灵芝多糖的分离纯化及结构鉴定

运用DEAE-Sephadex A25离子色谱和Sepharose CL-6B凝胶色谱分离纯化得到一种灵芝多糖组分GLPS1a。高效液相凝胶渗透色谱法(high-performance gel-permeation chromatography,HPGPC)法测得其呈单一峰,重均分子质量为1.8×105D。GLPS1a经单糖组成分析、红外、核磁共振等手段分析,结果表明单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和木聚糖,物质的量比率为4:2:10:1。GLPS1a具有一条以β→(1,3)位键合的吡喃葡萄糖主链,同时存在β→(1,3)阿拉伯糖、β-D-(1,4)半乳糖、α-D-(1,2)木糖和α-D-(1,6)葡萄糖的分支残基。     

金花葵多糖提取工艺优化及结构表征和抗氧化性研究

优化金花葵干花苞中多糖的提取工艺,并对其结构和抗氧化活性进行研究。本研究在单因素实验的基础上,通过正交试验优化水提醇沉法提取多糖的工艺,利用高效液相色谱(HPLC)法分析多糖的单糖组成,应用傅里叶红外光谱(FTIR)法和扫描电镜(SEM)观察对多糖官能团和外貌进行分析,并检测了多糖清除自由基的能力和还原力。结果表明,金花葵的干花苞多糖最佳提取工艺为：提取温度100℃、提取时间3 h和料液比1:50 g/mL。在此工艺条件下,多糖得率为17.23%±0.19%,多糖含量为27.87%±0.60%。其单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖:半乳糖:鼠李糖:甘露糖:葡萄糖=0.97:1:0.23:0.05:0.43。表面呈不规则片状,并且证明具有糖醛酸、吡喃糖环官能团。此外,提取的多糖具有一定的清除DPPH自由基、ABTS⁺自由基能力,对自由基半数抑制对应浓度(IC₅₀)分别为1.22、4.43 mg/mL,表明具有良好的抗氧化活性。研究结果为金花葵花苞中多糖的化学结构解析和功能研究提供了研究基础与理论依据。     

油茶饼粕多糖的分级及其抗氧化性评价

为探究油茶饼粕多糖的抗氧化活性,以12年生油茶果(饼粕)为试材提取油茶饼粕多糖,采用纤维素柱层析和葡聚糖凝胶柱层析方法分离多糖,并对各组分多糖进行抗氧化分析,选出抗氧化活性最佳的多糖,并将其与V_C、V_E进行复配,分析复配物的抗氧化活性。结果表明:在分离得到DT_A、DT_B、DT_C1、DT_C2、DT_D5个多糖组分中,DT_C1的分子量在10万Dal左右,且综合抗氧化能力最强。当其浓度为2.0 mg/mL时,DPPH自由基清除率可达80%以上。由Isobologram分析图可知,多糖(DT_C1)与V_C(1:0.162)、V_E(1:0.319)复配后,对DPPH自由基清除率的3个效应点都在相加线及95%可信限的左侧,理论IC_50add值与实验IC_{50 mix}值有显著性差异,并且相互作用指数都小于1,证实多糖(DT_C1)与V_C、V_E之间存在协同抗氧化效应,且两者均在1:1时复配效果最好。     

康定灵芝功效成分分析及体外抗氧化、降血糖活性评价

本文采用药典方法和高效液相色谱法分析了康定灵芝多糖、三萜及灵芝酸A、灵芝酸C1、灵芝酸F的含量。通过对DPPH、ABTS+自由基清除能力和总抗氧化能力的考察以及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果评价了其体外抗氧化和降血糖活性。结果显示,康定灵芝多糖和三萜含量分别为1.15%和1.50%,灵芝酸A、灵芝酸C1和灵芝酸F含量分别为0.052%、0.020%和0.064%。体外抗氧化和降血糖活性评价结果表明康定灵芝多糖提取物对DPPH和ABTS⁺自由基清除的IC₅₀值分别为0.75 mg/mL和1.24 mg/mL,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制的IC₅₀值分别为1.45 mg/mL和1.97 mg/mL。三萜提取物对DPPH和ABTS⁺自由基清除的IC₅₀值分别为0.65 mg/mL和1.06 mg/mL,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制的IC₅₀值分别为1.44 mg/mL和1.09 mg/mL。本文研究结果表明康定灵芝功效成分含量高,同时具有良好...     

