小麦粉中植物酯酶提取、纯化及应用研究

从小麦粉中提取植物酯酶,用70%饱和硫酸铵对植物酯酶进行纯化,酶催化反应温度在45℃、pH4.5~5.5时酶活性最大,酶催化反应动力学显示10m in内反应呈线性关系。利用有机磷农药能抑制植物酯酶酶促反应的机理,建立了快速测定粮食中有机磷农药残留的方法。测定有机磷农药残留反应体系最大吸收峰是在480nm之间,最适乙酸-β-萘酯用量为1.0mL;在农药浓度在0.1~1.0mg/kg之间时,所到之处得到的吸光值与农药浓度呈线性相关;在青菜汁、茶叶汁和大米提取液回收率分别为89%、84%和93%。     

豌豆酯酶的纯化和酯酶活性表征及其对农药的敏感性

由于食品和环境中的农药残留对人体健康构成威胁,使得发展农残快速检测方法显得十分重要,从植物中发现新的酶源有助于降低酶抑制法快速检测农药的成本。实验从豌豆中分离纯化豌豆酯酶,并进行了酶类鉴别、特性表征和农药敏感性研究。纯化后的豌豆酯酶分子质量约为26. 0 k Da,具有较高的酯酶活性。通过底物和抑制剂特异性试验,将豌豆酯酶分类为羧酸酯酶。豌豆酯酶在质量浓度为0. 45μg/m L,缓冲液p H 6. 5和反应温度40℃时,表现出最好的催化活性。豌豆酯酶可以被有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制。豌豆酯酶属于B型酯酶,可用于酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留,且经过纯化的豌豆酯酶满足大多数农药最大残留限值(MRL)检测的要求。     

基于MnO2纳米片类氧化酶特性的有机磷农药荧光分析方法建立

利用MnO2纳米片类氧化酶特性并结合有机磷农药的酶抑制原理,构建一种快速、简便、高灵敏有机磷农药荧光分析方法。通过测定反应体系荧光强度前后的变化,可以检测样品中有机磷农药的含量。通过优化酶浓度、底物浓度和反应时间,发现乙酰胆碱酯酶浓度为9.375 U/L,底物浓度为10 mmol/L,反应时间为11 min时,该荧光分析方法检测性能最佳,对氧磷的动态检测范围为1.56～200 ng/mL,检出限达到0.5 ng/mL（RSN=3）,运用该方法测定标准添加的自来水、卷心菜、燕麦样品的回收率在83.4%～105.9%之间,表明该方法具有很高的灵敏度与准确性,为快速高灵敏测定有机磷农药提供一种新的可能。     

基于硫代胆碱调控SERS基底检测茶叶中痕量氧乐果

以维多利亚蓝B(victoria blue B,VBB)为探针分子，利用表面增强拉曼散射(surface enhanced Raman scattering,SERS)结合酶催化反应构建氧乐果快速检测方法。结果表明，在水浴温度为37℃，将乙酰胆碱酯酶活化15 min，再进行酶催化反应15 min，反应后静置10 min，滴加金纳米溶胶后再静置15 min，在检测体系中乙酰胆碱酯酶、碘化乙酰硫代胆碱、金纳米溶胶、VBB的浓度分别为5μg/mL、5μmol/L、0.195μg/mL、0.25μmol/L条件下，建立的检测体系在1 614 cm^-1处的SERS吸收峰值△I与3.5 ng/L～403.5 ng/L的氧乐果浓度呈良好的线性关系，相关系数为R2=0.995 8，检出限为1.90×10-4ng/L。当常见离子和农药在体系中共存时，对氧乐果的测定不产生干扰，说明体系稳定性良好。加标回收率为99.02%，相对标准偏差为1.17%。     

电位法快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药灵敏度的研究

以黄豆中提取的植物酯酶为检测用酶,根据酶抑制反应前后ΔpH变化,建立了电位法快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的方法。测定了20种有机磷及9种氨基甲酸酯类农药的灵敏度,经与国家规定的最大残留限量(MRL)相比较,有28种农药的最低检测限(LDC)可达到MRL限值要求。     

