pEgr-IFNγ基因-放射治疗对荷瘤小鼠抑瘤效应的研究

探讨pEgr-IFNγ基因-放射治疗小鼠体内抗肿瘤作用的适宜照射剂量和质粒注入量。观察不同剂量X射线照射及瘤内不同量pEgr-IFNγ重组质粒注入,基因-放射治疗在接种B16黑色素瘤小鼠体内抑瘤效应的差异,并用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测各组小鼠外周血IFNγ含量。结果表明,质粒注入后接受20Gy X射线照射组照后3—27d,肿瘤生长速率明显低于2Gy和10Gy照射组(p<0.001),且小鼠平均生存时间明显延长(p<0.001)。质粒注入量为20μg或30μg的联合治疗组照后3—27d,肿瘤生长速率明显低于注入量为10μg的联合治疗组(p<0.05—0.001),且平均生存时间明显延长(p<0.01)。基因-放射联合治疗组受照射后第1天和第3天外周血IFNγ含量明显高于单纯基因治疗组均为(p<0.05)和对照组,分别为(p<0.01,p<0.05)。结果显示,pEgr-IFNγ基因-放射治疗小鼠体内抗肿瘤作用的适宜照射剂量为20Gy,质粒注入量为20μg;联合治疗组可能通过诱导瘤内IFNγ基因表达增强,使血液中的IFNγ浓度升高,进而增强机体免疫功能和抗肿瘤能力。     

自噬活性调节胶质瘤起始细胞辐射敏感性的体内实验研究

为探讨自噬调节对胶质瘤起始细胞移植瘤辐射敏感性的影响,建立裸小鼠皮下移植瘤模型,测量肿瘤体积大小,比较抑瘤率检测雷帕霉素对移植瘤的辐射增敏作用;建立裸小鼠颅内移植瘤模型,观察裸小鼠生存期,HE染色观察移植瘤的生长。取两种模型中各组肿瘤组织做Western blot,分析自噬相关蛋白LC3表达。结果显示,裸小鼠皮下移植瘤模型中,联合治疗组的肿瘤体积明显小于阴性对照组和单纯辐照组(P>0.05),抑瘤率明显增加(P>0.05);在裸小鼠颅内原位移植瘤模型中,联合治疗组的裸小鼠生存期较阴性对照组和单纯辐照组明显延长,HE染色中可见联合治疗组肿瘤生长局限,与周围正常脑组织界限清楚。Western blot结果显示,两种模型中,联合治疗组中的比值LC3II/LC3I显著增加。研究表明,自噬激动剂雷帕霉素通过激活胶质瘤起始细胞的自噬活性,增加胶质瘤的辐射敏感性。     

线粒体靶向抗氧化剂MitoQ的抗肿瘤效应

采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度MitoQ对肝癌HepG2细胞的毒性;凋亡诱导实验研究不同浓度MitoQ对HepG2细胞凋亡率的影响;裸鼠移植瘤模型研究MitoQ对肝癌HepG2荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果表明,MitoQ对肝癌HepG2细胞的抑制作用随着浓度而增加;给药组凋亡率显著高于对照组(p0.01);MitoQ在1、5、10mg/kg剂量给药10d后对小鼠的肿瘤生长均有抑制作用,与对照组相比,10mg/kg剂量组肿瘤体积(p0.01)和肿瘤质量(p0.05)均有显著性差异。结果提示,MitoQ在体内体外均具有抑制肝癌HepG2细胞生长的作用。     

小剂量辐射对荷瘤小鼠免疫功能的影响

研究了小剂量辐射对艾氏腹水癌小鼠免疫功能的影响。结果表明,荷瘤小鼠经10cGyγ射线照射后24h,脾细胞NK活性显著升高。经10cGy照后24h和5d,脾细胞对ConA的转化反应增强。经10cGy照后24h,30cGy照后24h和5d,外周血中肿瘤坏死因子含量明显增加。荷瘤鼠经5～50cGy的γ射线整体照射后,脾细胞对LPS的转化反应、胸腺细胞自发性~3H-TdR掺入、脾指数、肿瘤重量等指标均无明显变化。表明小剂量辐射对荷瘤小鼠的免疫功能具有一定的刺激作用,10cGy的γ射线整体照射对荷瘤小鼠免疫功能的刺激效应最明显。     

低剂量微波辐射减轻γ射线对小鼠造血系统的损伤

为探讨低剂量微波与γ射线复合照射对小鼠造血系统的影响,将雄性昆明小鼠随机分为对照组、微波照射组、γ射线照射组及微波与γ射线复合照射组.微波组与复合组小鼠先接受功率密度为120μW/cm2的微波照射,1h/d,持续14 d,第15天给予γ射线照射组和复合组5.0 Gy60Coγ射线一次性全身照射.于照射后3d、6d、9d、12d处死动物,取胸骨及脾脏,对各组病理形态变化进行定量检测和分级.结果显示,单独γ射线与复合照射均可导致骨髓组织经历典型的凋亡坏死、空虚、再生修复和恢复4个阶段的病理改变,但复合组的病变轻于电离照射组,恢复也更快.脾脏系数结果显示,照后9 d、12 d复合组脾脏系数显著高于电离照射组(p<0.05).脾脏病理显示,脾损伤病变过程与骨髓造血组织基本相似,复合组病变轻于电离照射组.本实验表明预先低剂量的微波辐射可减轻γ射线对小鼠造血系统的严重损伤.     

