仿刺参卵和体壁多肽的制备及免疫活性

以仿刺参卵和体壁为原料制备多肽,测定其基本营养成分和分子质量分布,并研究其对淋巴细胞增殖作用和小鼠免疫功能的影响。采用生物酶解技术和切向流超滤技术分离和制备仿刺参卵和体壁多肽,磺酰罗丹明B比色分析法测定了多肽质量浓度（10、50、100、500 μg/mL）对小鼠淋巴细胞增殖（spleen lymphocyte proliferation,SLP）能力的影响,设定水对照组和多肽低、中、高（日剂量83.3、166.7、500.0 mg/kg）剂量组进行30 d小鼠灌胃实验,检测了小鼠脏器/体质量、迟发型变态反应能力、伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数、小鼠血清溶血素水平、小鼠碳廓清能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及自然杀伤细胞活力等指标。结果表明,仿刺参卵和体壁1～10 kDa多肽（EP1和BWP1）在500 μg/mL时均对SLP具有显著的促进作用,其粗蛋白含量分别为64.74、70.25 g/100 g,氨基酸总量分别为45.69、63.26 g/100 g,分子质量分别分布在130～1 600 Da及130～2 500 Da之间。经口服灌胃给予小鼠不同剂量的多肽30 d,EP1可提高小鼠的细胞免疫功能和单核-巨噬细胞吞噬功能,BWP1可提高小鼠的体液免疫功能和单核-巨噬细胞吞噬功能。结果提示EP1和BWP1均具有增强免疫力的功能,可开发为新的免疫调节产品。     

刺参对运动小鼠抗疲劳作用的研究

研究北方养殖刺参的主要活性成分和对运动小鼠抗疲劳的作用。结果表明：养殖刺参体壁富含酸性黏多糖、胶原蛋白、活性氨基酸和活性脂质等多种活性成分,能提高小鼠负重游泳能力、肝糖元含量和安静状态下小鼠血红蛋白含量,保持运动小鼠血红蛋白水平稳定,显著降低运动小鼠血乳酸的生成,促进运动后血乳酸的消除,加速运动血清尿素氮的清除。说明养殖刺参具有显著的抗疲劳和提高运动耐力的作用。     

仿刺参与进口海参营养品质的比较分析

为比较仿刺参与进口海参的综合品质,对仿刺参和6种进口海参的水分、灰分、盐分、蛋白质、总糖、水溶性总糖、含砂量、复水后干重率、海参多糖、海参皂苷指标进行检测,并采用主成分分析法进行综合品质评价。7种干海参水分、盐分、水溶性总糖含量(质量分数)分别低于15%、40%、3%;蛋白质含量高于40%;总糖含量为2.90%～12.56%;含砂量为0.52%～11.23%;复水后干重率为36.09%～64.63%;海参多糖含量为1.88%～7.71%;海参皂苷含量为ND～0.140%。主成分分析结果得出,7种海参的综合营养品质顺序为仿刺参>红极参>墨西哥海参>南美刺参>腰参>岩刺参>阿拉斯加红参。仿刺参的营养丰富,含砂量低且复水后干重率高,综合品质最佳。     

仿刺参酶解提取物营养成分分析及其对小鼠免疫功能的影响

对仿刺参酶解提取物营养成分组成进行了测定和分析,并依照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中"增强免疫力功能检验方法",评价了其对小鼠免疫功能的影响。结果表明仿刺参酶解提取物水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分、磷脂、多糖、皂苷含量分别为6.41%、70.51%、5.05%、6.83%、0.96%、8.56%、0.78%。仿刺参酶解提取物氨基酸总量为56.046 g/100 g,必需氨基酸占氨基酸总量的24.2%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的55.6%。刺参酶解提取物低、中、高(0.1 g/kg·bw、0.2 g/kg·bw、0.6 g/kg·bw)剂量组可明显提高Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,与阴性对照组比较差异显著(p0.05);3剂量组可显著提高小鼠血清溶血素水平(p0.05);高剂量组能极显著提高小鼠抗体生成细胞数(p0.01);中、高剂量组能极显著提高小鼠NK细胞活性(p0.01)。仿刺参酶解提取物含有丰富的营养成分,并具有增强免疫力的功能。     