茶鲜叶中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法

拟除虫菊酯农药用量少,杀虫效果好,广泛应用于茶园害虫的控制,是我国出口茶叶中必检的农药。为实现茶叶生产危害分析关键控制点(HACCP)体系中农药残留的源头控制,提供农残源头监督检验方法依据,避免大量使用农药对茶园土壤环境造成的污染,开发茶鲜叶中菊酯类农药的多残留检测方法有重要的实践意义。本实验用V(石油醚)∶V(丙酮)=1∶1混合溶剂提取,经弗罗里硅土柱层析净化除去干扰物质,采用气相色谱,微电子捕获检测器(μECD)测定茶鲜叶中主要的6种拟除虫菊酯类农药残留量。方法最低检出浓度为0.005～0.01mg/kg;茶鲜叶中拟除虫菊酯农药的添加浓度为0.05、0.2、1.0mg/kg,其回收率在83.6%～104.5%,相对标准偏差(RSD)为2.7%～10.2%,符合农药残留分析要求。     

固相萃取-气相色谱质谱法测定茶叶中11种农药残留量

目的建立固相萃取-气相色谱质谱联用法测定茶叶中11种农药残留量的分析方法。方法茶叶样品中的农药残留经丙酮提取,无水硫酸镁除水,采用Carbon/NH_2固相萃取柱在线净化与富集,DB-17MS毛细管柱分离检测,多离子反应模式,外标法定量。结果在20～200 mg/L的浓度范围, 11种农药残留均与其对应的峰面积呈线性关系,方法的检出限(S/N=3)在0.001～0.018 mg/kg之间。以空白样品为基体进行加标回收实验,所得回收率在72.0%～93.2%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.35%～6.34%之间。结论该方法准确度较高、稳定性较好、检出限低,适用于茶叶样品中有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯和杀菌剂等多组分农药残留量的同时测定。     

植物酯酶法检测有机磷农药的敏感性和检测限的研究

采用本室自制的植物酯酶,对19种有机磷农药进行了敏感性试验,并测定了该酶对这19种有机磷农药的最低检测限(LOD)。研究表明,所制备植物酯酶对受试的18种有机磷农药均有良好的敏感性,且最低检测限远低于国家规定的最大残留限量(MRL),因此,该酶可作为有机磷农药残留检测用酶。     

农药生物传感器所用酶的比较研究

在利用农药对酶的抑制反应来检测农药的方法中，选用的酶既可以是动物酯酶，也可以是植物酯酶。本文采用分光光度计法，对植物再生产 动物酯酶在不同pH值下的酶活，抑制程度等性质进行了实验研究。结果表明：动物酯酶中的苍蝇酶，蝇蛆酶与植物酯酶中的小麦酯酶相比，它们的活力和被农药抑制程度处于相近的;植物酯酶中小麦与玉米相比，玉米酯酶的活力远低于小麦酯酶的活力，不适于用来进行抑制反应检测农药。动物酯酶在pH值为7．5时活力最高，小麦酯酶在pH值6．5时最高。     

兔血清乙酰胆碱酯酶用于农药残留速测的最佳条件研究

研究了磷酸缓冲液pH值、反应时间、反应温度、底物、酶量对兔血清乙酰胆碱酯酶(AChE)活力测定的影响,结果表明,供试AChE活力最佳条件是:磷酸缓冲液(pH8.0)3.0ml,显色剂0.6%二硫双对硝基苯甲酸(DTNB)50μl,0.75%酶液(pH8.0)100μl,反应温度35℃,混匀稳定后加入底物1%碘化硫代乙酰胆碱(BTCI)50μl,反应180s后在412nm处测定光密度。在上述条件下,测定表明有机磷杀虫剂丙硫磷(Prothiofos)浓度在0.0125～0.4μg/ml,保育时间5～30min之间与AChE抑制率之间存在良好的相关性,可根据检测需要调整保育抑制时间。本试验结果将为应用兔血清AChE研制、改进有机磷和氨基甲酸酯类农药残留速测卡,实现农产品、食品农药残留快速检测提供重要参考。     

蔬菜中有机磷农药残留的两种酶抑制快速检测方法的比较研究

本实验比较了快速测定蔬菜中有机磷农残的两种酶抑制法即胆碱酯酶抑制法和植物酯酶抑制法，通过正交实验优化了两种酶抑制法的测定条件。对实际蔬菜样品的磷农残测定结果表明：这两种酶抑制快速测定方法均可用于蔬菜中有机磷农残的测定，其加标回收率都达到85％以上。但植物酯酶法测量精密度较好(3％以下)，酶源易得，提取、保存方便，在有机磷的快速测定中有更广泛的应用价值。     

