP持续开放,细胞Caspase-3活性与凋亡增加;TMP预处理可显著上调细胞14-3-3γ及线粒体Bcl-2表达,且同步逆转上述改变;pAD/14-3-3γ-shRNA不仅下调细胞14-3-3γ,线粒体Bcl-2表达同步减少,TMP预处理相关保护作用也随之明显减弱。 结论：TMP预处理通过上调细胞14-3-3γ及线粒体Bcl-2表达,进而抑制氧化应激反应,维护线粒体功能,减少Dox心脏毒性诱导的细胞凋亡。     

RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响

目的:运用RNAi（RNA interference）抑制胃癌细胞株BGC-823中DNA甲基转移酶1（DNA methylation transferase 1,DNMT1）基因的表达,当DNMT1基因沉默后观察p16基因的表达情况。 方法:以DNMT1的mRNA核苷酸序列,构建siRNA质粒1、2、3和阴性对照siRNA质粒b,胃癌细胞培养后经脂质体转染。对DNMT1基因行Q-PCR检测其mRNA表达水平及Western blot检测其蛋白表达水平,确认其表达下调后筛选出最佳干扰质粒。以同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组、阴性对照组和空白对照组的p16基因的表达情况,以确认抑制DNMT1基因表达后对胃癌细胞p16基因的影响。结果:RNAi可有效抑制胃癌细胞株BGC-823中DNMT1基因的表达。对转染后的胃癌细胞DNMT1基因检测mRNA及蛋白表达情况,结果显示,转染siRNA2的胃癌细胞中DNMT1的表达明显低于其他转染组、阴性对照组及空白对照组（P＜0.05）,由此筛选出最佳干扰质粒siRNA2。用同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组（siRNA2）、阴性对照组和空白对照组的p16基因表达情况。结果显示,最佳干扰组的mRNA（1.6727±0.2242）及蛋白（0.9227±0.0337）表达水平均高于阴性对照组（1.0025±0.0877）、（0.5440±0.0229）和空白对照组（0.4729±0.0940）、（0.4767±0.0774）（P＜0.05）。结论:用RNAi可以抑制胃癌细胞DNMT1基因的表达从而使p16基因去甲基化,使p16基因恢复表达。     

鸢尾素通过NF-κB和JNK信号通路减轻屋尘螨诱导的气道上皮细胞炎症及凋亡的实验研究

目的：探索鸢尾素（irisin）对屋尘螨（HDM）诱导的人支气管上皮细胞（16HBE）的炎症和细胞凋亡的影响。方法：用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养人支气管上皮细胞（16HBE），待细胞长至85%时血清饥饿处理12 h，随后用不同浓度的HDM（0、400、800、1 200 U/mL）刺激细胞24 h。用活性氧（reactive oxygen species, ROS）试剂盒检测各组细胞ROS水平，qPCR法检测各组细胞白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。用20 nmol/L irisin预处理16HBE细胞2 h后接着用800 U/mL HDM处理24 h。活性氧试剂盒检测irisin对HDM诱导的细胞ROS产生的影响；qPCR法检测irisin对HDM诱导的炎症因子TNF-α及IL-6表达的影响；Western blot检测细胞内P65 NF-κB及JNK MAPK蛋白磷酸化水平，同时检测细胞内促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX及抗凋亡蛋白BCL-XL的水平。结果：与对照组相比，不同浓度HDM（400、800、1 200 U/mL）刺激16HBE细胞24 h后，细胞内ROS水平升高（P<0.05），TNF-α及IL-6表达水平也升高（P<0.05）。与单用HDM处理组相比，irisin预处理的16HBE细胞内ROS水平下降（P<0.05），同时细胞内炎症因子TNF-α及IL-6表达减少（P<0.05）；irisin预处理组抗凋亡蛋白BCL-XL表达增加（P<0.05），同时促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX的表达减少（P<0.05）；与对照组相比，HDM干预后细胞P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平增加（P<0.05），而irisin下调了P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平（P<0.05）。 结论：鸢尾素可有效改善HDM诱导的16HBE细胞的炎症和细胞凋亡，该保护作用可能与其抑制NF-κB和JNK MAPK信号通路有关，鸢尾素可能是治疗肺部炎症的潜在药物。     

地塞米松对人胎盘葡萄糖转运功能的作用及机制

目的: 探讨地塞米松对人胎盘葡萄糖转运功能的作用及机制。方法: 取本院治疗并分娩的早产孕妇160例,随机分为对照组和地塞米松组,各80例。随机选取两组各10例胎盘组织样品,采用免疫组织化学检测胎盘生乳素（human placental lactogen,HPL）蛋白。选取人绒毛膜癌细胞系JEG-3细胞株纳入机制研究,根据转染载体的不同分为4组,pcDNA3.1组：JEG-3细胞转染对照载体pcDNA3.1;pcDNA3.1-GRα组：JEG-3细胞转染GRα过表达载体pcDNA3.1-GRα;Control siRNA组：JEG-3细胞转染Control siRNA;GRα siRNA组：JEG-3细胞转染GRα siRNA。分别利用CCK-8法检测胎盘细胞增殖、TUNEL法检测细胞凋亡程度、检测线粒体膜电位、检测胎盘细胞葡萄糖摄取量、荧光分子探针测定胎盘细胞活性氧（reactive oxygen species, ROS）的含量及实时荧光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction）检测糖皮质激素受体α（glucocorticoid receptor-α,GRα）、葡萄糖转运蛋白（glucose transporter,GLUT）的相对表达量。结果: 对照组的HPL强阳性细胞多于地塞米松组。与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-GRα组的细胞增殖能力、线粒体膜电位水平、葡萄糖摄取量显著升高（P<0.05,P<0.01）;细胞凋亡、ROS含量明显降低（P<0.01）;GRα、GLUT1、GLUT3的相对表达量显著上调（P<0.01）。与Control siRNA组比较,GRα siRNA组细胞的增殖能力、线粒体膜电位水平、葡萄糖摄取量明显下降（P<0.05, P<0.01）;细胞凋亡、ROS含量明显升高（P<0.01）;GRα、GLUT1、GLUT3的相对表达量均显著下调（P<0.05）。 结论: 地塞米松能够抑制胎盘对葡萄糖的转运功能,并且极有可能通过ROS/AMPK路径实现这一调控。     

巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的: 研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制。方法: 用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预。RT-PCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88(MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平。结果: MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移。LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响。结论: MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移。