CGEONA对荷LA-795肺腺癌小鼠和正常小鼠放射敏感性的影响

为了寻找低毒有效的放射增敏剂,观察CGEONA(羧基-苯乙烯基锗倍半氧化物钠盐)对荷瘤小鼠和正常小鼠放射敏感性的影响.放射增敏实验用T-739小鼠,肿瘤模型LA-795肺腺癌,采用肿瘤生长延迟法评价效果;放射防护实验用昆明种小鼠,观察30d存活率和对造血系统的影响.结果表明,CGEONA药物浓度为1/10 LD50时平均放射增敏比为1.4.放射防护实验给药组与对照组相比,存活率以及造血系统指标无显著差异(p＞0.05).表明CGEONA是新型低毒有效放射增敏剂,对照射的正常动物无放射增敏作用,值得进一步研究.     

小剂量辐射对荷瘤小鼠免疫功能的影响

研究了小剂量辐射对艾氏腹水癌小鼠免疫功能的影响。结果表明,荷瘤小鼠经10cGyγ射线照射后24h,脾细胞NK活性显著升高。经10cGy照后24h和5d,脾细胞对ConA的转化反应增强。经10cGy照后24h,30cGy照后24h和5d,外周血中肿瘤坏死因子含量明显增加。荷瘤鼠经5～50cGy的γ射线整体照射后,脾细胞对LPS的转化反应、胸腺细胞自发性~3H-TdR掺入、脾指数、肿瘤重量等指标均无明显变化。表明小剂量辐射对荷瘤小鼠的     

白果清蛋白提取物对γ射线辐射损伤小鼠的保护作用研究

白果清蛋白提取物(Ginkgo albumin extract,GAE)是本实验室首次从白果中分离提取得到的具有较好 抗氧化及延缓衰老活性的水溶性蛋白提取物,本工作探讨了白果清蛋白提取物对8．5 Gy及3．2Gy的γ,射线辐 射损伤小鼠的保护作用。实验结果表明,8．5Gy的γ射线辐射小鼠后,其30d存活率呈显著性下降,辐射对 照组的存活率为0,GAE高剂量给药组为20％;外周血象在辐射后受到不同程度的破坏,与辐射对照组相比, GAE给药组的血象指标下降幅度较小,恢复较快,具有显著性的差异;GAE能显著增加中剂量的γ射线辐射 损伤小鼠血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性和DNA含量,显著性促进辐射小鼠体 内受损免疫机能的恢复。结果表明,GAE能通过增强辐射损伤小鼠的抗氧化能力、造血功能及体内免疫功能 来起到对辐射损伤小鼠的保护作用。     

草本组方对γ射线全身照射小鼠的保护作用

观察天然草本当归、白芍、肉苁蓉、槐米、黄芪等提取物的混合物（简称草本组方）对γ射线全身照射小鼠的防护及修复作用。将56只成年C57BL/6J小鼠随机分为4组：辐射空白组（Blank）、对照组（Hemo-1#，韩国Hemo Him产品）和两组不同配方给药组（Exp-2#、Exp-3#），每组雌雄性小鼠各7只。给药3 d后，小鼠全身60Co γ射线一次性照射4 Gy，照射后继续连续灌胃21 d，比较小鼠体重及外周血白细胞、红细胞、血小板、淋巴细胞计数等指标变化。结果显示：给药喂养的小鼠（Hemo-1#、Exp-2#、Exp-3#），照射后第1天白细胞和淋巴细胞计数较空白组小鼠下降幅度降低；照射后第7天，小鼠的白细胞、红细胞、血小板、淋巴细胞均缓慢恢复。这表明草本组方能促进照射后小鼠造血功能的修复，推测其保护作用机制与各提取物增强免疫和抗氧化功能有关。     

