苹果浓缩汁中耐热菌的分离及其生长特性的初步研究

采用酸化的凯氏培养基对苹果浓缩汁中的耐热菌进行分离培养，并对它们的生理生长特性进行了初步研究。这些耐热菌并不是一种单一形态的菌，而是表现为多形态的。三株耐热菌菌株ATB—1、ATB-2、ATB-7形态及培养特征虽不尽相同，但均可以在25～50℃：温度范围内生长，最适生长温度范围为40～50℃。生长pH值范围分别为3．0～6．0、2．5～6．0、2．5～6．0，而最适生长pH值范围则分别为3．5～4．5、3．0～4．0、3．0～4．0。它们的芽孢均具有较强的抗热性，其D90℃：值分别为10．4、19．8、26．5min。     

蓝莓果浆中耐酸耐高温微生物的分离与鉴定

为了解和控制蓝莓果浆中的耐酸耐菌,采用酸化的凯氏培养基对蓝莓果浆中的耐酸耐热菌进行分离、培养和鉴定。结果表明,分离到的1株污染菌可以在60~90℃的温度范围及2.6~3.8的pH值范围内生长,符合耐酸耐热芽孢杆菌的特点。通过对分离菌株的细胞形态观察、菌落形态观察、生长条件、生理生化反应、16S rDNA测序等的分析研究,确立了分离菌与沙福芽孢杆菌有明显的相似性。     

胀袋红烧肉和酱料包中产气微生物的分离与鉴定

为解决红烧肉和酱料包的胀袋和腐败问题,该研究对胀袋红烧肉、牛排酱与番茄酱的微生物进行分离鉴定,并通过16S rDNA鉴定和产气验证试验确定导致产品胀袋的主要产气微生物。结果显示,从3种胀袋产品中共分离出9株优势菌,编号为1~9。其中菌株1号和5号为革兰氏阳性球菌,经鉴定1号菌株为枝状葡萄球菌（Staphylococcus edaphicus）、5号菌株为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）;4号和8号菌为革兰氏阴性杆菌,经鉴定4号菌株为巴氏柠檬酸杆菌（Citrobacter braakii）、8号菌株为弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）;2号、3号、6号、7号和9号为革兰氏阳性杆菌,经鉴定2号菌株为魏斯氏菌（Weissella cibaria）、3号菌株为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）、6号菌株为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）、7号菌株为太平洋芽孢杆菌（Bacillus pacificus）、9号菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。经产气验证试验,可以确定Bacillus velezensis、Citrobacter braakii、Bacillus cereus、Bacillus pacificus和Citrobacter freundii为产气微生物,是引起红烧肉和酱料包胀袋的主要污染微生物。综合分析,芽孢杆菌是导致包装食品胀袋的主要产气微生物之一,有效控制芽孢及芽孢杆菌的污染是解决食品胀袋问题的关键。     

耐热木聚糖酶菌株的筛选鉴定及发酵条件分析

从山东淄博酒曲中筛选得到1 株产耐热木聚糖酶菌株FSD0302,经鉴定为疏绵状丝孢菌（Thermomyces lanuginosus）。对该菌进行单因素优化产酶条件考察,结果显示：当玉米芯木聚糖粒度20～40?目、质量浓度4?g/100?mL、初始培养基pH?6.0、发酵温度50?℃、转速200?r/min时,T. lanuginosus FSD0302所产木聚糖酶活力高达5?357.1?U/mL,比活力为10?493.72?U/mg,较初筛时产酶量提高了2.9?倍;该菌可产2?种木聚糖酶,分子质量分别约为20?kDa和60?kDa,酶学性质考察结果表明,该菌所产木聚糖酶粗酶的最适温度为75?℃,最适pH值分别为5.5及7.5且在pH?3.5～9.0范围内可保留50%以上酶活力。综上所述,来源于T. lanuginosus FSD0302的耐热木聚糖酶可在低聚木糖生产中具有一定的应用前景。     