灵芝在牛蒡固体培养基中发酵工艺优化及菌丝多糖的体外抗氧化活性

为提升牛蒡废弃物的利用价值,以低品质牛蒡作为营养基质,精选优良灵芝菌种作为发酵菌株,研究牛蒡固体发酵灵芝产多糖工艺及其体外抗氧化活性。采用单因素试验和响应面优化法确定了装瓶量、粉碎程度、液固比等工艺条件;利用水提醇沉法提取牛蒡固体发酵灵芝菌丝中多糖,并用苯酚-硫酸法测定其总多糖含量;多糖经脱蛋白、透析和脱色后,经红外光谱分析多糖特征,高效液相色谱测定其单糖组成;体外实验检测多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力。结果表明：最佳发酵条件为液固比0.4 mL/g 、装瓶量0.2 g/mL、粉碎程度过6 目筛,在此条件下实际获得的多糖含量为24.85 mg/g;红外光谱分析表明所获得的菌丝多糖具有糖类物质的特征吸收峰;高效液相色谱检测其单糖组成为甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等,其中甘露糖含量最高,是葡萄糖的7.6 倍;抗氧化性检测表明随着牛蒡固体发酵灵芝菌丝多糖质量浓度的增加,其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除能力逐渐增强,且清除率均大于70%,说明多糖具有较好的体外抗氧化活性。     

印度块菌水溶性多糖的单糖组成与抗氧化活性研究

采用水提醇沉法对印度块菌子实体水溶性粗多糖进行提取,并通过酶法-Sevag 法联用脱蛋白,DEAE52 纤维素Sephadex G-100 柱层析对其进行分离纯化,得到主要多糖组分TIP-A。采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)对其均一性进行验证,测定出相对分子质量(Mr)为17500。气相色谱质谱联用(GC-MS)分析表明,TIP-A 是由D- 甘露糖、D- 葡萄糖、D- 半乳糖、L- 鼠李糖组成的均一杂多糖,物质的量比约为7:2:2:2。对TIP-A 抗氧化活性研究表明,其对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)、1- 二苯基-2- 三硝基苯肼(DPPH)自由基有较强的清除能力,半抑制质量浓度(IC50 值)分别为1.06、1.02、1.13mg/mL。对过氧化氢(300mmol/L)诱导的PC12 细胞损伤有较好的抑制力,具备开发成天然抗氧化剂的潜力。     

超声辅助法制备的苜蓿多糖结构特征及抗氧化活性分析

以紫花苜蓿为原料,采用超声辅助法提取苜蓿粗多糖,利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-75凝胶柱层析分离纯化得到一种苜蓿均一多糖APSU-2a.通过高效凝胶渗透色谱、PMP柱前衍生化高效液相色谱、红外光谱和核磁共振波谱分析APSU-2a的结构特征,以DPPH、ABTS和羟自由基清除率评价APSU-2a的...     

青天葵多糖的分离纯化、结构表征及其抗氧化活性分析

对水提醇沉获得的青天葵粗多糖进行分离纯化,并对多糖组分进行分析表征和体外抗氧化活性评价。结果表明,用DEAE-52纤维素及葡聚糖凝胶G-100柱色谱分离纯化出的多糖组分NFP-2分子质量为1150 kDa,总糖含量为82.64%,糖醛酸含量为16.65%,蛋白质含量为6.38%。NFP-2由半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖醛酸组成,摩尔比为21.27:13.21:5.26:3.02:2.82:1,其为不含三螺旋结构的酸性多糖,糖苷键构型为β-构型。体外清除自由基试验结果显示,NFP-2对羟基自由基（IC₅₀ 7.95 mg/mL）和超氧阴离子自由基（当浓度为0.5 μg/mL时,清除率为60%）均有明显清除作用;当NFP-2浓度为10 mg/mL时,ABTS阳离子自由基的清除率为35.44%;当NFP-2浓度为120 μg/mL时,DPPH自由基清除率为17%。     