大豆磷脂对化学性肝损伤保护作用的研究

以大豆磷脂为功效成分制备的软胶囊保健食品为受试物,研究其对小鼠化学性肝损伤的辅助保护作用。实验动物为健康雄性成年KM小鼠,每只体重18²2 g,将30只小鼠随机分成3组。以四氯化碳致小鼠化学性肝损伤为模型,对小鼠进行灌胃大豆磷脂软胶囊保健食品。测定第30天四氯化碳损伤后血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。结果显示,模型对照组小鼠血清中ALT和AST活性很高,而受试物组小鼠血清中ALT(141.74±21.33 U/L)和AST(127.53±8.54 U/L)活性明显低于模型组小鼠(ρ<0.01)。研究结果表明,以大豆磷脂为功效成分制备的软胶囊保健食品对化学性肝损伤具有显著的保护作用。     

防刺参不同部位营养成分的分析及综合评价

对仿刺参体壁、肠、呼吸树营养成分作了分析和测定,结果表明,参肠、呼吸树中蛋白质、粗脂肪、多糖、皂苷含量均高于体壁,氨基酸的EAA/TAA、EAA/NEAA指标更接近FAO/WHO的理想模式,脂肪酸EPA的含量高于体壁。经综合评价分析,海参肠、呼吸树具有较高的营养价值。     

市售干海参中非法添加的蔗糖和无机成分的X射线衍射质量控制

粉末X射线衍射(PXRD)是一种简单快捷的无损检测技术,该技术罕有海参及其非法添加剂的检测应用。本研究建立一种干海参中非法添加糖分的PXRD鉴定方法。对随机采购的8种市售干海参刺参(呈甄干海参、棒棰岛干海参、辽刺参、精品海参、俄罗斯海参、野生海参、财神岛干海参、长生岛干海参),获得PXRD谱及特征标记峰。运用有机分子晶体的PXRD谱模拟方法,鉴定糖分来源及其含量。结果表明:海参体壁没有任何种类的有机分子晶体,海参沙嘴主要成分为具有菱方结构的碳酸镁钙(Mg0.1Ca0.9CO3),人为掺入的蔗糖能够在干海参中结晶,形成能被PXRD技术探测的系列衍射峰。辽刺参中掺有糖分,被鉴定为蔗糖,其含量达4.45 g/100 g;呈甄干海参、棒棰岛干海参、辽刺参、精品海参、俄罗斯海参、野生海参、财神岛干海参、长生岛干海参中盐分含量分别为:3.62 g/100 g、4.40 g/100 g、3.55 g/100 g、2.87 g/100 g、1.60 g/100 g、15.56 g/100 g、2.35 g/100 g、3.90 g/100 g;呈甄干海参、棒棰岛干海参、精品海参、俄罗斯海参、野生海参、财神岛干海参、长生岛干海参中含沙量分别为:2.12 g/100 g、0.62g/100 g、0.14 g/100 g、0.22 g/100 g、0.38 g/100 g、0.85 g/100 g、0.90 g/100 g。因此,PXRD技术适合于市售干海参糖分和盐分的质量控制。     

刺参低聚肽的质量评价和抗疲劳作用研究

对刺参低聚肽的氨基酸组成、分子量分布、营养成分、微量元素、农兽药残留及急性经口毒性试验进行综合评价,研究并比较刺参低聚肽、大豆低聚肽和海参粉对小鼠的抗疲劳作用。分别灌胃不同剂量(0.085、0.17、0.50 g/kg)的刺参低聚肽、大豆低聚肽、海参粉,30 d后测定小鼠的负重游泳时间、血清尿素氮和肝糖原含量。结果表明,刺参低聚肽中氨基酸种类齐全,富含多种人体必需氨基酸,分子量低于1 000 Da低聚肽含量大于98%,主要分布在180 Da～500 Da,含有众多的微量元素,且牛磺酸含量较高,无兽药及农药残留,无重金属超标,样品经口服的半数致死量(median lethal dose,LD_(50))大于10 000 mg/kg,无毒性,口服安全。与阴性对照组相比,刺参低聚肽、大豆低聚肽和海参粉都具有抗疲劳的作用,其抗疲劳能力强弱顺序为:刺参低聚肽大豆低聚肽海参粉,刺参低聚肽各剂量组均使得小鼠负重游泳时间明显延长,血清尿素氮含量明显降低,肝糖原含量明显增加,但并非剂量越高效果越好,最佳给药剂量为0.17 g/kg。     

