湄潭白茶多糖提取工艺优化及其抑菌活性研究

本文以湄潭白茶为对象,研究其多糖的提取工艺条件及体外抑菌活性。考察提取温度、提取时间、料液比3个因素对多糖得率的影响,并通过正交试验确定其最佳提取参数:提取温度90 ℃、提取时间4 h、料液比1:20 g/mL,在此条件下湄潭白茶多糖得率为1.163%±0.011%。体外抑菌活性试验结果表明:湄潭白茶多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌均具有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制活性最强,其最低抑菌浓度MIC为3.125 mg/mL。研究成果将为湄潭白茶多糖的进一步研究及新产品开发提供理论指导。     

微波辐射预处理提取花叶滇苦菜总黄酮工艺及其乙酸乙酯萃取物的抑菌活性研究

为了探讨微波辐射预处理提取花叶滇苦菜总黄酮的工艺优化及其总黄酮提取液乙酸乙酯萃取物的抑菌活性,在单因素实验基础上,采用正交试验定总黄酮提取最佳工艺;参照CLSI标准测定乙酸乙酯萃取物对铜绿假单胞菌(ATCC9027)、铜绿假单胞菌耐药菌(PA1)、金黄色葡萄球(ATCC29213)、金黄色葡萄球菌耐药菌(SA1)、大肠杆菌(ATCC25922)等5种细菌的抑菌活性。结果表明,花叶滇苦菜地上部分总黄酮提取的最佳工艺为:微波辐射时间为120 s,微波功率为350 W,乙醇浓度为60%,水浴温度70℃,料液比1:40 g/mL,水浴时间为60 min,此时,黄酮得率为38.328 mg/g。地下部分总黄酮提取的最佳工艺为:微波辐射时间为90 s,微波辐射功率为490 W,乙醇浓度为70%,料液比1:30 g/mL,水浴温度为80℃,水浴时间为90 min,其黄酮得率为7.232 mg/g。乙酸乙酯萃取物具备一定抑菌活性,对金黄色葡萄球菌耐药菌的MIC分别为4(地上部分)和8 mg/mL(地下部分)。当浓度低于16 mg/mL时,对铜绿假单胞菌、铜绿假单胞菌耐药菌和大肠杆菌均无抑制作用。微波辐射预处理对花叶滇苦菜总黄酮的提取具有指导意义,总黄酮提取液乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。     

几种天然防腐剂的抑菌性能研究

本试验以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、假单胞菌、热死环丝菌为供试验菌,通过滤纸片试验法对常见十种天然防腐剂的抑菌性能进行研究,试验结果显示茶多酚对这四类菌都具有很强的抑菌作用;壳聚糖的抑菌谱也比较宽,但对各菌的抑菌力不如茶多酚强;大蒜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出很强的抑菌作用;溶菌酶、蜂胶和Nisin都主要对G+有较强的抑制作用,而对G-作用弱或无作用;丁香提取液对金黄色葡萄球菌和热死环丝菌的抑菌作用较强;桂皮提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用较强,但对假单胞菌的抑菌作用相对较弱;生姜在试验中未表现出有抑菌作用,迷迭香的抑菌作用也很弱.由此可作为进一步优选几种天然防腐剂复配时的优选依据.     

马尾松针乙醇/水提取物对食品腐败细菌的抑制活性

以马尾松针为材料,研究其75%乙醇和水提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、宋内氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌8种食品腐败细菌的抑菌活性。结果表明:75%乙醇和水提取物对供试菌均有显著的抑制作用,其最低抑菌质量浓度(MIC)分别为6.25~12.5mg/mL和12.5~50mg/mL;最低杀菌质量浓度(MBC)分别为12.5~25mg/mL和12.5~50mg/mL。75%乙醇提取物的抑菌活性明显强于水提取物。其热稳定性较好,经121℃湿热处理30min,仅对铜绿假单胞杆菌和沙门氏菌的抑菌活性产生微弱影响。当介质pH≤7时,75%乙醇提取物对供试菌的抑制能力随pH升高而显著下降。当pH7时,除金黄色葡萄球菌之外,对其它供试菌无抑制作用。     

