大川芎方HPLC指纹图谱方法学研究

建立大川芎方HPLC指纹图谱方法学。考察色谱条件,选择合适的分析波长,考察方法的精密度、重现性、稳定性等。结果表明:色谱条件:色谱柱:Hypersil ODS2 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色谱柱,流动相甲醇-1%醋酸梯度洗脱:0 min→35 min,A:5%→35%;35 min→50 min,A:35%→80%;50 min→60 min,A:80%→80%;60 min→65 min,A:80%→5%;柱温:30℃;流速:1 m L/min;检测波长270 nm。在上述条件下,所建立方法的精密度、重现性、稳定性等良好。所建立的大川芎方HPLC指纹图谱方法学为该方的定性、定量分析提供了新方法。     

同时测定鲜切荸荠黄化组织中柚皮素和圣草酚的高效液相色谱条件探究

采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,通过考察流动相、柱温、流速等色谱条件建立了能同时测定鲜切荸荠黄化组织中柚皮素和圣草酚的高效液相色谱法。色谱条件为柱温:40℃;流动相:0.5%冰醋酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~10 min,10%→20%B;10~15 min,20%→30%B;15~25 min,30%→40%B;25~35 min,40%→50%B);流速:1 m L·min~(-1);进样量:10μL;检测波长:280 nm。此色谱条件下,柚皮素和圣草酚均能得到有效分离,分别在5.60~28.00μg·m L~(-1)(r=1.0000)、3.20~16.00μg·m L~(-1)(r=0.9999)范围内峰面积与浓度的线性关系良好,加标回收率分别在99.49%~100.71%、98.68%~101.65%(n=6)。本研究所得的高效液相色谱条件简便快捷、准确可靠,重现性好,能排除其中所含其他物质色谱和其他物质产生的干扰,因此可用于同时测定鲜切荸荠黄化组织中的柚皮素及圣草酚。     

化橘红HPLC指纹图谱的建立

为建立广东化州市特有药材化橘红的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,采用色谱条件为：Nucleosil C18 反相柱(150mm × 4.6mm,3μm),DAD 检测器,流动相为水- 体积分数50% 甲醇溶液+ 体积分数15%～50%乙腈溶液,三元梯度洗脱,流速为0.3～1mL/min,柱温35℃,分离波长315nm。结果表明：11 批次的化橘红提取物色谱图共有峰9 个;经“中药指纹图谱鉴别分析系统”统计分析,共有峰相对保留时间的相对标准偏差在0.3% 以下,相似度均在0.965 以上。本法符合指纹图谱的要求,可建立共有模式,作为科学评价化橘红产品质量的检测方法。     

HPLC梯度洗脱法检查缬沙坦氢氯噻嗪分散片的有关物质

目的建立HPLC法测定缬沙坦氢氯噻嗪分散片中缬沙坦和氢氯噻嗪有关物质的方法。方法 C18柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相A为0.1%磷酸,B为乙腈,梯度洗脱:0~10 min,A:80%→50%;10~35 min,A:50%→50%;35~40 min,A:50%→80%;40~50 min,A:80%→80%;流速1.0 mL/min;检测波长265 nm。结果缬沙坦峰与氢氯噻嗪峰,与各杂质峰均能良好分离。结论该方法简便、灵敏、专属性好,可用于缬沙坦氢氯噻嗪分散片有关物质的检查。     

喀什树莓果汁HPLC指纹谱图及化学模式识别研究

目的:采用高效液相色谱法获取12批树莓果汁指纹谱图,以共有峰为评价指标,结合相似度分析,对树莓果汁的质量进行评价 方法:采用色谱柱:Agilent HC-C18(4.6mm×250mm,5μm),甲醇(B)-0.5％乙酸(A)作为流动相,梯度洗脱:0～8min,10％～20％ B;8～15min,20％～35％B;15～25min,35％～50％B;25～40min,50％～80％B;检测波长:275nm,流速:0.8mL/min,柱温:30℃结果:建立了12批树莓指纹图谱,发现13个色谱峰为共有峰;样品色谱图和对照谱图之间的相似度相差不大均在0.968以上,12批树莓果汁的质量都很稳定,与伪品相差较大;并把获得的指纹图谱用系统聚类分析和主成分分析进行化学模式识别研究.结论:结果表明,该法能明显区分伪品,适合于树莓果汁的质量评价.     