不同来源北冬虫夏草活性成分差异及其对小鼠免疫功能的影响

目的：探讨不同来源北冬虫夏草主要活性成分的差异,并评价其调节小鼠免疫功能的能力。方法：使用高效液相色谱法测定不同来源北冬虫夏草虫草素和腺苷的含量;通过测定小鼠免疫器官指数以及碳廓清实验和脾淋巴细胞增殖实验研究其对小鼠免疫功能的影响。结果：虫草素含量由高到低依次为蚕蛹虫草3.68 mg/g、小麦虫草2.86 mg/g、大米虫草2.63 mg/g、头状虫草0.95 mg/g;腺苷含量由高到低依次为蚕蛹虫草1.11 mg/g、小麦虫草0.79 mg/g 、头状虫草0.64 mg/g、大米虫草0.094 mg/g。碳廓清指数和脾淋巴细胞增殖能力研究结果表明4 种虫草均有提高小鼠免疫活性的功效,与空白组相比差异极显著,蚕蛹虫草和小麦虫草功效最佳;饲喂4 种虫草的小鼠免疫器官指数与空白组相比差异显著。结论：不同来源北冬虫夏草的虫草素和腺苷含量有所差异,蚕蛹虫草和小麦虫含量最高,其提高小鼠免疫功能的能力也最强。     

刺参低聚肽对糖尿病小鼠降血糖作用的研究

研究刺参低聚肽对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。腹腔注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型,连续6周灌胃不同剂量的刺参低聚肽(0.1、0.2、0.5 g/kg),记录灌胃0、2、4、6周后的小鼠体重及空腹血糖值,并测定灌胃结束后的小鼠胸腺、脾脏、肝脏和肾脏指数,以及血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量与血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。刺参低聚肽中、高剂量能减缓糖尿病小鼠消瘦的症状(p0.01),降低糖尿病小鼠的血糖值(p0.05),且作用浓度与时间成正相关。高剂量的刺参低聚肽能显著提高小鼠各脏器指数(p0.05),降低糖尿病小鼠血清MDA含量(p0.05),提高血清SOD活性(p0.01)。刺参低聚肽对糖尿病小鼠具有降血糖、增强免疫力、保护肝肾及抗氧化的作用,推测可能通过抗氧化和增强免疫力起到降低血糖及防治糖尿病并发症的作用。     

菊黄东方鲀不同组织脂肪酸的组成及含量分析

测定并分析比较菊黄东方鲀性腺发育为Ⅲ期雌鱼和Ⅳ期雄鱼的肝脏、性腺、肌肉和皮中水分、总脂和脂肪酸组成及含量。结果表明：1）不同组织中水分含量差异显著（P＜0.05）,雌鱼肌肉中水分含量最高,肝脏中含量最低;雄鱼精巢中水分含量最高,肝脏中含量最低。2）雌鱼肝脏、性腺、肌肉、皮的总脂含量分别为
（48.87±7.75）%、（11.77±1.44）%、（0.50±0.00）%和（0.13±0.06）%。雄鱼肝脏、性腺、肌肉、皮的总脂含量分别为（63.13±3.07）%、（1.70±0.10）%、（0.43±0.12）%和（0.30±0.20）%。不同组织中总脂含量差异显著（P＜0.05）,雌、雄鱼均为肝脏中总脂含量最高,性腺次之,皮最低。3）肌肉中,雌、雄鱼饱和脂肪酸相对含量最丰富,以雌鱼肌肉中C16∶0最为丰富,且显著高于肝脏、性腺、皮。肝脏中,雌、雄鱼单不饱和脂肪酸相对含量最丰富,分别为（46.4±0.5）%、（45.7±0.9）%,且均分别高于性腺、肌肉和皮。性腺中,雌、雄鱼多不饱和脂肪酸相对含量最丰富,分别为（28.6±1.4）%、（33.8±1.9）%,卵巢多不饱和脂肪酸相对含量与皮中多不饱和脂肪酸相对含量无显著差异（P＞0.05）,与肝脏、肌肉多不饱和脂肪酸相对含量存在显著差异（P＜0.05）。精巢多不饱和脂肪酸相对含量与肝脏、肌肉、皮中多不饱和脂肪酸相对含量存在显著差异（P＜0.05）。雌、雄鱼肝脏中脂肪酸绝对含量显著高于其他各组织（P＜0.05）。     