南五味子丙酮提取物对食品腐败细菌的抑制作用

目的:探讨南五味子丙酮提取物对食品腐败菌的抑制作用。方法:以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等7种菌为供试菌,测定其抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并研究热处理、pH、紫外光对丙酮提取物抑菌活性的影响。结果:质量浓度为100mg/mL的丙酮提取物对供试菌的抑菌圈直径均大于12mm。丙酮提取物对供试菌的MIC值和MBC值:金黄色葡萄球菌100、150mg/mL,铜绿假单胞菌100、150mg/mL,大肠杆菌100、150mg/mL,枯草芽孢杆菌50、100mg/mL,蜡样芽孢杆菌50、100mg/mL,乙型副伤寒沙门氏菌100、150mg/mL,变形杆菌50、100mg/mL。121℃、30min热处理对该提取物抑菌活性无影响。当pH>4时对其抑菌活性有明显的影响。紫外光照射对其抑菌活性有一定的影响。结论:南五味子丙酮提取物对7种食品腐败细菌均有较好的抑制作用。     

抗铜绿假单胞菌南极微生物的筛选、鉴定及其抑菌谱研究

该研究采用稀释涂布平板法从南极团结湖沉积物中分离、纯化南极微生物,采用双层平板法和琼脂扩散法从中筛选铜绿假单胞菌的拮抗菌,通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对筛选菌株进行菌种鉴定,并测定其抑菌谱。结果表明,共分离纯化出64株南极微生物,8株对铜绿假单胞菌具有抑制作用,其中菌株NO.TJ31的抑制效果最好,抑菌圈直径达（22.3±0.7） mm,经鉴定,其为弗氏甲基杆菌（Methylobacterium frigidaeris）,菌株NO.TJ31对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、鲍曼不动杆菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯氏菌都具有一定的抑制作用,具有较广的抑菌谱。     

3种红花的体外抑菌作用研究

研究新红4号、新红7号、云红2号3种红花的抑菌作用。分别采用水提法和醇取法提取红花有效成分,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、八叠球菌、铜绿假单胞菌为供试菌,利用滤纸片扩散法测定3种红花的水提物和醇提物的抑菌作用,并用2倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。醇提物中云红2号醇提物对铜绿假单胞菌的抑制作用较明显、MIC为62.5 mg/m L;水提物中新红4号水提物对5种菌的抑制作用都很明显、其对大肠杆菌的MIC为62.5 mg/m L,新红7号水提物对除金黄色葡萄球菌之外的4种菌有很好的抑制作用、其对大肠杆菌的MIC为125mg/m L。     

不同浸提条件对植物香辛料抑菌性能的影响

利用滤纸片试验法 ,以假单胞菌、热死环丝菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和乳酸菌为供试菌 ,通过 3因子二次正交旋转设计 ,试验表明 ,丁香用有机溶液浸提、桂皮用水溶液浸提的抑菌效果好 ,它们最佳的浸提条件分别为 :6%的丁香粉溶于 3 1 8%的乙醇溶液中 ,70℃水浴 6h ;5 6%的桂皮粉溶于水溶液中 ,70℃水浴 7h。     

仙草提取物体外抑菌的研究

本文利用醇提法获得的仙草提取物分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞、乳酸菌、酵母和黑曲霉做了体外抑菌实验,并对起抑菌作用的可能物质黄酮类化合物做了测定。结果表明,仙草全草提取物对大肠杆菌CMCC44102、金黄色葡萄球菌ATCC25923、枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501、铜绿假单胞ATCC27853、嗜热链球菌ATCC14485和保加利亚杆菌CICC6045的最小抑菌浓度分别为3、0.6、6、0.6、3和3g/mL(生药质量浓度);对黑曲霉和酵母无明显抑制作用。仙草全草提取物芦丁含量为50.15mg/g,与抑菌效果有一定的关联性。     

大蒜油自微乳的抑菌作用

本文研究了大蒜油自微乳（GO-SMEDDS）对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、酿酒酵母的抑制作用。通过测定抑菌圈直径,确定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为试验菌株,通过形貌观察,以及电导率、碱性磷酸酶（AKP）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性的测定,综合评价大蒜油自微乳的抑菌效果。结果表明：大蒜油自微乳的抑菌作用大小依次为：真菌、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌质量浓度分别为1.875 mg/mL和0.469 mg/mL,最低杀菌质量浓度分别为3.750 mg/mL和0.938 mg/mL。大蒜油自微乳的抑菌机理是使大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜受损,引起菌体细胞内碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶泄露以及离子渗出,从而导致菌体的死亡。     