制备高效液相色谱法分离制备葡萄果皮中二甲花翠素3-O-葡萄糖苷单体

以1%盐酸甲醇为提取剂提取葡萄果皮中的花色素苷,通过AmberliteXAD-7HP大孔吸附树脂对葡萄皮中花色素苷进行纯化后,由高效制备液相分离纯化二甲花翠素3-O-葡萄糖苷单体.采用PREP-ODS(H)kit(5 μm,250×20mm i.d.)色谱柱,流动相为水/乙腈/甲酸(流动相A为80/10/1.65;流动相B为40/50/1.05,v/v),测定波长535 nm,流速11 mL/min,室温,进样量100 μL,梯度:0 min,0%B;10 min,10%B;20 min,30%B;25 min,50%B;30 min,0%B.结果表明,产品单体纯度可达98.13%,经HPLC分析与UV、MS分析鉴定,其分析图谱与数据同标准图谱及数据相一致.     

苦瓜皂苷高效液相色谱指纹图谱研究

建立苦瓜皂苷类成分的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对不同产地苦瓜中皂苷进行HPLC分析,流动相:乙腈和水梯度洗脱;流速:1.0mL/min;色谱柱:ZorbaxSB-C18柱(150×4.6mm,5 μm);柱温:25℃;检测波长:209 nm;进样量:20 μL;分析时间:65 min.确定8个共有峰作为苦瓜皂苷的特征指纹峰;不同产地苦瓜皂苷指纹图谱与对照指纹图谱(R)的相似度均大于0.85.该方法建立的苦瓜皂苷HPLC指纹图谱,为苦瓜鉴别和品质评价、质量控制、制定质量标准提供参考.     

广陈皮提取物的HPLC指纹图谱研究

建立广陈皮提取物的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱,为陈皮提取物原料的质量控制提供依据。采用HPLC法分析测定13批广陈皮样品。色谱柱:Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇-2.0%乙酸水溶液梯度洗脱;检测波长:283 nm;柱温:25℃;流速:1.0 mL/min;上样量:10μL。建立广陈皮提取物的指纹图谱,确定出11个共有峰,广陈皮样品的相似度在0.967~0.974之间。     

HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量

建立HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量。采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Z0RBAX SB-C18(2.1 mm×100 mm,3.6μm),甲醇(A)-0.1%冰醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0 min~3 min,85%~70%B;3 min~6 min,70%~55%B;6 min~9 min,55%~35%B;9 min~12 min,35%~35%B;12 min~15 min,35%~70%B;15 min~18 min,70%~85%B),流速0.6 mL/min,检测波长340 nm,柱温30℃。异牡荆苷在1.733 1μg/mL~10.832 0μg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为98.01%,RSD1.02%,试验测得异牡荆苷的含量为2.928 5 mg/g。     

HPLC测定黄精的指纹图谱

目的建立山东泰安黄精的高效液相色谱指纹图谱。方法采用高效液相色谱法(HPLC)比较分析不同批次黄精的指纹图谱,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"计算和处理测定的图谱。色谱条件:安捷伦Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长203 nm,柱温30℃。结果通过共有模式相似度分析可确定16个色谱峰,构成山东泰安黄精指纹图谱特征峰。利用该色谱条件比较山东泰安黄精和河北黄精的指纹图谱,二者有显著差异。结论HPLC建立的黄精指纹图谱稳定性、重复性较好,可为区分其他区域的黄精提供参考。     

香砂养胃丸（水丸）的特征图谱研究

目的建立HPLC测定香砂养胃丸(水丸)特征图谱的方法,提供可靠的的质量控制方法。方法 Wondasil C_(18)-WR(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱(0～25 min,20%A→65%A;25～45 min,65%A→76%A;45～60 min,76%A),流速1.0 ml/min,测定波长254 nm,柱温30℃。结果 18批香砂养胃丸特征图谱标定了共有峰12个,指认了橙皮苷(峰4)、和厚朴酚(峰8)、厚朴酚(峰11)、α-香附酮(峰12)4个特征峰,方法精密度、稳定性、重复性、耐用性考察结果均满意。结论该方法简便、准确、可靠,可用于香砂养胃丸的质量控制。     

