桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、^1H—NMR、^13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14．2×10^3,22．2×10^3的多糖PL—A及蛋白聚糖PL—B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71％,蛋白质占7％;PL—A,PL—B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL—B中还有部分鼠李糖;PL—B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL—B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

草菇多糖VVP-1b的分离纯化及其光谱分析

从草菇子实体中提取水溶性粗多糖,经脱蛋白、脱色、DEAE-Sepharose F.F和Superdex-200柱层析,分离纯化得到一种水溶性草菇多糖组分VVP-1b。采用液相色谱、紫外光谱、红外光谱等光谱方法对其部分理化性质和结构进行测定。结果表明:VVP-1b为均一组分,具有明显的多糖特征峰,含有β-吡喃糖苷键;其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为88.7%、7.8%、27.6%,相对分子质量为5.84×105;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=4.0∶1.0∶1.4∶35.4。因此VVP-1b是一种均一的具有β-吡喃糖苷键的酸性多糖。     

桑黄子实体多糖提取工艺及单糖组成研究

通过单因素实验和正交实验,从提取温度、料液比、提取次数、提取时间四个方面研究多糖提取条件,得出最佳条件为:提取温度95%,料液比1:50,提取次数2次,提取时间2h.运用薄层色谱和气相色谱分析单糖组成,日本桑黄(R)子实体多糖单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖;韩国桑黄(H)子实体多糖单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖.     

桑黄多糖提取过程模型的建立与动力学分析

基于超声波辅助提取中药材中化学成分的非稳态扩散过程,根据Fick第二定律建立桑黄子实体多糖的超声波协同纤维素酶法提取过程的动力学模型。以桑黄子实体为原料,分别对桑黄多糖的热水提取和超声法协同纤维素酶提取过程建立动力学模型,并对模型进行试验验证,求解相应的动力学参数;得到速率常数、活化能、相对萃余率等一系列动力学参数。研究结果显示试验数据与动力学模型计算值吻合良好,可为桑黄多糖提取工艺放大和深入理论研究提供一定的依据。     

杏鲍菇碱溶性多糖的酶法提取及其结构的初步分析

以杏鲍菇子实体为原料提取并分离纯化,得到碱溶性多糖组分,通过采用正交实验得到了提取碱溶性多糖的最佳方案。该多糖经层析方法和Smith降解等反应,证实其为单一组分,该组分多糖由葡萄糖为单一糖基组成;并证实了该多糖具有β(1→3)及β(l→6)连接的糖苷键。     

桑黄菌丝体与子实体成分的比较分析

为进一步开发和利用桑黄（Phellinus igniarius）,通过发酵获得桑黄菌丝体,并对桑黄子实体和菌丝体的一般营养成分及主要功能成分含量进行分析比较,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率和对SW620、HepG2肿瘤细胞的抑制率进行主要成分活性的比较。结果表明,桑黄菌丝体和子实体均含有蛋白质、多糖、氨基酸、脂肪、纤维、矿物元素等多种营养成分,其组成基本一致。主要营养成分中,桑黄菌丝体中水分、灰分含量显著低于桑黄子实体（P＜0.05）,粗纤维含量极显著低于桑黄子实体（P＜0.01）,而粗蛋白、粗脂肪含量极显著高于子实体（P＜0.01）;在所测定的17 种氨基酸中,二者氨基酸种类一致,菌丝体氨基酸总量为25.11%,子实体氨基酸总量为4.69%;多糖、黄酮、三萜3 种活性成分在桑黄子实体中含量极显著高于菌丝体（P＜0.01）,其中子实体多糖、黄酮、三萜DPPH自由基最高清除率分别为77.14%、61.37%、49.97%;桑黄菌丝体、子实体多糖对结肠癌SW620细胞的抑制率最高可达21.45%和32.86%,对肝癌HepG2细胞的抑制率最高可达37.91%和51.29%。这些结果进一步说明桑黄菌丝体和子实体营养成分组成基本一致,含量丰富,液体发酵所得菌丝体可以缓解野生桑黄子实体匮乏的局面,具有同样的应用价值和开发前景。     

杏鲍菇子实体多糖的分离纯化及结构研究

从杏鲍菇子实体中分离出纯化杏鲍菇子实体多糖,并对其结构进行研究。利用水提醇沉法从杏鲍菇子实体中提取粗多糖;采用离子柱层析和凝胶柱层析分段洗脱对其进行分离纯化,得到纯化的杏鲍菇子实体多糖PEPSC1,通过HPLC检测其为单一组分,分子质量为1.77×106Da;经糖组成分析、甲基化分析,PEPSC1由甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比为1∶10.3,PEPSC1的结构主要以1,6葡萄糖为主链,葡萄糖为侧链,并且含有少量的1,6连接的甘露糖。     

桑黄发酵菌粉与桑黄子实体成分分析比较

对桑黄子实体和发酵菌粉的氨基酸、脂肪酸、矿物元素以及多糖等主要活性成分的含量进行了分析比较。结果表明,桑黄子实体和发酵菌粉均含有17种氨基酸,均以谷氨酸含量最高,必需氨基酸中都以亮氨酸含量最高。优势脂肪酸均为不饱和脂肪酸,且均以油酸,亚油酸为主。桑黄子实体和发酵菌粉中都含有人体必不可缺的钙、铁、锌等8种矿物质元素。都含有丰富的多糖、黄酮类化合物和酚类物质,桑黄子实体中的多酚类物质含量是发酵菌粉的3.91倍,为37.52 mg/g;但发酵菌粉中的粗多糖含量是子实体的22.48倍,为94.20 mg/ g。     

