福建养殖仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺优化及其对过氧化氢诱导的血管内皮细胞EA.hy926损伤的保护作用

目的:优化仿刺参抗氧化多肽的酶解工艺,并研究其对过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926损伤的保护效应。方法:以酶解产物的水解度、体外DPPH自由基清除率为指标,筛选出最适蛋白酶;在单因素实验基础上,选取温度、加酶量、pH作为影响因子,以体外DPPH自由基清除率为响应值,结合响应面试验优化酶解工艺条件;进一步探讨酶解多肽体外抗氧化活性。以MTS法检测低、中、高剂量组的仿刺参抗氧化多肽对H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,以MDA含量、SOD活力测定细胞氧化及抗氧化水平。结果:动物蛋白水解酶为最适蛋白酶,酶解工艺优化条件为:料液比1:20 g/mL、酶解时间2 h、酶解温度50℃、加酶量7000 U/g、pH7.5,该条件下制备的仿刺参多肽体外DPPH自由基清除率为68.81%,与模型预测值(68.35%),相对误差为1%,回归模型可靠。酶解多肽对DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)和ABTS自由基(ABTS+·)的半数抑制浓度IC₅₀分别是9.01、0.63、10.89和20.53 mg/mL,说明其具有较好的体外抗氧化活性。选取200 μmol/L浓度H₂O₂建立细胞损伤模型,与H₂O₂组相比,中、高剂量组仿刺参抗氧化多肽能明显抑制H₂O₂诱导的血管内皮细胞氧化损伤,降低MDA含量,提高SOD活力。结论:采用动物蛋白水解酶酶解优化工艺制备的仿刺参抗氧化多肽对人脐静脉内皮细胞EA.hy926具有显著的保护作用并呈显著的剂量-效应关系。     

壳寡糖对过氧化氢诱导肝细胞损伤的改善作用及机制

目的：评估壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)对过氧化氢(H₂O₂)诱导肝细胞损伤的改善作用。方法：通过H₂O₂建立L-02细胞氧化应激损伤模型，对活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位以及IL-6、TNF-α等病程相关基因水平进行分析。结果：COS可改善H₂O₂损伤L-02细胞的增殖活力、抑制线粒体膜电位下降和ROS水平升高(P<0.05)。单细胞纳米生化分析结果显示，COS处理可以平衡H₂O₂损伤L-02细胞的ROS水平波动幅度。另外，COS改善了炎症(IL-6、TNF-α)、凋亡(Caspase 3、Caspase 9、Bax、Bcl-2)及氧化应激(Nrf2、HO-1)相关基因转录水平，表现出抗凋亡和抗氧化应激的作用。结论：COS对H₂O₂损伤的L-02细胞具有保护作用，本实验可为COS的应用...     

南、北五味子蛋白抗氧化活性和对HepG2细胞氧化应激损伤的修复作用

采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein, SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein, SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H₂O₂诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测细胞增殖率,荧光检测胞内活性氧水平,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性。结果表明,SSP清除自由基和还原能力均优于SCP,SSP与SCP都能对H₂O₂诱导HepG2造成的细胞生长抑制起到修复作用(P<0.05),显著降低胞内活性氧、丙二醛水平(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽的水平(P<0.05),且SSP对H₂O₂诱导的HepG2氧化应激损伤修复能力优于SCP。综上,2种五味子蛋白中SSP更适合应用于抗氧化功能性食品或保健食品工业中。     

饲料酵母水溶物具有促进草鱼原代肝细胞生长及修复过氧化氢损伤的作用

研究以3种酵母水溶物为实验材料,探究饲料酵母对草鱼原代肝细胞生长的促进作用和过氧化氢(H₂O₂)诱导草鱼原代肝细胞氧化损伤的缓解作用。实验使用酶消化法分离得到草鱼原代肝细胞,以200μmol/L H₂O₂处理细胞1 h建立氧化应激模型;分别选取质量浓度为25、50、100、200、400 mg/L的饲料酵母水溶物处理细胞,比较3种饲料酵母水溶物对原代肝细胞的促生长效果;分别使用3种饲料酵母的最佳促生长质量浓度处理模型细胞,分析饲料酵母水溶物对H₂O₂诱导的氧化损伤的缓解作用。结果表明：3种饲料酵母水溶物均能促进原代肝细胞增殖,酵母培养物YC-A、YC-B、酵母细胞壁多糖YCP的最佳促生长质量浓度分别为100、200、100 mg/L,在该质量浓度下细胞活力较对照组极显著提高(P<0.001)。相比于H₂O₂模型组,3个饲料酵母水溶物组细胞活力和MMP极显著提高(P<0.001),培养液中LDH活性极显...     