参薯粉浆酶法水解条件优化与动力学分析

采用液态高温α-淀粉酶水解参薯粉浆,分别通过单因素和正交试验,检测水解液中总还原糖的含量,考察和优化参薯粉浆酶法水解液化过程,并进行酶解反应动力学分析。结果表明：酶解温度90℃、粉浆pH值5.6、参薯粉浆质量浓度40mg/mL、加酶量0.07mL/g、水解时间50min时效果最佳,水解液中总还原糖得率可达到52.95%,米氏常数为Km＝80.84mg/mL,Vm＝1.26mg/(mL ·min)。     

固氮菌β-C1株类胡萝卜素分离提取工艺优化的研究

本文主要报导了破壁方法、浸提溶剂和工艺条件对从固氮菌β-C1菌株中提取类胡萝卜素影响的实验结果.用酸热法对β-C1菌株进行破壁处理最有利类胡萝卜提取,用正交实验法得出的最佳破壁工艺为:盐酸的浓度3mol/L,盐酸的加量30ml/g,破壁时间2min,破壁温度100℃.氯仿、丙酮、甲醇及乙醇等多种溶剂能取得良好的提取效果,但综合考虑,乙醇最理想;用正交实验优化乙醇浸取的最佳条件为:乙醇加量30ml/g菌体,浸提温度为50℃,浸提时间45min,在优化后的条件下进行破壁提取β-C1菌中的类胡萝卜素,提取得率为3.45mg/g(干菌体).     

金针菇发酵罐深层发酵条件的研究

采用IOL发酵罐发酵,考察了搅拌转速和通气比对金针菇菌丝生长的影响,研究结果表明,搅拌转速和通气比显著影响金针菇菌丝的生长,并得出较为优化的培养条件为:培养温度26℃,发酵前期适宜的通气比为1:1(v/v·m),搅拌转速为160r/min,发酵中期(2d后),通气比为1:1.5(v/v·m),搅拌转速为180r/min;发酵后期(8d后)适宜的通气比为1:0.8(v/v·m),搅拌转速为140r/min.研究了发酵液pH值、还原糖和氨基酸态氮含量与菌丝生长的相关性,研究结果表明,当发酵液中还原糖和氨基酸态氮含量分别为2.95g/100 mL和9.66mg/100mL、pH 5.8时,菌丝生物量最大,高达2.652g/100mL.     

耐热乳酸菌肉品天然发酵剂的筛选鉴定

为获得发酵性能优良且具有较好耐热性的肉品发酵剂乳酸菌,通过溶钙圈法分离,乳酸纸层析、耐盐耐硝性、生物胺检测、产黏性、发酵葡萄糖产气、产H2S、抑菌实验初筛和产酸能力、耐热能力实验复筛,最终从5种传统发酵肉筛选出2株具有良好发酵特性和耐热性的菌株Y9、FL6。结合形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析鉴定后确定Y9为植物乳杆菌,FL6为戊糖片球菌。这两株菌都能在含6g/dL NaCl和150mg/kgNaNO2的MRS培养基中良好生长,其产酸速度快,24h内能将pH值降到4.0左右,还能抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长。经过水浴80℃处理1min后,发现菌株Y9、FL6活菌数依然维持在103、105CFU/mL左右,表现出较好的高温耐受力,可将两株菌复配后经喷雾干燥制成发酵剂菌粉。     

超声波辅助提取紫槐花色素工艺优化

本文主要研究超声波辅助提取紫槐色素最佳工艺条件。利用pH示差法对紫槐花提取液中色素含量进行测定。通过单因素实验及响应面实验,确定提取紫槐花色素的最佳工艺条件。结果表明:pH=2的柠檬酸为提取剂,液料比50:1 mL/g,超声波功率300 W,超声波时间20 min,超声波温度60 ℃;在此条件下提取液中色素含量为118.77 mg/100 g。色素各因素对紫槐色素提取影响大小依次为:超声波功率>液料比>超声波时间。经紫外可见分光光度计扫描结果,推测紫槐色素为花青素类物质。本研究得出紫槐花色素提取最佳工艺,为紫槐花色素的开发利用提供了一定的理论依据。     

废弃白酒糟酸水解工艺的优化

以废弃白酒糟为研究对象,利用正交实验考察了混和酸浓度、时间和温度对酒糟酸水解效果的影响,以木糖浓度和还原糖浓度为评价指标优化工艺条件,并探索最佳的超声波预处理条件.结果表明,在常温条件下,以500W功率、超声波预处理酒糟10min时酸水解效果更佳.最优的酸水解条件为混合酸浓度为2.5％、水解时间为2.5h,温度为120℃.该条件下,木糖浓度和还原糖浓度达到651.62μg/mL和11.85mg/mL.     

