发酵法生产衣康酸技术的研究—衣康酸生产菌株的选育（I）

以实验室保藏菌种土曲霉No.201为出发菌株，经餐外线，亚硝基胍（NTG），高温，硫酸二乙酯（DES）诱变处理和多次分离获得一支性能稳定的衣康酸高产突变株土曲霉HAT418，36℃摇瓶发酵72h，衣康酸产量72.1g/L，糖酸转化率60.08%，发酵条件优化后，在含糖120～160g/L的培养基上，产酸81.4～101.1g/L，糖酸转化率63.18%～67.83%，发酵液经高压液相色谱分析，衣康酸占总酸的98.6%。     

发酵法生产衣康酸技术的研究——衣康酸生产菌株的选育(Ⅰ)

以实验室保藏菌种土曲霉No .2 0 1为出发菌株 ,经紫外线、亚硝基胍 (NTG)、高温、硫酸二乙酯 (DES)诱变处理和多次分离获得一支性能稳定的衣康酸高产突变株土曲霉HAT418,36℃摇瓶发酵 72h ,衣康酸产量 72 1g/L ,糖酸转化率 60 0 8%。发酵条件优化后 ,在含糖 12 0～ 160 g/L的培养基上 ,产酸 81 4～ 10 1 1g/L ,糖酸转化率 63 18%～ 67 83%。发酵液经高压液相色谱分析 ,衣康酸占总酸的 98 6%。     

发酵法生产衣康酸技术的研究（Ⅰ） 衣康酸生产菌株的选育

以实验室保藏菌种土曲霉No．201为出发菌株，经紫外线、亚硝基胍(NTG)、高温、硫酸二乙酯(DEs)诱变处理和多次分离荻得一支性能稳定的衣康酸高产突变株土曲霉HAT418，36℃摇瓶发酵72小时，衣康酸产量72，1g/L，糖酸转化率60．08％。发酵条件优化后，在含糖120—160g/L的培养基上，产酸81．4—101．1g/L，糖酸转化率63．18—67．83％。发酵液经高压液相色谱分析，衣康酸占总酸的98．6％。     

农用废弃物固态发酵生产衣康酸工艺研究

以土曲霉AS32811为发酵菌种,农用废弃物麸皮7.5g,玉米芯6.0g为出发培养基,在自然pH值条件下采用单因素试验研究碳源、氮源、无机盐对衣康酸产酸效果的影响。结果显示,该菌可以利用实验所选择的碳源生产衣康酸,葡萄糖为碳源时得率最高;氮源实验结果表明,NH4NO3是最适的产酸氮源。在单因素试验的基础上进行了五因素四水平的正交试验以优化产酸工艺。衣康酸生产的优化条件为:250mL三角瓶中加入玉米芯7.5g、麸皮6.0g、葡萄糖4g、营养液25mL(NH4NO3,4g/L;KH2PO4,0.1g/L;MgSO4,6g/L;C6H12O6,4g;ZnSO4.7H2O,0.015g/L),接种量为1mL(1×107孢子/mL)、温度36℃、湿度为65%条件下自然发酵72h,衣康酸产率可达63.5%。以土曲霉AS32811为发酵菌种,农用废弃物麸皮7.5g,玉米芯6.0g为出发培养基,在自然pH值条件下采用单因素试验研究碳源、氮源、无机盐对衣康酸产酸效果的影响。结果显示,该菌可以利用实验所选择的碳源生产衣康酸,葡萄糖为碳源时得率最高;氮源实验结果表明,NH4NO3是最适的产酸氮源。在单因素试验的基础上进行了五因素四水平的正交试验以优化产酸工艺。衣康酸生产的优化条件为:250mL三角瓶中加入玉米芯7.5g、麸皮6.0g、葡萄糖4g、营养液25mL(NH4NO3,4g/L;KH2PO4,0.1g/L;MgSO4,6g/L;C6H12O6,4g;ZnSO4.7H2O,0.015g/L),接种量为1mL(1×107孢子/mL)、温度36℃、湿度为65%条件下自然发酵72h,衣康酸产率可达63.5%。     

淀粉水解程度对土曲霉发酵生产衣康酸的影响

将玉米淀粉进行酸水解和酶水解,水解液作为土曲霉At394的碳源进行发酵.水解程度直接影响到衣康酸产量,适宜水解糖的DE值为35%.发酵培养基配方为淀粉液化水解糖(DE值为35%)100g/L,NH4NO3 3g/L,MgSO4·7H2O 4g/L,玉米浆2g/L,KH2PO4 0.2g/L,pH3.0.在最适条件下,摇瓶发酵衣康酸产量可达54.1 g/L,糖酸转化率为59.2%.     