熟制中华绒螯蟹性腺中关键性嗅感物质的鉴定

熟制中华绒螯蟹性腺因其滋味鲜美,气味怡人,深受老百姓的喜爱。为研究其独特的香气构成,采用固相萃取整体捕集剂法(Monolithic material sorptive extraction,MMSE)结合气相色谱/质谱-嗅辨仪(GC/MS-O)对熟制中华绒螯蟹性腺中的挥发性成分进行了分析。通过频率检测法和时间强度法从雌、雄熟制中华绒螯蟹性腺中共检出有37种嗅感物质。其中,23种嗅感物质在雌蟹性腺中检出,34种嗅感物质在雄蟹性腺中检出,20种嗅感物质为雌、雄熟制中华绒螯性腺所共有。醛类化合物是熟制中华绒螯蟹性腺特征性气味的主要贡献者,其中,(E,Z)-2,6-壬二稀醛是最重要的气味物质。三甲胺因含量较高且具较高的检测频率值和气味强度值,也是熟制中华绒螯蟹性腺的重要气味物质。     

南方刺参性腺多肽酶解工艺优化及抗氧化活性分析

研究南方养殖刺参性腺多肽的酶解提取条件,并分析南北刺参性腺多肽抗氧化活性。选用复合蛋白酶对刺参性腺进行水解,以酶解多肽得率为指标,选取酶解温度、底物浓度、pH、酶解时间、酶用量等为主要影响因素,在单因素实验基础上应用响应面分析法对以上5个因子进行优化,确定刺参性腺多肽酶解工艺。试验结果表明,刺参性腺多肽酶解最佳条件:温度为56 ℃,底物浓度11.5%,酶添加量0.5 mKat/g,pH7.1,酶解时间4.5 h,此时刺参性腺多肽得率可达到67.97%±0.96%,与预测值相差0.26%。抗氧化试验结果表明,刺参性腺多肽浓度在40 mg/mL时,羟自由基抑制率与超氧自由基抑制率均大于0.1 mg/mL的维生素C溶液,60 mg/mL刺参性腺多肽的FRAP值大于0.1 mg/mL的维生素C溶液,南、北方养殖刺参性腺酶解多肽的抗氧化能力无显著差异。     

菜籽油中芥酸含量对动物食用安全性的影响

采用气相色谱法分析双低冷榨菜籽油和普通菜籽油的芥酸含量;运用掺食法喂饲小鼠含两种菜籽油的饲料(含油量2%),连续饲养5 周,观察小鼠、体质量、摄食量、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、脏器( 心、肝、脾、肺、双肾、睾丸、卵巢) 质量的变化;研究菜籽油中芥酸含量对小鼠食用安全性的影响。结果表明,双低冷榨菜籽油芥酸含量为4.744%,普通菜籽油芥酸含量为 32.595%,双低冷榨菜籽油芥酸含量明显低于普通菜籽油。喂饲双低冷榨菜籽油饲料组小鼠血清TC、TG 水平低于普通菜籽油饲料组;血清HDL-C 水平略高于普通菜籽油饲料组;与普通菜籽油饲料组相比,喂饲双低冷榨菜籽油饲料对小鼠血脂水平有良好影响。与正常对照组和双低冷榨菜籽油组相比,普通菜籽油组小鼠心脏质量和肝脏质量明显升高,可能与芥酸使脂肪沉积于心脏和肝脏有关。喂饲两种菜籽油对小鼠体质量、摄食、其他脏器质量均无明显影响。     