细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒对小鼠亚致死剂量辐射损伤的预防作用

为研究细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒(C60(OH)24-SLN-E)对亚致死剂量60Coγ射线照射致小鼠辐射损伤的防护作用,采用SPF级雄性ICR小鼠,连续7天腹腔注射细胞核靶向富勒醇硬脂质纳米粒,于第7天送往辐照中心接受60Coγ射线全身均匀照射,照射剂量为6 Gy,照射剂量率为0.42 Gy/min,观察照后小鼠一般情况、体重变化,测定照后14天小鼠外周血液学参数的变化。结果表明,细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒(C60(OH)24-SLN-E)能有效减轻亚致死剂量60Coγ射线所引起的小鼠体重、外周血白细胞的降低,还可以促进照射后小鼠骨髓红系造血的恢复,与照射对照组相比差异有统计学意义(p0.05)。说明细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒(C60(OH)24-SLN-E)对受亚致死剂量60Coγ射线照射的小鼠具有一定的保护作用。     

新增敏剂-甘氨双唑钠对体内肿瘤的放射增敏作用

采用4种不同肿瘤模型的荷瘤小鼠，观察了CMNa对受照小鼠肿瘤的作用。结果表明：与单纯照射组相比，CMNa能明显地减慢肿瘤的生长速度；增加肿瘤生长的延迟天数，4种肿瘤模型均得到相同的结果。绝大多数SER值在1．3以上。实验结果表明，CMNa对体内肿瘤亦有明显的放射增敏作用。然而在相似条件下，以CFU－GM为指标，在研究CMNa对受照正常小鼠对γ射线敏感的造血组织有否影响时，却未观察到CMNa对正常组织的放射增敏效应，与单纯照射组相比，CFU－GM无变化，SER＝1，其治疗增益指数（TGF）均在1．3以上。提示：CMNa将有希望成为临床肿瘤治疗有效的新型放疗增敏药。     

骨形成蛋白对小鼠造血型急性放射损伤治疗作用的研究

小鼠经^60Coγ射线6．5－7．5Gy照射后,分别于肌袋内植入纯化牛BMP,或腹腔内注入可溶性rhBMP-2m,或移植Pbk-hBMP-2/NIH3T3人腹腔内,观察动物的30d活存情况,并检测几种造血参数。结果表明,pbBMP（纯化牛骨形成蛋白）、hBMP-2m(重组骨形成蛋白－2多肽）Pbk-BMP-2/NIH3T3 cell line(PBKhBMP-2转基因细胞株）对小鼠6．5、7．0、7．5Gyγ射线照射后急性放射造血损伤有治疗作用：GM－CFU集落形成率、各项造备参数和30d活存率均较对照组有显著性差异（P＜0.01)。本工作结果提示,BMP对成年动物放射所致造血损伤具有治疗作用,其机理与促进已损伤的造血功能的修复作用有关。     

N-乙酰基-S-烯丙基-L-半胱氨酸的合成及其抗辐射活性

以L-半胱氨酸为原料,经取代和酰化两步反应合成目标产物N-乙酰基-S-烯丙基-L-半胱氨酸(N-acetyl-S-allyl-L-cysteine,NAc-SAC)。以~(137)Csγ射线照射至不同剂量的ICR小鼠作为研究对象,通过30 d存活率实验、血相和免疫系统实验、各项脏器指数以及外周血淋巴细胞彗星实验,研究目标化合物分别在200、400、600 mg/kg给药剂量下的抗辐射活性。ICR小鼠经伽马射线照射至致死剂量7.5 Gy后,其存活率由单纯照射对照组的41.6%,分别提高到NAc-SAC给药组的58.3%、50.0%和66.7%,平均存活天数明显延长。~(137)Csγ射线照射至亚致死剂量6.0 Gy后,NAc-SAC在不同程度上增加了受照小鼠的脾指数、脾结节数(CFU-S)、骨髓DNA含量和白细胞数。彗星实验中7.0 Gy伽马射线照射联合NAc-SAC给药组小鼠外周血淋巴细胞的尾长、尾矩、Olive尾矩和尾部DNA百分含量明显低于7.0 Gy伽马射线单纯照射组(p0.01),提示NAc-SAC可明显降低辐射导致的DNA损伤。本研究表明,目标化合物NAc-SAC具有一定的抗辐射损伤作用。     

Egr-IFNγ重组质粒的构建和在B16细胞中的辐射诱导表达

小鼠IFNγ cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成Egr-IFNγ重组质粒,利用质脂体介导转染B16细胞,用ELISA方法检测x射线照射后IFNγ表达的剂量效应和时程。结果表明,实验组的表达水平明显高于对照组,其中20Gy和2Gy照射组高于其它实验组(p<0.01)。26y照射后6h IFNγ表达量最高(p<0.01)。转染后的B16细胞每隔24h接受2Gy x射线照射,结果显示第一次照射后表达量最高(p<0.01),然后逐渐降低。结果提示电离辐射可激活Egr-IFNγ重组质粒,并调节IFNγ基因表达,这项研究可能对肿瘤治疗的研究有一定的意义。     