热处理对红肉火龙果色素稳定性及其清除羟基自由基能力的影响

本文研究了异维生素C、柠檬酸、六偏磷酸钠对火龙果色素热稳定性的影响及热处理后火龙果色素清除羟基自由基能力的变化。研究发现异维生素C和柠檬酸对保护火龙果色素在热处理时的色素损失方面作用有限,而六偏磷酸钠能有效的抑制热处理造成的色素损失。pH 3~6时,β-花青素(Betacyanins)清除羟基自由基的能力比较稳定,而pH 2时下降。90℃热处理10 min使色素清除羟基自由基能力下降50%以上,且pH越低,清除羟基自由基的能力越弱。β-花青素的稳定性与其清除羟基自由基能力之间有直接的相关性。     

耐高温α-淀粉酶产生菌的分离鉴定及发酵条件与酶性质研究

从西藏八宿温泉附近土壤中 ,分离到一株能在 5 .5℃生长并分泌高温α- 淀粉酶的菌株 ,其生长pH 5 . 0～11. 0 ,最适生长pH 7. 0～ 8. 0。该菌株经初步鉴定为地衣芽孢杆菌 ,命名为BacilluslicheniformisZ - 8。在 4 5℃ ,10 %装液量 ,16. 0r/min条件下振荡培养 4 8h后 ,发酵液酶活可达 2 1. 2× 10 .4UV/mL。发酵培养基的组成成分为黄豆粉 0 . 5 %、麸皮 1%、可溶性淀粉 0 . 2 5 %、pH 8. 8。对该酶的性质研究表明 ,其最适作用pH为 6 . 0 ,最适反应温度为 95℃ ,95℃下保温 6 0min处理后酶活仅损失 5 . 4 % ,对Ca2 + 没有依赖性。     

磁性复合载体固定生姜蛋白酶的酶学性质研究

文章采用海藻酸钠与明胶为载体,对磁性Fe 3 O 4进行包埋,使其形成磁性复合载体凝胶微球,经戊二醛交联后,固定生姜蛋白酶,得到磁性复合载体固定生姜蛋白酶;在预实验的基础上,确定影响制备固定化生姜蛋白酶的主要因素;并研究在最优条件下,固定化生姜蛋白酶与其游离酶的酶学性质。结果表明:磁性复合载体固定化生姜蛋白酶的酸碱稳定性范围为pH 3.0~7.0,在20~60℃内具有较好的抗热性,其最适pH为4.0,温度为50℃,表观米氏常数Kmapp为3.162 mg/mL;在此条件下固定60 min,制备的固定化生姜蛋白酶剩余酶活力可达78.69%。重复使用10次后,酶活力剩余53%;在4℃下储存10 d,酶活力仍保留50.66%。说明在最优工艺条件下所制备的固定化酶机械强度大,弹性好,操作稳定性强,酶活力回收率高。     

响应面法优化甘薯淀粉酶解条件的研究

在加酶量、作用时间、反应温度及pH四个单因素试验的基础上,运用响应面分析法,以甘薯汁中还原糖量为评价指标,对耐高温α-淀粉酶酶解甘薯汁中淀粉的最佳工艺进行了研究,并利用统计学方法建立了耐高温α-淀粉酶酶解甘薯汁中淀粉的二次多项数学模型.结果表明,最佳酶解条件为:加酶量55 U/mL;作用时间80 min;反应温度90℃.在最佳酶解条件下,甘薯汁中还原糖量达3.706 g/100mL,淀粉的酶解率为75.33%.水解后的甘薯汁过滤制得的饮料,无需添加稳定剂,即可达到饮料稳定性的理想效果,在饮料保存期内无沉淀产生.     