基质固相分散-气相色谱法测定蔬菜中的甲胺磷

建立了弗罗里硅土-石墨化炭黑的基质固相分散样品前处理法,并将该方法用于不同蔬菜中甲胺磷的残留分析,GC-NPD分析检测。对固相分散剂、样品与分散剂用量比例、洗脱溶剂及用量进行了选择和优化。结果表明,五种蔬菜中甲胺磷的回收率在85.7%～109.2%之间,相对标准偏差小于8%,可见本法可以用于各种新鲜蔬菜样品中甲胺磷的残留分析。     

咸鱼制品中有机磷农药残留的毛细管GC-NPD法测定

由于咸鱼制品加工过程中经常有用敌百虫、敌敌畏和甲胺磷等有机磷溶液浸泡来进行防腐,这类产品严重危害人们生命安全。本研究采用毛细管气相色谱法氮磷检测器(GC-NPD)测定咸鱼制品中敌百虫、敌敌畏和甲胺磷。将鱼肉匀浆后。丙酮/二氯甲烷(1:1)提取,以外标法定量分析。当取鱼组织0.5g时,方法检测限为0.002mg/kg,相对标准差为3.3%～7.0%,回收率75.6%～89.3%,变异系数为1.05%～10.12%。该方法简单、灵敏、准确。     

用于酶热传感器的酶标甲胺磷农药的制备

采用碳二亚胺(EDC)法进行酶标甲胺磷的制备研究。考察甲胺磷和丁二酸酐比例、反应时间对甲胺磷衍生物合成的影响,最终确定二者的最适物质的量比为1:1.5,最适反应时间为15h;甲胺磷衍生物与葡萄糖氧化酶比例对酶标甲胺磷偶联率及酶活的影响实验结果显示,随着甲胺磷衍生物与葡萄糖氧化酶二者比例的增加,酶标农药的偶联率增加,但同时也造成了酶活的降低。考虑到酶标农药还应具备足够的酯酶抑制活性,甲胺磷衍生物与葡萄糖氧化酶二者物质的量比为10:1时制得的酶标农药为最优。     

A Biomimetic Sensor with Signal Enhancement of Ferriferrous Oxide-Reduced Graphene Oxide Nanocomposites for Ultratrace Levels Quantification of Methamidophos or Omethoate in Vegetables

In this study, we designed and synthesized Fe₃O₄/reduced graphene oxide (Fe₃O₄/rGO) and MIL@MIP, which were characterized using transmission electron microscopy (TEM), X-ray diffraction, Fourier transform infrared (FT-IR), cyclic voltammetry (CV), and differential pulse voltammetry (DPV). Here, reports a novel biomimetic electrochemical sensor (BECS) sensitized with Fe₃O₄/reduced graphene oxide (Fe₃O₄/rGO) nanocomposite using MIL@MIP film as recognition element for ultrasensitive quantification of methamidophos or omethoate. The BECS offered fast responses for methamidophos and omethoate with wide linear response ranges of 1.0 × 10^?7–1.0 × 10^?12 and 1.0 × 10^?7–1.0 × 10^?13 mol/L, respectively. Under optimized conditions, the limit of detection (LOD; S/N = 3) of the BECS method was 2.67 × 10^?13 mol/L for methamidophos and 2.05 × 10^?14 mol/L for omethoate. The BECS was applied to detection of methamidophos and omethoate in spiked cucumber and kidney bean samples, and good recoveries varied from 88.2 to 96.9 %. This proposed method was adopted for the determination of the methamidophos or omethoate residues in the rape sample, and the results were also verified using the method of gas chromatography.     

化镀锡青铜回火胎圈钢丝生产工艺技术

跟踪化镀锡青铜回火胎圈钢丝生产技术 ,介绍具有国内先进生产技术水平的化镀锡青铜胎圈钢丝生产线 ,该生产线DV值为 10 0 ,可生产 0 .80～ 1.6 5mm的胎圈钢丝。钢丝的表面处理采用电解碱洗和电解酸洗 ,镀液采用水浴恒温系统 ,气吹系统设计独特 ,水洗采用阶梯压力冲洗 ,产品性能稳定。 1.0mm的胎圈钢丝抗拉强度为 1790～ 1910MPa ,延伸率≥ 5 % ,扭转≥ 2 7次 ,w(Cu +Sn)为 0 .4 3～ 0 .5 2g kg ,w(Sn)为 2 %～ 3% ,镀层与橡胶的粘结力为 110 0～ 135 0N 根。生产线达到设计要求 ,投资仅为引进线的 1 8～ 1 5     