马铃薯淀粉产衣康酸发酵培养基的优化

以马铃薯淀粉为原料,利用土曲霉XL-6发酵生产衣康酸,并对发酵培养基组分进行优化。在单因素基础上,采用Plackett-Bur-man设计法从诸多因素中筛选出显著因素,通过响应面分析方法对其进行优化,建立衣康酸产率的二次多项式回归模型。试验结果表明,在最佳发酵培养基:碳源浓度130g/L,玉米浆2.14g/L,MgSO4.7H2O 2.19g/L,KH2PO4 0.14g/L,NH4NO3 3g/L,FeSO4.7H2O 0.10g/L,衣康酸产率达到7.04%。验证试验的实测值与预测值基本一致,说明模型可较好的反映实际情况。     

发酵法生产衣康酸的工艺条件研究

以土曲霉TN-474为出发菌株,研究探讨了衣康酸发酵工艺条件对产酸的影响。通过试验优化培养基组成及发酵条件为:工业葡糖140g/L,NH4NO33.0g/L,玉米浆干粉0.2g/L,KH2PO40.05g/L,MgSO4.7H2O 0.5g/L,CuSO4.5H2O 65mg/L,初始pH2.0,接种量为10%~12%,装液量为60mL~80mL;在37℃、220r/m in的条件摇瓶发酵144h,土曲霉TN-474发酵衣康酸的产率达到71.83g/L,转化率为56.7%。     

衣康酸发酵工艺的初步研究

以土曲霉为出发菌株,探讨了衣康酸发酵工艺条件对产酸的影响。结果表明：以葡萄糖为碳源,ＮＨ４ＮＯ３为氮源,玉米浆为辅助碳源有利于提高产酸。Ｍｇ２＋能促进菌体生长和发酵产酸,Ｐｂ２＋和Ａｌ３＋抑制菌体生长及产酸。Ｍｇ２＋可以解除Ｐｂ２＋和Ａｌ３＋对产酸的抑制作用。Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋等对产酸影响不明显。     

低桔霉素红曲色素液态发酵工艺的研究

研究了碳源、氮源和Mg2+对高产色素低桔霉素红曲霉M onascus sp.sjs-3产色素和桔霉素的影响,确定了液态发酵最优培养基为玉米淀粉50g/L,大豆3g/L,ZnSO·47H2O0.5g/L,CaCl20.1g/L,K2H PO45g/L,K H2PO45g/L,M nSO4·H2O0.3g/L,FeSO·47H2O0.01g/L,发酵192h时,菌体色素产量达到最高,胞内的红色价为173U/mL,未检出桔霉素。     

离子注入选育高产衣康酸菌株及其发酵条件优化研究

采用低聚氮离子束注入衣康酸生产菌株土曲霉ZJB－04173,获得一株衣康酸产量提高的突变株HA90,该菌株在出发培养基37cC℃。PLackett-Burman实验结果表明葡萄糖,硝酸铵和硫酸镁对菌种产酸有显著的影响。然后利用Box—Behnken设计及响应面分析确定这三个主要因素最佳浓度。在优化后的培养基中进行发酵,产酸量最高达到84g／L,比出发菌株提高了50％。     

米曲霉UC6-90产曲酸的发酵培养基优化

对米曲霉UC6-90产曲酸的培养基进行优化,分别研究碳源、氮源、无机盐对曲酸产量的影响。通过响应面方法确定曲酸发酵最佳发酵培养基为：玉米淀粉14.44%,豆饼粉0.50%,KH2PO40.40%,MgSO40.10%,pH6.0。经7d发酵曲酸产量达到45.2g/L,比原来产量提高13%。     

融合子F3产衣康酸的培养基组成及摇瓶发酵条件的优化

对直接利用生淀粉发酵产衣康酸的融合子F3的发酵条件进行了研究。得到较佳培养基组成及发酵条件为:玉米淀粉110g/L,NH_4NO_3 3.0g/L,玉米浆2.5mL/L,MgSO_4·7H_2O1.5g/L,CuSO_4·5H_2O2.0 mg/L,初始pH3.0～3.5,摇瓶装液量80mL/500 mL三角瓶,接种量10%(种龄44h),34℃振荡(220r/min)培养140h。在此条件下,F3衣康酸产率达到45.3g/L,比优化前提高了4.4g/L;对供给淀粉的转化率达41.2%。     