“南薯88”茎叶多糖的分离纯化，结构鉴定及其生物活性的研究

晒干的"南薯88"的茎叶,通过热水浸提,乙醇沉淀,DEAE-cellulose column柱层析分离纯化,得到"南薯88"多糖纯品(N88P-1)。通过红外光谱技术(IR),高效凝胶渗透色谱(HPGPC),高效液相色谱色谱(HPLC)和核磁共振谱(1 H NMR)等对"南薯88"多糖(N88P-1)的进行了结构鉴定;同时,对"南薯88"多糖(N88P-1)的抗氧化及免疫调控作用进行了初探。结果显示,"南薯88"多糖(N88P-1)的分子量为1 4328 D,红外光谱显示,在3 444.81 cm~(-1)出现O-H的特征伸缩振动峰,1 640.20 m~(-1)出现C=O的特征伸缩振动峰,~1H NMR谱显示δ4.93～δ4.86出现异头氢信号,高效液相色谱色谱显示N88P-1的单糖组成为1∶1的半乳糖和甘露糖。活性研究结果显示,一定范围内的N88P-1浓度可以清除ABTS~+自由基,IC_(50)值为0.48 mg/mL。N88P-1在0.25～3 mg/mL的浓度范围内与DPPH~-自由基的清除能力呈正相关,IC_(50)值为0.96 mg/mL。当N88P-1的浓度为3 mg/mL时,对ABTS~+和DPPH~-自由基的清除能力均达到最高值;免疫细胞增殖活性结果显示,N88P-1在20～80 mg/mL的浓度下,对B细胞和T细胞增殖效果为极显著(P0.01);在10～40 mg/mL的浓度下,对巨噬细胞增殖效果为极显著(P0.01),其中,N88P-1在40 mg/mL的浓度下对3种免疫细胞的增殖效果均达到最佳。     

甜玉米芯多糖铬配合物的制备、结构表征及体外活性的研究

为提升甜玉米芯多糖生物学活性,制备一种甜玉米芯多糖铬配合物(SCP80-Cr),以单因素实验为基础,以响应面试验优化制备工艺,并进行表征及探究体外活性。结果表明,SCP80-Cr制备最佳工艺条件为pH10.1、反应温度74℃、多糖浓度3 mg/mL,反应时间60 min。SCP80-Cr中Cr元素重量百分比为21.08%,元素百分比为6.67%。对SCP80-Cr进行表征发现,SCP80-Cr几乎不含有蛋白、核酸、色素类物质,而Cr是以Cr-O及Cr-OH的形式与SCP80缔合,并具有较强的分子团聚特性。单糖组成测定说明SCP80-Cr单糖组成摩尔百分比为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:木糖:阿拉伯糖=0.58:89.50:4.65:1.33:3.58。体外降糖实验结果表明,SCP80-Cr对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制率的IC₅₀分别为4.70±0.38 mg/mL和3.99±0.26 mg/mL;体外抗氧化实验结果表明,SCP80-Cr清除DPPH自由基及羟基自由基IC₅₀分别为4.80±0.34 mg/mL和4.99±0.28 mg/mL,说...     

灵芝发酵麸皮粗多糖的组成及抗氧化活性分析

为研究灵芝发酵麸皮粗多糖组成及抗氧化活性,对比分析了灵芝发酵前后麸皮粗多糖的体外抗氧化活性和组分,并通过高效液相色谱、傅里叶红外光谱初探灵芝发酵麸皮粗多糖的结构。结果表明:灵芝发酵麸皮粗多糖（GWBP）在4.0 g/L浓度下的DPPH、羟基自由基清除率和还原力分别为91.37%、95.74%和0.92,显著高于未发酵麸皮粗多糖（WBP）（P<0.05）。GWBP组分中黄酮、多酚、蛋白含量分别为5.41、12.74和206.41 mg/g,显著高于WBP（P<0.05）。GWBP是一种吡喃糖,主要由葡萄糖、木糖和核糖等组成,分子量为4.172×103 Da。灵芝液态发酵可以提高麸皮粗多糖的抗氧化活性,改变粗多糖的组成成分。本研究为灵芝发酵麸皮粗多糖天然抗氧化的开发提供参考。     

小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25（g/mL）,超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80 ℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖（Purification of intracellular polysaccharide,SCIP）,主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC₅₀分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。     