新增敏剂一甘氨双唑钠对体内肿瘤的放射增敏作用

采用４种不同肿瘤模型的荷瘤小鼠，观察了ＣＭＮａ对受照小鼠肿瘤的作用。结果表明：与单纯照射组相比，ＣＭＮａ能明显地减慢肿瘤的生长速度；增加肿瘤生长的延迟天数，４种肿瘤模型均得到相同的结果。绝大多数ＳＥＲ值在１．３以上。实验表明，ＣＭＮａ对体内肿瘤亦有明显的放射增敏作用。然而在相似条件下，以ＣＦＵ－ＧＭ为指标，在研究ＣＭＮａ对受照正常小鼠对γ射线敏感的造血组织有否影响时，却未观察到ＣＭＮａ对正常组织的     

肺癌特异性靶向小分子多肽在肺腺癌放射治疗中的实验研究

在固相合成小分子肽的过程中完成酪氨酸与cNGQGEQc的连接,采用氯胺-T法进行131I标记,构建肺腺癌NCI-H1975细胞株荷瘤裸鼠模型,随机分成4组,分别为:131I-cNGQGEQc治疗组、131I-cNAQAEQc治疗组、131I治疗组和生理盐水对照组,每组5只。尾静脉注射相应药物后,连续30天观测荷瘤裸鼠肿瘤移植物的大小,计算各组荷瘤裸鼠的肿瘤抑制率。研究结果表明:小分子多肽的131I标记率均大于90%,放化纯度均大于95%。131I-cNGQGEQc对肺腺癌NCI-H1975细胞移植瘤具有明显的抑制作用,治疗后第30天移植瘤肿瘤抑制率为60.93%。阴性多肽131I-cNAQAEQc治疗组的肿瘤抑制率为11.63%。131I治疗组的肿瘤抑制率为10.70%。实验结果表明,131I-cNGQGEQc对肺腺癌NCI-H1975细胞具有良好的亲和力及明显的靶向抑制作用,对非小细胞肺癌的靶向治疗具有潜在应用价值。     

低聚壳聚糖对小鼠的辐射损伤防护作用探讨

探讨低聚壳聚糖对受γ射线照射小鼠辐射损伤防护作用。采用γ射线照射小鼠,检测骨髓有核细胞数、淋巴细胞凋亡数、脾脏脏器系数、细胞凋亡相关基因和P53蛋白、GADD45蛋白变化。流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR技术检测凋亡基因,Western blot方法检测蛋白表达。结果表明,与单纯照射组相比,低聚壳聚糖能提高受照小鼠的存活率;提高骨髓有核细胞数,降低骨髓淋巴细胞凋亡细胞数量;下调脾脏凋亡相关基因Bax、caspas-3,上调Bc1-2,Bcl-2/Bax比值升高;抑制P53蛋白、GADD45蛋白表达。结果提示,低聚壳聚糖可能通过抑制P53蛋白、GADD45蛋白表达,影响凋亡相关基因表达,抑制凋亡细胞的产生,促进造血功能恢复,从而起到保护受照损伤小鼠作用。     

沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应

为探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)乏氧诱导因子-1α(Hypoxia induced factor1α,HIF-1α)和生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应,肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向HIF-1α和/或Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射。观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、HIF-1α、增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果表明,治疗开始后第9-21天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤体积显著小于单干扰联合放疗组,且平均生存时间明显延长。治疗结束后1天,双干扰联合放疗组裸鼠肿瘤组织Survivin、HIF-1α、PCNA表达和肿瘤间质微血管密度明显低于对照组和放疗组,双干扰联合放疗组移植瘤凋亡细胞百分数较其它组明显升高。结果提示,双干扰联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和单干扰联合放疗。     

有机硒牛磺酸制剂辐射防护作用小鼠试验研究

采用60Coγ射线全身照射清洁级昆明种小鼠,观察口服给予有机硒牛磺酸制剂对小鼠30天存活情况、骨髓有核细胞数和微核、超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）活性、免疫功能的影响。试验结果显示：与单纯照射组相比,给药组小鼠30天存活率提高显著,平均存活天数提高7.9 d;给药组GSH和抗体积数升高显著;中剂量和高剂量SOD活性增强;高剂量脾脏系数升高显著。     

小剂量照射的抑癌增强作用及其对皮肤组织的影响

本文采用H22肝癌小鼠肿瘤模型探讨小剂量照射的抑癌增强作用的优化剂量和作用机制。实验结果剂量辐射具有抑癌增强作用，与化疗组相比联合治疗组种瘤生长速度显著降低（P＜0．01），腹水癌细胞死亡率显著增加（P＜0．01）。小剂量照射与环磷酰胺协同杀伤癌细胞可能是其机制之一。^60Coγ线照射对荷瘤小鼠皮肤Zn含量有一定程度的影响。本实验条件下既有抑癌增强作用又地皮肤Zn含量影响较小的优化剂量为14cGy。