多棘海盘车营养成分分析及评价

对多棘海盘车生殖腺和体壁的营养成分进行分析,并对其营养品质进行评价。结果表明,多棘海盘车生殖腺的粗蛋白质含量为43.14%;氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量为127.73 mg/g,占氨基酸总量的37.32%,各必需氨基酸平均得分为103.79;脂肪含量为39.22%,多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的48.92%,二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸含量丰富;维生素和无机元素种类丰富且含量较高,无重金属污染,表明多棘海盘车生殖腺具有较高的食用和药用价值。多棘海盘车体壁的蛋白质含量较高,氨基酸种类齐全,富含牛磺酸和胶原蛋白的特征氨基酸--羟脯氨酸;脂肪含量较低,但多不饱和脂肪酸比例高,二十碳五烯酸含量高达16.67%;Ca、Mg等无机常量元素和Zn、Fe、Cu、Mn等微量元素含量丰富,可望用于提取胶原蛋白或开发研制水产动物饲料。     

番茄红素的安全性评价及对小鼠免疫功能的影响

目的：研究番茄红素的食品安全性及对小鼠免疫功能的影响。方法：进行大鼠30 d喂养实验,小鼠急性毒性实验,测定小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性。结果：雌、雄小鼠的番茄红素急性经口毒性＞2 666.64 mg/kg,属实际无毒级;番茄红素200、433.33、666.67 mg/（kg•d）剂量（以体质量计,下同）在30 d喂养实验中没有对大鼠的血液常规和血清生化指标产生影响,且Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验、小鼠精子畸形实验结果呈阴性;以33.33、66.67、200 mg/（kg•d）3 个剂量进行小鼠免疫功能实验,200 mg/（kg•d）剂量组的鸡红细胞吞噬指数、自然杀伤（natural killer,NK）细胞活性高于阴性对照组,且差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：番茄红素食品安全性良好,高剂量番茄红素作为食品添加剂在小型啮齿类动物实验中具有增强免疫力的功能。     

乙醇对小鼠免疫系统影响的研究

为给评价声称具有提高免疫的能力的含乙醇保健食品提供依据 ,观察不同剂量乙醇对小鼠免疫系统的影响。采用 17～ 2 0g的雄性BalB c小鼠 90只 ,随机分为 6组 ,每组 15只 ,分别以 0、0 6 7、1 33、3 33、6 0 8、8 0 0g kgBW 乙醇每天一次灌胃给予 ,灌胃量为 2 0mL kgBW,连续灌胃 30d后 ,分别测定细胞免疫、体液免疫、单核巨噬细胞及NK细胞活性等 7项指标。结果表明 :(1)乙醇可以导致小鼠的免疫系统损伤。 (2 ) 8 0 0g kgBW(5 0 % )剂量组在一次灌胃后 2 0min内全部进入昏睡状态 ,2 4h内全部死亡。 (3) 6 0 8g kgBW(38% )组小鼠死亡率为 82 2 %。存活小鼠碳粒廓清能力低下 ,至 30d时仍未恢复。 (4 ) 1 33g kgBW(8% )组腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力 (吞噬率 )降低 ,但对鸡红细胞吞噬指数无显著性影响。 (5 ) 0 6 7g kgBW(4 % )组NK细胞活性降低。 (6 ) 3 33g kgBW(2 0 % )组小鼠的 7项免疫指标均无显著性影响。 (7)以酒精为载体的保健食品在进行免疫调节作用评价实验时 ,小鼠灌胃液中酒精的浓度不宜超过 2 0 %。     

枸杞籽油和亚麻籽油混合物对小鼠增强免疫功能的影响

目的研究枸杞籽油和亚麻籽油混合物对小鼠免疫力的增强作用。方法选用200只健康ICR小鼠随机分为5大组,每大组40只小鼠按体质量随机分为4小组,即枸杞籽油和亚麻籽油混合物低、中、高剂量组(0.25、0.50、1.50 g/kg BW)和对照组。连续经口灌胃30天后,检测枸杞籽油和亚麻籽油混合物对小鼠免疫器官脏体比、细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性等指标的影响。结果与对照组比较,中、高剂量组能明显提高小鼠迟发型变态反应能力及NK细胞活性,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组能明显提高血清半数溶血值、抗体生成细胞数,差异有统计学意义(P0.05)。各剂量组对小鼠胸腺/体质量比值、脾脏/体质量比值、单核-巨噬细胞碳廓清能力、淋巴细胞转化能力及巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响,差异无统计学意义(P0.05)。结论枸杞籽油和亚麻籽油混合物具有增强小鼠免疫力的功能。