笃斯越橘对心肌细胞氧化损伤的保护及UPLC-MS分析

目的：探讨笃斯越橘对氧化损伤心肌细胞的作用。方法：以笃斯越橘果实为原料提取得到粗提物1个，并进一步纯化得到4个柱层析组分，建立H₂O₂氧化模型，考察提取物及纯化产物对氧化损伤细胞存活率的影响，并对最优组分进行成分分析。结果：笃斯越橘粗提物及4种纯化产物均能提高氧化损伤H9c2心肌细胞的存活率，其中30%乙醇水溶液洗脱组分效果最好，能有效减少ROS和MDA生成，提高SOD活性；对该组分进行超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)分析，鉴定出花色苷14种。结论：笃斯越橘果实提取及纯化产物均对H₂O₂引起的H9c2心肌细胞氧化损伤具有保护作用。     

豌豆蛋白水解物体外及对HepG2细胞的抗氧化活性

为了全面评价豌豆蛋白水解物(pea protein hydrolysates, PPH)及其超滤分离组分的体外及细胞抗氧化能力，以豌豆蛋白为原料，采用碱性蛋白酶和复合蛋白酶协同水解制备PPH,然后超滤分级得到PPH1(分子质量<3 kDa)、PPH2(分子质量3～5 kDa)、PPH3(分子质量>5 kDa)3个组分，使用不同的化学方法研究PPH和超滤分离组分的抗氧化活性，从中选择抗氧化能力最高的组分进一步考察其细胞内自由基清除能力并用H₂O₂应激的HepG2细胞评估其对氧化应激的保护作用。结果表明，各组分中PPH1具有最高的体外化学抗氧化活性，其氨基酸组成分析表明，抗氧化功能氨基酸占比高；在实验设定浓度下，PPH1能够显著抑制H₂O₂应激损伤HepG2细胞内活性氧的积累，对细胞应激损伤有明显的保护作用。研究认为，PPH及其超滤分离组分具有良好的体外化学及细胞抗氧化活性，对H₂O₂应激的HepG2细胞具有保护作用，能够为其作为一种天然源抗氧化剂...     

奎宁酸的抗氧化活性和神经保护作用研究

奎宁酸是一种小米来源的类黄酮类物质,为探究奎宁酸的神经保护作用,该研究建立了H₂O₂诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激模型,通过MTT法测定奎宁酸对SH-SY5Y细胞活性影响,同时测定了抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性和氧化应激标志分子谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量,利用实时荧光定量PCR检测了抗氧化酶和炎症因子表达情况,并用Western blot测定了炎症因子的蛋白表达量。研究结果表明,100μg/mL的奎宁酸处理显著抑制H₂O₂引起的SH-SY5Y细胞存活率下降;对细胞抗氧化指标的检测显示,奎宁酸处理可以增强细胞SOD的活性,增加GSH的水平并降低细胞的MDA水平,提高SOD、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GPx)等抗氧化酶基因的表达水平,降低氧化损伤;另外,奎宁酸还可以降低H₂     

柠檬皮中多酚的超声辅助提取及其抗氧化性研究

以柠檬皮为对象，采用超声辅助乙醇法提取多酚；化学法和H₂O₂损伤HepG2细胞氧化模型评价柠檬皮多酚提取物的抗氧化活性。结果表明，柠檬皮多酚的提取工艺为超声功率200 W、乙醇体积分数60%、超声温度55℃、料液比1:20(g/m L)、超声时间45 min，此条件下柠檬皮多酚得率为(1.76±0.12)%。柠檬皮多酚提取物具有DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基清除能力，显著抑制H₂O₂氧化损伤HepG2细胞，减少胞内ROS的生成，表现出较强的抗氧化性。     

蓝靛果硒多糖的理化性质、结构表征及红细胞氧化损伤保护活性

以蓝靛果果实多糖为原料,采用微波辅助HNO₃-Na₂SeO₃法制备蓝靛果硒多糖,后经柱色谱分离后得到高含量蓝靛果硒多糖。高含量蓝靛果硒多糖中硒含量为(0.184±0.03) mg/g,重均分子质量为5 88 2 8.3k D a,由半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖6种单糖组成,其物质的量比为1∶3.06∶6.18∶0.29∶1.78∶13.01。核磁分析表明高含量硒多糖中存在6种糖苷键,分别为：→3)-β-D-半乳糖(1→、→4)-β-D-甘露糖-(1→、→6)-α-D-葡萄糖-(1→、→4)-α-D-半乳糖醛酸-(1→、→2,4)-α-L-鼠李糖-(1→、α-L-阿拉伯糖-(1→。红细胞氧化损伤保护实验结果表明：同H₂O₂处理红细胞损伤组相比,保护组高含量蓝靛果硒多糖质量浓度为10.0 mg/mL时,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血率降低了32.52%;活性氧水平降低了44.93%;丙二醛含量减少了17.04 nmo...     