超高效液相色谱-质谱法测定母乳中12 种低聚糖

建立母乳中12种低聚糖超高液相色谱-串联三重四极杆质谱的定性及定量测定方法。母乳样品脱脂除蛋白后经液相分离,通过质谱检测,最优梯度洗脱条件为：流动相A为10mmol/L的甲酸铵溶液,流动相B为乙腈;流速0.3mL/min;柱温50℃;0～10min,95%～75%B;10～15min,75%B;15～20min,75%～65%B;20～21min,65%～10%B;21～24min,10%B;24～25min,10%～95%B;25～35min,95%B。12种低聚糖标准品标准曲线在设定质量浓度范围内线性良好（R2＞0.98）,加标回收率在80.00%～120.00%之间,重复性和仪器精密度（均用相对标准偏差表示）均小于10%。     

LC-MS/MS法测定遗传毒性杂质4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺

目的建立液质联用方法测定甲苯磺酸拉帕替尼及片中遗传毒性杂质4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺的含量。方法采用C_8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水(A)-甲醇(B)为流动相,采用梯度洗脱(0~3min,40%B→90%B;3~8 min,90%B→95%B),流速0.7 ml/min,柱温30℃;ESI离子源,正离子扫描方式,多反应监测(MRM)模式扫描,检测离子通道为m/z:252.1→143.1。结果 4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺浓度在0.24~103.89 ng/ml范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9996);定量限为0.24 ng/ml;检出限为0.072 ng/ml;平均加样回收率为100.98%,RSD为2.58%(n=9)。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确度好,可用于甲苯磺酸拉帕替尼及片中杂质4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺的测定。     

蒲公英抑菌提取液氯仿萃取部位高效液相色谱指纹图谱的研究

以咖啡酸作为对照物,构建蒲公英抑菌提取液氯仿萃取部位的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。本实验方法采用HPLC方法:DiamonsilC18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相采用乙腈-水-10%乙酸溶液三相系统进行梯度洗脱,流速0.7mL/min,检测波长323nm,柱温37℃。指纹图谱得到12个共有色谱峰,并可根据这些色谱峰来控制蒲公英抑菌提取液的质量。     

花椒HPLC指纹图谱建立及指标性成分的测定

文章采用HPLC法建立多批次花椒指纹图谱,并测定其主要成分含量。指纹图谱的色谱条件为Wondasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长268nm,柱温30℃,流量0.8mL/min。以其指纹图谱为特征,进行相似度和聚类分析。指纹图谱确定了12个共有峰,所有样品的相似度均大于0.9,表明各产地花椒具有较好的一致性;当类间距离为10时,16批次花椒样品被分成3大类;花椒的2个主要成分羟基-α-山椒素的含量在0.323%～1.570%,羟基-β-山椒素的含量在0.03%～0.622%。花椒样品各批次间指纹图谱和主要成分含量均有一定的差异。建立的花椒HPLC指纹图谱及主要成分含量测定方法可为花椒食品质量控制和评价提供科学依据。     

万通酱油HPLC指纹图谱的研究及其在真伪鉴别中的应用

试验摸索出建立万通酱油HPLC指纹图谱共有模式的最佳试验方案,即色谱柱:ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:CH3OH-0.02 mol/L K2HPO4溶液(2∶98);柱温:室温;检测波长210 nm;流速为0.8 mL/min。在该条件下,样品经C18柱脱色处理后,30 min内就完成了HPLC指纹图谱的检测。应用指纹图谱相似度评价系统软件对各样品图谱信息进行处理,选出10批优质正品万通酱油样品生成酱油HPLC指纹图谱共有模式,从中选出7个重复性好的色谱峰作为万通酱油HPLC指纹图谱的特征峰。以相似度大小作为判定万通酱油质量合格与否的标准,将生成的对照指纹图谱与伪品酱油HPLC指纹图谱进行比较,即可判断出真伪。     