鸡蛋花多糖提取工艺优化及生物活性研究

目的:优化鸡蛋花（Plumeria rubra L. cv. Acutifolia）多糖的提取工艺,并对鸡蛋花多糖（PRLAP）体外抗氧化、抗菌、抗肿瘤活性进行评价。方法:通过单因素实验设计正交试验,确定PRLAP的最佳提取条件;通过测PRLAP对DPPH、ABTS和OH自由基清除能力来评价PRLAP的抗氧化活性;采用微量肉汤稀释法测PRLAP对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）的最小抑菌浓度（minimal inhibit concentration,MIC）来评价PRLAP的抑菌活性;此外,通过CCK-8法检测PRLAP对人黑色素瘤细胞（A375）、小鼠黑色素瘤细胞（B16）、人结直肠癌上皮细胞（DLD-1）、人乳腺癌细胞（MCF-7）细胞活力的影响来评价PRLAP的抗肿瘤能力。结果:PRLAP最佳提取条件:超声功率264 W、料液比1:50（g/mL）、提取时间40 min、提取温度35 ℃。此条件下,PRLAP的得率为14.01%±0.22%。PRLAP清除DPPH、ABTS、OH自由基的半抑制浓度（IC₅₀）分别为0.1934、0.2315、2.469 mg/mL。PRLAP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.391和0.195 mg/mL,对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的MIC均为1.562 mg/mL。细胞活力实验结果表明,在一定浓度范围内,除DLD-1细胞外,PRLAP对A357、B16和MCF-7细胞活力有一定的抑制作用且与浓度均呈剂量依赖性,IC₅₀分别为101.3、285.6、423.1 μg/mL。结论:本文首次对鸡蛋花多糖提取工艺进行了优化,通过一系列实验证明PRLAP具有良好的体外抗氧化、抑菌以及一定的抗肿瘤活性,为进一步研究开发鸡蛋花提供科学理论支撑。     

响应面试验优化海蓬子外种皮水溶性多糖提取工艺及其抗菌活性

对海蓬子外种皮多糖提取工艺进行研究,以干枯的海蓬子外种皮为原料,水提醇沉法获得多糖,考察提取时间、提取温度、料液比对多糖提取量的影响,通过单因素试验和响应面法对影响海蓬子外种皮多糖提取量的主要因素进行分析优化,微孔-平板法测定粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度（minimal inhibitoryconcentration,MIC）。结果表明：影响海蓬子外种皮多糖提取量工艺的因素按主次顺序排列为提取温度＞料液比＞提取时间;确定海蓬子外种皮多糖水提取的最佳工艺条件为提取温度87 ℃、提取时间5 h、料液比1∶57（g/mL）,在该条件下,海蓬子外种皮多糖的提取量为（13.03±0.63） mg/g,与预测值12.42 mg/g接近,粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的MIC值分别为50、100 mg/mL,由此表明,响应面模型与实际情况拟合良好,能较好地预测海蓬子外种皮多糖的提取量,海蓬子外种皮粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑制作用。     

沙葱总黄酮提取工艺优化及其体外抗氧化、抗菌作用

在单因素试验的基础上,采用响应面方法对纤维素酶辅助提取沙葱总黄酮的工艺参数进行优化,得到最优工艺条件为提取时间4 h、提取温度39 ℃、体系pH 4.3,沙葱总黄酮提取量为5.48 mg/g。通过体外抗氧化及抗菌实验得出,此条件下提取所得沙葱总黄酮具有较好的总还原能力、体外清除DPPH自由基及清除羟自由基的能力,对沙门氏菌具有较好的抑制作用,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱,对绿脓杆菌无抑制作用。     

微波对山苍子油化学成分的影响及其抑菌活性研究

研究微波对山苍子油化学成分的影响及其抑菌活性。采用水蒸气蒸馏（steam distillation,SD）法和微波辅助水蒸气蒸馏（microwave assisted steam distillation,MASD）法提取山苍子油,气相色谱-质谱法分析山苍子油的化学成分,采用滤纸片法测定山苍子油的抑菌活性,并对其抑菌机理进行探讨。两种方法提取的山苍子油中,橙花醛（SD：14.82%,MASD：11.50%,以上数据为相对含量,下同）、香叶醛（SD：17.95%,MASD：13.90%）、柠檬烯（SD：10.80%,MASD：5.57%）、α-松油醇（SD：5.70%,MASD：9.05%）、桉树脑（SD：7.11%,MASD：12.88%）和芳樟醇（SD：8.44%,MASD：12.65%）的含量发生了明显变化,微波作用下,单萜类化合物之间发生了化学转化。抑菌活性实验结果表明,山苍子油具有较好的抑菌活性,对黑曲霉和根霉的抑制活性优于对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的,山苍子油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和根霉的最小抑菌质量浓度分别为3.12、6.25、1.56、3.12 mg/mL。山苍子油能够破坏菌体细胞膜结构,增加细胞膜通透性,从而抑制其生长。     