不同破壁技术对桑黄功能性成分提取率的影响

以桑黄干燥子实体为原料,比较普通粉碎、双螺杆挤压膨化和流化床对撞式气流超微粉碎对桑黄颗粒粒径、形貌和功能性成分提取的影响。结果表明,与普通粉碎相比,双螺杆挤压膨化和流化床对撞式气流超微粉碎细胞破壁彻底,平均粒径（D50）分别为7.44 μm和5.53 μm,粉碎后的桑黄粉对黄酮、多酚、粗多糖的提取率分别比普通粉碎提高60.4%、73.4%、72.8%和53%、69.5%、68%,普通粉碎样品的功能性成分提取不完全。     

六种不同树种桑黄有效成分的比较

比较6 种生长在不同树种上的桑黄子实体多糖、黄酮及总三萜含量。结果表明,不同树种桑黄子实体有效成分含量差异较大,桑树桑黄子实体多糖、黄酮及三萜含量均高于其他树种,分别为3.84%、5.12% 和2.2%;暴马丁香树桑黄子实体多糖含量最低为1.35%,白桦树桑黄子实体黄酮、总三萜含量均最低,分别为0.68%、0.32%。     

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及理化性质分析

研究桑黄粗多糖的分离和纯化工艺,并对多糖组分进行理化性质分析。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到两个组分P-47000和P-8700;经高效液相色谱分析证明,两组分均为纯品,且不含蛋白质、核酸,为非淀粉类多糖,分子质量分别为4.74×104D和8.71×103D,均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成,P-47000中各单糖物质的量比为3.47:1.99:1:63.27:13.44,P-8700中各单糖物质的量比为10.46:1:1.03:182.75:30.94。     

大庆地产板蓝根总多糖含量及摩尔质量分布测定

提取板蓝根多糖并测定其含量和摩尔质量分布。板蓝根生药粉经石油醚脱脂和95%乙醇多次回流提取(得到模拟板蓝根制药残渣)后,再用水提取多糖,用苯酚-硫酸法测定提取液中的多糖含量,以中空纤维膜分离除杂后的板蓝根多糖提取液并测定各分离液中多糖含量,计算多糖摩尔质量分布。结果表明：板蓝根生药粉中醚溶和醇溶物质质量分数为4.89%;连续水提3次、提取温度95℃、每次1.5h,第1次提取料液比为1:9(g/mL),后两次均为1:7(g/mL),3次提取多糖得率分别为7.34%、4.65%和3.12%,总得率15.11%;生药粉直接水提3次,多糖得率分别为6.51%、6.04%和5.69%,总得率18.24%;板蓝根多糖摩尔质量主要分布在2×104～5×104g/mol之间,摩尔质量在1×104～1×105g/mol范围内的质量分数为90.8%。大庆地产板蓝根中多糖含量丰富。多糖摩尔质量分布的测定方法简便、可靠,避免了反复分离、提纯带来的繁琐操作和实验误差。     

桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性

研究液体发酵桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换柱层析分离分级得到多个级分,以较大分子质量的中性多糖为主。凝胶渗透色谱分析表明桑黄菌胞内多糖的重均分子质量范围为5.7×103～6.1×106D,由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,其分子物质的量比为15:4:1,多糖含量为41%,特性黏度为12mL/g。通过体外抗氧化模型,发现桑黄菌胞内多糖均能较好的清除 ·OH、O2－ ·和螯合Fe2+,且对O2－ ·具有明显的清除作用。     

黄梨渣多糖的提取、分离纯化和结构鉴定

研究黄梨渣中多糖提取、分离纯化的方法,并对其相对分子质量、单糖组成及其基本结构进行初步分析。结果表明：超声辅助提取法的最优条件为料液比1∶13（g/mL）、超声时间60?min、超声功率132?W、超声温度57?℃,此条件下的多糖提取量最高,为62.375?mg/g。Sevag法与木瓜蛋白酶联合去除蛋白的方法效果最佳,蛋白脱除率和多糖损失率分别为75%和24.71%,工艺操作简易、省时,最大限度去除蛋白质的同时可保证多糖得率。H2O2法脱色率最高达78.56%,且多糖损失率最低仅为25.86%。DEAE-52纤维素柱层析纯化后得到梨渣多糖的主要成分为LPB-C组。经测定,LPB-C组的黏均分子质量为8.47×104?g/mol,由甘露糖、葡萄糖、鼠李糖、木糖4?种单糖组成,物质的量比为3.3∶2.3∶10.6∶23.2,是一种含有β糖苷键的吡喃型多糖。该研究为今后黄梨渣的进一步开发和利用提供一定参考。     

超声波复合酶法提取桑黄多糖研究

采用单因子分析和正交试验,以桑黄菌丝体提取物中多糖得率为指标,对超声波复合酶法中影响多糖提取效果的主要因素进行研究。结果表明：超声波提取优化工艺条件为超声处理时间20min、料液比1:25(g/mL)、功率500W,在此基础上提取多糖得率为3.356%,在超声波优化结果基础上,进一步进行复合酶法处理,酶解最佳提取条件是pH6.5,酶解温度50℃,纤维素酶添加量2.5%、果胶酶添加量2.5%、蛋白酶添加量1%,酶解时间120min,多糖得率为6.619%,由此可见,超声波和复合酶法双重处理提取桑黄多糖是一种有效的提取方法,适合大规模生产运用。     

利用SAS软件优化桑黄发酵培养基

利用SAS软件对桑黄菌的发酵培养基进行研究。首先,运用Plackett-Burman设计法筛选出影响粗多糖产量的主要因素,继而采用中心组合设计及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度。通过试验发现,当豆饼粉3.7%、玉米浆0.6%、CaCl20.27%时,胞外粗多糖产量达到最大值6.78g/L,较优化前的5.24g/L提高了29.4%。另外还对其胞外多糖含量、分子质量进行了测定。