四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析

建立四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析方法,探讨不同配伍对氨基酸类指纹图谱的影响。采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生法,以精氨酸为参照物。色谱柱Kromasil C-18(250×4.6 mm×5μm);流动相A为乙腈,B为N,N-二甲基甲酰胺-0.025 mol/L醋酸钠(1:100,用36%乙酸调pH=6.0),梯度系统;柱温40℃;检测波长360 nm;流速1.0 mL/min;进样量10μL;分析时间70 min。结果共标出17个共有峰,鉴定出13种对人体有益的氨基酸成分。10批样品的相似度均大于0.97。对整方氨基酸指纹图谱的影响从大到小依次是当归、熟地黄、白芍、川芎。所建立的氨基酸类成分指纹图谱特征性强,可作为四物汤质量控制的手段之一,并可为中药复方配伍化学成分变化研究提供一定参考。     

进口西拉葡萄酒的HPLC-DAD-MS特征指纹图谱

建立进口西拉葡萄酒的高效液相色谱-二极管-离子阱质谱指纹图谱分析方法。样品采用乙酸乙酯萃取,旋转蒸发仪浓缩,甲醇溶解,高效液相色谱-离子阱质谱分析测定。色谱柱采用MG Ⅱ C18柱（150 mm×2.0 mm,5 μm）,以pH 3.0水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.25 mL/min,多波长检测,离子阱质谱采用负离子模式,扫描范围m/z 50～1 200,可对没食子酸等11 个组分进行定性和定量。维拉西拉葡萄酒的15 个共有峰在60 min内得到良好分离,通过与标准品比较,对其中6 个峰进行了确证,10 批次维拉西拉葡萄酒的相似度均大于0.9。方法简便、灵敏、稳定、精确,生成的葡萄酒指纹图谱能够用于进口西拉葡萄酒的质量评价。     

不同产地辣木叶HPLC指纹图谱研究

目的高效液相色谱法(HPLC)建立辣木叶指纹图谱,为辣木叶的质量控制和评价提供参考。方法选用Diamonsil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长230 nm,流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱),流速1.0 ml/min,柱温为35℃,进样量10μl;以没食子酸为参照峰,在相同的色谱条件下测定9批不同产地的辣木叶药材,用软件"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"对9批辣木叶进行相关分析。结果建立了辣木叶的HPLC指纹图谱,9批辣木叶的相似度在0.63～0.87之间,指定了15个共有峰,2个已确认成分,分别为没食子酸和异槲皮素;以对照图谱为对照,各共有峰的相对保留时间RSD均小于2.0%,各共有峰的相对峰面积差别显著,表明这9批辣木叶原材化学成分种类差别较小,各成分含量差别较大。结论此法具有良好的精密度、重复性、稳定性,可为辣木叶的质量评价与控制提供科学依据。     

红花椒和青花椒HPLC指纹图谱的分析

采用HPLC法建立了花椒的高效液相指纹图谱。色谱条件为色谱柱:迪马铂金C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:V(乙腈)∶V(水)=50∶50,流速:0.8 mL/min,检测波长:254 nm,进样量2μL,检测时间:40 min。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》(研究版)提取HPLC图谱共有模式,计算各批次样品的相似度,结果显示,红花椒特征指纹图谱中有11个共有峰,15批红花椒样品中,除一份样本外,其他14批样品相似度均大于0.97,表明不同产地红花椒内在品质相似;青花椒特征指纹图谱中有10个共有峰,18批青花椒样品相似度都很低,相似度为0.52～0.67,表明不同产地青花椒内在品质差异性很大。红花椒相比青花椒在保留时间约30 min处存在一个比较明显的色谱峰,并采用飞行时间质谱对该特征差异色谱峰进行鉴定,推断该物质为不饱和五烯酰胺,即羟基-γ-山椒素或2'-羟基-N-异丁基-2,4,8,10,12-十四烷五烯酰胺及其同分异构体。