大籽蒿精油化学成分及其抗菌抗氧化活性

采用水蒸气蒸馏法提取采自西藏地区藏药大籽蒿的精油,通过气相色谱-质谱联用技术分析鉴定其化学成分,采用峰面积归一化法确定各成分的相对含量;并对大籽蒿精油体外抑菌能力和抗氧化能力进行测定。大籽蒿精油中共鉴定48 种化合物,占精油总量的95.36%,主要成分为红没药醇、兰香油奥、α-水芹烯、棕榈酸和薰衣草醇等;体外抑菌结果表明,大籽蒿精油对枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌和新型隐球菌具有较强的抑菌效果,而对大肠杆菌具有较弱抑菌效果;体外抗氧化活性结果表明大籽蒿精油对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基和羟自由基具有一定的的清除能力,且清除效果强于VC。     

芜菁子挥发油、多糖的组成及挥发油抗菌活性的研究

目的用3种方法提取芜菁子挥发油,对挥发油的抗菌作用进行定性和定量分析,并对芜菁子挥发油及多糖的组成进行分析。方法采用水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法和同时蒸馏萃取法提取芜菁子挥发油,气相色谱-质谱联用法分析挥发油的组成。运用滤纸片扩散法和二倍稀释法检验芜菁子挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑菌作用。利用水提醇沉法提取残渣中的多糖,酸水解后进行薄层分析。结果 3种方法提取的挥发油分别鉴别出21、7、14种成分。水蒸气蒸馏法提取挥发油中异硫氰酸酯类化合物占45.95%,同时蒸馏萃取法的为31.35%,溶剂萃取法提取挥发油无异硫氰酸酯类化合物。定性定量的抑菌实验结果显示,3种方法所得的挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均有良好的抑制作用,水蒸气蒸馏法提取的挥发油的抑菌效果最好。在高效G板上,以乙酸乙酯:异丙醇:水=26:14:7(V:V:V)为展开剂,芜菁子多糖的分离效果较好,可鉴别出芜菁子多糖中的果糖和半乳糖。结论芜菁子挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有一定的抑制作用,可能与其中含有异硫氰酸酯类和腈类化合物有关。     

北五味子叶多糖的提取及抑菌活性

采用水提醇沉法,通过单因素和正交试验研究北五味子叶多糖(polysaccharides from Schisandra chinensis
(Turcz.) Baill leaves,PSL)的提取工艺,并考察PSL对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。结果表明：PSL最适宜提取工艺条件为料液比1:45(g/mL)、提取温度90℃、提取时间1h、提取2次。在此条件下,PSL的提取率为9.08%。用Sevag法对PSL进行初步提纯,用UV光谱检测脱蛋白效果,发现该法不能有效去除其所含的蛋白质,而且经Sevag法处理后的PSL色泽变黑。同时,利用红外光谱法对PSL进行表征,证明其具备一般多糖类物质及肽键的光谱特征,说明该多糖可能是以共价键与含肽键的蛋白质或多肽结合的糖复合物。抑菌实验结果表明,PSL对3种细菌具有一定的抑制活性。     

油橄榄叶中橄榄苦苷的体外抗氧化和抑菌活性

采用总抗氧化能力法和总还原能力法测定橄榄苦苷体外抗氧化活性,以滤纸片法考察橄榄苦苷对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性,稀释法分析橄榄苦苷对3 种细菌生长曲线的影响和最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。结果显示：橄榄苦苷在0.02～0.08 mg/mL范围内与2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚相比始终表现出强的总抗氧化能力和总还原能力;橄榄苦苷对3 种细菌生长曲线的影响表现为延缓细菌的对数生长期;在研究质量浓度范围内橄榄苦苷对大肠杆菌抑制作用最强,10 mg/mL时其抑菌圈直径d＝（20.77±0.47）mm,为极度敏感,MIC为0.025 mg/mL;金黄色葡萄球菌为高敏感（d＝（19.23±0.44）mm＞15 mm）,MIC为0.05 mg/mL;而枯草芽孢杆菌处于中度敏感状态（d＝（11.48±0.60） mm＜15 mm）,MIC为0.4 mg/mL。结果表明,橄榄苦苷具有极强的抗氧化和抑菌活性。     

油菜蜂花粉醇提物中抑菌活性物质的研究

本实验选用我国产量最高的油菜蜂花粉为原料,采用牛津杯法测定油菜蜂花粉乙醇提取物中甲酸提取组分对常见食品污染微生物的抑制效果。结果表明：0.5% 甲酸提取组分具有较强的抑菌作用,对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为25、50、50、100mg/mL;经HPLC分析表明乙醇提取物中甲酸提取组分抑菌有效成分可能为弱极性物质。