葡萄糖和蛋白胨对绿色木霉纤维素酶系分泌特性的影响

采用正交试验法分析出绿色木霉3.3711液体发酵产纤维素酶系各组分的最适酶解条件,其组合分别为C1(pH 5.0、45℃),Cx(pH 3.5、55℃)和βG(pH 4.5、65℃)。在液体基础产酶培养基发酵条件下,三种组分酶的最高酶活分别为53.6、185.2、79.3 u/mL,比酶活分别为46.6、167.7、71.8 u/mg,最高的酶活形成时间分别为9、10、10 d。添加质量分数0.0005~0.003的葡萄糖,三种组分酶最高酶活分别降低了27.4%~38.4%、25.5%~35.5%、14.0%~52.3%,C1和Cx的最高酶活形成时间分别缩短为4~7、5 d,C1和βG比酶活分别降低了20.8%~35.4%、25.8%~64.5%;添加质量分数0.0005~0.01的蛋白胨,提高了C1和Cx最高酶活(分别为0.9%~199.6%、2.1%~45.1%),缩短了C1和Cx的最高酶活形成时间(分别为4~7、4 d),降低了βG的最高酶活(5.9%~34.2%)和比酶活(35.2%~87.3%),对C1和Cx比酶活的增减效应存在浓度依赖性,质量分数0.0005时分别提高50.0%、65.4%。两种添加物均能明显改变C1和Cx的分泌变化规律,对βG酶影响极小。     

Antioxidant activity of sesame coat

The antioxidant activity of ethanolic extracts of sesame coat (EESC) was investigated. The antioxidant activity (91.4%) of 1.0 mg EESC was equal to 1.0 mg tocopherol (90.5%) but was weaker than 1.0 mg butylated hydroxyanisole (98.6%) on peroxidation of linoleic acid. EESC showed an inhibitory effect against the formation of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) in a liposome model system. EESC at 10.0 mg exhibited a 94.9% scavenging effect on α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl radicals and marked reducing power, indicating that EESC acts as a primary antioxidant. The extracts, at a dose of 1.0 mg, showed a 50.0% scavenging effect on the hydroxyl radical. EESC also exhibited a metal-binding ability. Sesamin and sesamolin, the lignan substances, were found in EESC, by HPLC analysis. In addition, chromatographic analysis demonstrated that phenolic compounds and tetranortriterpenoids, which had positive reactions with β-carotene, indicating antioxidant activity, are present in EESC. According to these results, termination of free radical reaction, metal-binding ability and quenching of reactive oxygen are suggested to be, in part, responsible for the antioxidant activity of EESC.     

海藻酸纤维活性染料稀土染色

稀土元素铈化学性质活泼,在合适条件下,有生成络合物的强烈倾向.采用硝酸铈作为促染剂,研究毛用活性染料对海藻酸纤维染色过程中,硝酸铈、柠檬酸、温度和pH值等因素对上染百分率的影响,其染色优化工艺为:染料2%(owf),柠檬酸6.25%(owf),硝酸铈1.0～1.5%(owf),40℃入染,升温至80℃染色45 min,浴比1:50.试验表明,硝酸铈可提高毛用活性染料对海藻酸纤维的上染百分率和K/S值,对耐热水洗牢度影响不大.     

Highly Sensitive Detection of Organophosphorus Pesticides Represented by Methamidophos via Inner Filter Effect of Au Nanoparticles on the Fluorescence of CdTe Quantum Dots

A sensitive fluorescence detection method of organophosphate pesticides (OPs) represented by methamidophos was developed using the inner filter effect (IFE) of Au nanoparticles (AuNPs) on CdTe quantum dots (QDs). The fluorescence of CdTe QDs was remarkably quenched with the presence of AuNPs via IFE. Acetylcholinesterase (AChE) catalyzed the hydrolysis of acetylthiocholine into thiocholine, which could induce the aggregation of AuNPs and decrease their characteristic absorption, making IFE-decreased fluorescence of CdTe QDs recovered. OPs can inhibit the activity of AChE, thus preventing the aggregation of AuNPs and the fluorescence recovery of CdTe QDs. Therefore, the IFE of fluorescence between AuNPs and CdTe QDs could convert the absorption signal to fluorescence signal, which improved the detection sensitivity of OPs in vegetables. Under the optimum conditions, the response was linearly proportional to the concentration of methamidophos in the range of 0.06～0.78 mg/kg with a detection limit of 2 μg/kg (3σ) which was superior to the method of GB/T 5009.199-2003. The proposed assay exhibited good reproducibility and accuracy, providing a simple and rapid method for the screening of OPs.