衣康酸生产工艺条件优化研究

利用正交试验法对土曲霉发酵生产衣康酸工艺条件进行研究,获得了较优越的工艺条件,使衣康酸得率提高到43.8g/L。     

洛伐他汀菌种发酵配方的正交试验

为了确定洛伐他汀发酵培养基的最佳发酵培养基配方,提高发酵水平,先通过单因素试验筛选出最佳碳源和氮源,以及碳源,氮源和无机盐的最佳浓度,再通过正交设计筛选出最佳的发酵培养基配方组合,研究发现土曲霉PF7-15-40的发酵培养基最佳配方是淀粉3.5%,黄豆饼粉4.25%,柠檬酸钠0.10%,磷酸二氢钾2.0g/L,在该条件下洛伐他汀的产量最高。     

糖质原料直接发酵生产L-苹果酸的工艺条件

以黄曲霉HA5 80 0为出发菌株 ,研究探讨了不同碳源、氮源、无机盐类以及温度等因素对糖质原料直接发酵生产L 苹果酸的影响 ,产L 苹果酸突变株黄曲霉HA5 80 0适合于多种原料的L 苹果酸发酵 ,如液化淀粉、脱脂玉米粉、葡萄糖、淀粉水解糖等 ;氮源以玉米浆与硫酸铵配合使用为最佳 ;实验中确定了较优培养基组成和发酵工艺条件 ,适宜的发酵温度为 34～ 36℃ ;向培养基中添加CaCO3 是L 苹果酸有效积累的必要条件 ,初糖控制在 10 0～ 12 0 g/L时 ,适宜的CaCO3 用量为70～ 80 g/L ,L 苹果酸产率达 80～ 90g/L。     

调控Streptomyces sp菌株生长、代谢提高纳他霉素产量的研究

本文研究了不同碳源、氮源、培养基起始pH和D.O值等对Streptomyces sp菌株生长、代谢提高纳他霉素(Natamycin)产量的影响,用正交试验确定了该菌株的最佳培养基配方为:2%的葡萄糖,3%的玉米淀粉,2%的大豆蛋白胨,0.5%的酵母粉,并确定了该菌株产纳他霉素的最佳pH、D.O值以及糖、氮比例,在50升发酵罐中纳他霉素产量高达6.6g/L。     

产低温淀粉酶海洋细菌HYM-7发酵条件研究

采用平板初筛和摇瓶复筛等方法,从秦皇岛渤海海域的海水样品中,分离获得产淀粉酶活力较高的菌株HYM-7,初步鉴定为解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus.amylolyticus),设计单因素和正交实验,确定该菌的最佳发酵条件.结果表明:在装液量50mL液体培养基的250mL三角瓶中,采用单因素实验得最佳接种量为1%,最适产酶时间为48h,最适碳源为玉米淀粉,氮源为大豆粉,Ca2+和Mg2+可显著提高产酶量;采用正交实验得最适发酵培养基配方(g/L):玉米淀粉4、大豆粉10、可溶性淀粉2、MgSO4 0.2、CaCl2 0.4.对优化的发酵培养基进行验证,测得酶活力为34.62U·mL-1,较基础培养基酶活提高60.8%.     

发酵法生产衣康酸——高产菌株的选育

以生产使用菌种土曲霉NLYT234为出发菌株,经紫外线、高温、氯化锂诱变处理和多次分离、筛选获得一支性能稳定的衣康酸高产突变株土曲霉NLYT-2—801,在含淀粉糖140g／L的培养基上40-42℃摇瓶72hr,衣康酸产量92．1g／L,糖酸转化率63．18％-67．83％。经100m^3发酵罐生产验证,菌种诱变后酸度较以前上升21％,糖酸转化率上升一个百分点以上。     

复合诱变对米曲霉2336产酸量的影响

以米曲霉(Aspergillus oryzae)2336为出发菌株,经紫外线、60Co复合诱变处理,采用快速筛选法获得不产黄曲霉毒素的曲酸高产菌株UC690,以玉米淀粉为碳源,发酵7d,曲酸产量由原来的12.34g/L提高到50.47g/L。经遗传稳定性试验,这一变异菌株可应用于工业化生产。     

利用水解淀粉高产衣康酸菌株的诱变育种

利用葡萄糖产衣康酸的土曲霉为出发株,通过紫外、Co^60等诱变方法的处理,筛选得到能利用部分水解的不溶性淀粉的菌株。同时研究诱变剂的处理剂量、致死率;并进行产酸情况的测定,糖的利用率和传代稳定性的研究。最后得到几株能够高产的土曲霉菌株。其中FZ—12—4菌株产酸率达到6．30g／100ml,产酸率比出发菌株提高45％。