笛鲷鱼鳞源功能多肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用

本实验利用650μmol/L H₂O₂构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型,探究笛鲷鱼鳞源功能多肽(crimson snapper scale peptides,CSSPs)对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用。通过测定细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)质量浓度、胞内抗氧化酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)相对含量、相关凋亡基因(Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2)的相对表达量,从细胞氧化还原状态和细胞凋亡两方面阐明CSSPs对损伤Caco-2细胞的抗氧化作用。结果显示,CSSPs能够通过抗氧化防御系统来减轻H₂O₂对Caco-2细胞的损伤,主要包括增加胞内抗氧化酶活性以抑制LDH释放、胞内ROS积累、MDA及IL-8的生成。此外,CSSPs抑制氧化应激损伤诱导的细胞凋亡与线粒体...     

微波辅助H2O2/VC降解制备低分子量浒苔多糖的研究

为制备抗氧化活性较强的低分子量多糖,以辽宁营口沿海地区的浒苔为原料,采用微波辅助H₂O₂/V_C降解法制备低分子量浒苔多糖,利用DEAE-52、Sephadex G-100进行层析分离,对比浒苔多糖降解前后的理化性质与抗氧化活性,通过红外光谱法对降解后的浒苔多糖进行结构表征,利用薄层层析、高效液相色谱对分离到的多糖LEPⅢa组分进行单糖组成分析。结果表明,利用微波辅助H₂O₂/V_C降解可在较短时间(15 min)降解得到低分子量的浒苔多糖,经层析分离后,得到3种低分子量浒苔多糖LEPⅠ、LEPⅡ、LEPⅢa,分子量Mw分别为(23.6±0.5)、(24.6±0.6)、(22.9±0.5)kDa。与未降解的浒苔多糖相比,微波辅助H₂O₂/V_C降解得到的低分子量多糖的分子量、粘度均显著降低(P<0.05);抗氧化活性显著增强(P<0.05)。降解产物的分子量均在30 kDa以下,粘度在...     

鞣花酸的抗氧化性及其对PC-12细胞氧化损伤的保护作用研究

通过鞣花酸清除自由基、抑制亚油酸自氧化、还原铁离子(Fe³⁺)能力实验研究其抗氧化活性；以过氧化氢(H₂O₂)诱导PC-12细胞建立氧化损伤模型，探索鞣花酸对PC-12细胞氧化应激损伤的保护作用，建立鞣花酸抗氧化活性与对细胞氧化应激损伤之间的联系。结果表明，鞣花酸对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)、ABTS⁺·自由基清除的半抑制浓度分别为92.14、36.70、47.91μg/mL；对亚油酸自氧化的抑制率高达90%；对铁离子具有很强的还原能力。鞣花酸对H₂O₂诱导的PC-12细胞氧化损伤具有良好的保护作用，且与抗氧化活性之间具有良好的相关系。鞣花酸对细胞氧化损伤的保护作用可能与提高细胞的抗氧化能力有关。     

广西产铁皮石斛花提取物的细胞毒性及体外抗氧化活性研究

目的：探讨广西产铁皮石斛花不同提取物的细胞毒性及体外抗氧化活性。方法：以乙醇和水提取并通过冷冻和热风干燥获得铁皮石斛花提取物，测定提取物的总酚、总黄酮含量，以DPPH、 ABTS自由基清除率和FRAP总还原能力评价抗氧化活性并进行相关性分析；以MTT法测定提取物的细胞毒性；以丙二醛(MDA)含量、ABTS总抗氧化活性、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性水平评价提取物对H₂O₂诱导细胞氧化应激的保护作用。结果：乙醇提取物的总酚和总黄酮含量均高于水提取物，且抗氧化活性总体优于水提取物，冷冻干燥乙醇提取物(DEF)最优；总酚、总黄酮含量与抗氧化指标的相关系数均高于0.7；提取物在100～800μg/mL下对HepG2细胞毒性低；经H₂O₂诱导HepG2细胞的氧化应激后，提取物干预能降低MDA含量，提高ABTS、CAT、GSH-Px和T-SOD的活性水平。结论：铁皮石斛花乙醇提取物的总酚、总黄酮含量及抗氧化活性最优，细胞毒性低，可通过提高抗氧化活性...     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