响应面法优化木聚糖酶和α-葡萄糖醛酸酶联合水解桦木木聚糖工艺

在单因素试验基础上应用响应面试验,优化重组耐热性木聚糖酶（XynB）和α-葡萄糖醛酸酶（AguA）联合水解桦木木聚糖的条件。响应面法分析结果显示,4个影响因素的最佳组合为底物质量浓度4.2g/100mL、酶解温度80.66℃、pH7.65、XynB/AguA加酶量60/9U/g,此时还原糖释放量为17.82mg/mL。利用木聚糖酶和葡萄糖醛酸酶共同作用木聚糖4h所得低聚木糖中还原糖质量浓度为17.91mg/mL,木二糖质量浓度为13.66mg/mL。     

一株具有抗菌活性芽孢杆菌HN-7的分离及抗菌活性研究

研究采用琼脂平板扩散试验,以单核增生李斯特氏菌（Listeria monocytogene）54002为指示菌,从湖南传统发酵豆制品中筛选 出1株对其具有明显抑制作用的芽孢杆菌（Bacillus sp.）HN-7,通过酸碱稳定性、酶敏感性、热稳定性及紫外稳定性试验,可初步推测 该抑菌物质是脂肽。 研究结果表明,菌株HN-7所产抗菌肽抑菌谱较宽,耐热、耐酸性强,对单增李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）、 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、藤黄微球菌（Micrococus luteus）,枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） 都具有抑制作用,并在121 ℃处理20 min、pH 2.0～12.0条件下仍具有抑菌活性。     

纳豆菌液态发酵荞麦产纳豆激酶及其代谢特性分析

对纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis natto）液态发酵荞麦产纳豆激酶揺瓶、2.5 L发酵罐条件进行优化。对比自制大豆分离蛋白酶解物与商业大豆蛋白胨作为补充氮源时菌体生长规律以及代谢物质（酶、可溶性蛋白、还原糖、多酚及抗氧化物质）变化规律。纳豆菌液态发酵荞麦产纳豆激酶2.5?L发酵罐最优条件为荞麦浸泡6?h后,按料液比1∶10（g/mL）加水打浆,加入0.4%?α-淀粉酶,90?℃加热40?min,补充NS37071酶解12?h时所得酶解物,调节发酵培养基pH?7.0,接种量3%,通气量3.5?L/min,转速300?r/min,装液量1.2?L,发酵36?h。与商业大豆蛋白胨相比,补充大豆分离蛋白酶解物时,纳豆菌生长对数期较长,可溶性蛋白与还原糖的消耗量较大,在36?h趋于平稳,纳豆激酶活力持续上升至36?h达到最大值,酚类物质比溶出速率在12?h达到最大值,抗氧化物质比生成速率在6?h达到最大值。以荞麦为原料,补充自制大豆分离蛋白酶解物,通过优化纳豆菌液态发酵条件,可制备具有高纳豆激酶活力（152.5?FU/mL）、富含谷物多酚（0.109?mg/mL）且具有强抗氧化活性（27.43?μmol/mL）的发酵产物。     

表面脱乙酰化甲壳素颗粒固定溶菌酶及酶学性质研究

本研究以表面脱乙酰化甲壳素颗粒为载体,以戊二醛为交联剂,对溶菌酶进行固定化。本文利用正交试验设计,以蛋白利用率、活力回收率和保藏稳定性为指标,以半脱乙酰壳聚糖为底物,3-甲基-2-苯丙噻唑啉酮腙(MBTH)法为酶活力测定方法,优化了关键固定化参数,并考察了固定化对溶菌酶酶学性质的影响。结果表明:固定化过程中最佳脱乙酰时间(A)为25 min,戊二醛浓度(B)为5%,载体活化pH(C)为5.0,在此条件下固定化的溶菌酶与游离溶菌酶相比,其表观最适pH由4.0降至3.5;最适温度由75 ℃升高至80 ℃,且在70~90 ℃仍保持95%活力;K_m为2.69 mg/mL,明显大于游离酶的1.75 mg/mL;15 d稳定性保持66%。因此,固定化提高了溶菌酶的热稳定性和贮藏稳定性,具有广泛的应用前景。