丹参内生镰刀菌HBG16胞外多糖发酵条件优化及其抗氧化能力

目的:优化丹参内生镰刀菌HBG16发酵工艺条件来提高胞外多糖产量,并分析其抗氧化能力。方法:通过单因素实验和响应面试验对产胞外多糖丹参内生镰刀菌HBG16的碳源、氮源、接种量、pH四个因素进行优化;通过凝胶渗透色谱法(GPC)进行样品单糖组成分析;通过DPPH法测定胞外多糖抗氧化能力。结果:通过单因素实验确定内生镰刀菌HBG16的碳源为麦芽糖,氮源为酵母粉,pH为6.0,接种量为6%;经响应面试验确定最佳发酵条件为麦芽糖32 mg/mL,酵母粉2.6 mg/mL,pH为6.0,接种量6%,在此优化条件下,发酵液胞外多糖的含量达到0.95 mg/mL,与预测值的偏差为2.06%。多糖主要由半乳糖组成,含量为52.09 mg/kg。随着胞外多糖浓度的增加,对DPPH自由基清除率增加。多糖清除DPPH自由基的IC₅₀为0.38 mg/mL。结论:在优化的培养条件下,丹参内生镰刀菌HBZ16胞外多糖产量由0.11 mg/mL提高到0.95 mg/mL,为真菌多糖的工业化利用奠定了基础。     

远志多糖的分离纯化、结构特征及生物活性

目的:分离纯化远志多糖(polysaccharide of Polygala tenuifolia,PTP),并对其理化性质、抗氧化和降血糖活性进行研究。方法:采用超声波辅助提取、分级醇沉、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-100柱色谱分离纯化远志多糖;紫外-可见光谱扫描法、比旋光度法、凝胶渗透色谱法3种方法验证纯度;高效凝胶渗透色谱法测定相对分子质量,高效阴离子交换色谱测定单糖组成;清除1,1-二苯基-2-苦味基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基评价体外抗氧化活性;测定对α-葡萄糖苷酶抑制能力以研究其降血糖活性。结果:远志多糖经分离纯化后获得组分PTP-1,经3种方法验证PTP-1为均一性良好的多糖,相对分子质量为4.62×10~4,由半乳糖、葡萄糖、甘露糖组成,物质的量比为3.92∶1.00∶2.08。抗氧化活性研究结果表明,PTP-1对清除DPPH自由基和羟自由基呈良好的量效关系,半数清除率浓度IC_(50)分别为0.35 mg/m L和0.51 mg/m L。降血糖活性结果表明,PTP-1对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制能力,IC_(50)值为0.52 mg/m L。结论:远志多糖PTP-1为具有抗氧化和降血糖活性的均一多糖。     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

纤维素酶和果胶酶提取对甘草渣多糖抗氧化和抗肿瘤性能的影响

目的:考察不同酶提取对甘草渣多糖抗氧化性和抗肿瘤性能的影响,为后续甘草资源的有效再利用提供依据。方法:选用纤维素酶和果胶酶,在实验的优化条件下分别提取甘草渣多糖,比较两种酶提取的甘草渣多糖的得率、红外光谱、抗氧化性和抗肿瘤性。结果:果胶酶和纤维素酶提取的多糖得率分别为8.43%和10.71%。红外光谱结果表明,两种酶提取的多糖均具有α-吡喃环糖环。抗氧化性实验结果表明,果胶酶和纤维素酶提取的多糖对DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基清除的IC₅₀值分别为0.00243、0.305、0.0403 mg/mL和0.226、0.0238、0.0401 mg/mL。抗肿瘤结果表明,在0.00250~0.125 mg/mL浓度范围内,纤维素酶提取的多糖肿瘤细胞的抑制率高于果胶酶提取的多糖。结论:纤维素酶提取的多糖得率更高、对羟基自由基的清除能力和抗肿瘤性能更强,果胶酶提取的多糖对DPPH自由基的清除能力更强,两者对ABTS自由基的清除能力基本相同。     

平阴玫瑰花托多糖的结构特征及抗氧化活性分析

为研究玫瑰花托多糖的结构特征和生物活性,采用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析将玫瑰花托多糖分离纯化为3个组分。结构分析表明玫瑰花托多糖的单糖组成为葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、葡萄糖醛酸、甘露糖(24.01:14.57:11.50:9.77:5.5:1.09:1),构型主要为呋喃糖。抗氧化实验表明,玫瑰花托多糖具有较强的抗氧化活性,其清除羟基自由基和DPPH自由基的EC₅₀值分别为699.46、514.31 mg/L。通过对比分析可知,玫瑰花托多糖的结构与玫瑰花瓣多糖的结构具有相似性,而玫瑰花托多糖的抗氧化活性稍强于玫瑰花瓣多糖。因此,玫瑰花托多糖是优良的天然抗氧化剂,有进一步开发利用的价值。