蓝莓中花青素的抗氧化活性研究

本研究通过体外抗氧化实验和细胞损伤模型实验，研究蓝莓中花青素抗氧化能力。采用ABTS自由基清除实验、DPPH自由基清除实验、铁离子螯合能力实验和羟基自由基清除能力实验对100～500μg/mL不同浓度的花青素进行体外抗氧化活性评价。在氧化应激细胞模型实验中，通过测定H₂O₂诱导HepG2细胞中MDA含量、SOD活力、GSH含量探究100～500μg/mL不同浓度花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明，随着花青素浓度的增加，ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、铁离子螯合能力和羟基自由基清除能力均随之增加，且比模型组具有显著的抗氧化效果(P<0.05)。花青素可减少H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤时MDA含量，提高HepG2细胞内SOD活力及GSH含量，减少氧化损伤后细胞凋亡情况的发生，对HepG2细胞氧化损伤有一定保护作用。蓝莓中花青素可用于开发功能性食品以及作为食品添加剂用作抗氧化的良好材料，本研究可为花青素资源的开发利用提供理论基础。     

不同方法降解对鳞杯伞子实体多糖理化性质与活性的影响

为研究超声辅助H₂O₂降解对鳞杯伞子实体多糖(Clitocybe squamulose fruiting body polysaccharide,CSFP)理化性质与活性的影响，通过H₂O₂降解法、超声波降解法、超声辅助H₂O₂降解法制备3种降解CSFP，分别记为H-CSFP、U-CSFP、UH-CSFP。分子质量和单糖组成测定结果表明CSFP由I、II、III 3个不同分子质量组分构成，与CSFP相比，H-CSFP、U-CSFP和UH-CSFP的组分I和III分子质量降低，占比升高，而组分II分子质量升高，占比降低；但是不同降解方法均不影响多糖的单糖组成。扫描电子显微镜观察发现降解后多糖表面孔隙密度增加或直径增大，表明降解使多糖结构更松散。零剪切黏度和平均粒径测定结果表明，与降解前相比，降解后多糖零剪切黏度和平均粒径均显著降低，表明经过不同方法处理，CSFP发生不同程度降解。傅里叶变换红外光谱分析结果表明降解没有破坏多糖的主要官能团。流变特性分析结果表明...     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

H2O2协同超声辅助提取绿豆可溶性膳食纤维及其体外α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

以绿豆为原料，采用H₂O₂协同超声辅助提取绿豆可溶性膳食纤维(SDF)。以SDF得率为指标，在单因素试验的基础上通过响应面试验优化绿豆SDF的提取条件，并研究绿豆SDF对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果表明：最佳提取条件为超声功率200 W、超声时间40 min、H₂O₂体积分数2%、pH 11,在此条件下绿豆SDF得率为38.2%±0.1%,绿豆SDF对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用，IC₅₀为4.653 mg/mL。     

阿胶低聚肽的成分分析及其抗氧化活性

采用复合酶解法制备阿胶低聚肽,分析阿胶低聚肽的营养成分、氨基酸组成和分子量分布,并比较阿胶与阿胶低聚肽清除自由基和防护H₂O₂诱导成纤维细胞氧化损伤的能力。结果表明,阿胶低聚肽含有8种人体必需氨基酸和2种半必需氨基酸,疏水性氨基酸占比较高,约占氨基酸总量的46.23%。阿胶低聚肽的相对分子质量主要集中在900 Da以下,约83.87%。阿胶和阿胶低聚肽对DPPH、ABTS自由基清除率的IC₅₀值分别为1.89和1.39、3.33和2.06 mg/mL。10 mg/mL阿胶和阿胶低聚肽的预处理可使H₂O₂诱导损伤的成纤维细胞存活率分别提高了6.72%和14.34%,SOD的活性分别提升了178.04%和497.88%,减少了细胞内ROS水平。表明,阿胶和阿胶低聚肽均可清除DPPH、ABTS自由基和减轻H₂O₂诱导的成纤维细胞的氧化损伤,且阿胶低聚肽的效果优于阿胶。     

外源硫化氢对氧化应激下铜绿假单胞菌生长和生物膜的调节作用

探究外源硫化氢(H2S)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)在氧化应激(H₂O₂)胁迫条件下的作用。选取硫氢化钠(NaHS)作为外源H;S的供体。将铜绿假单胞菌分为两组;对照组的培养基中不添加Na HS;实验组的培养基中添加0.2mmol/L NaHS;观察两组菌株在0、1、2、2.5 mmol/L H₂O₂的压力下存活率、细胞形态、DNA外渗量、生物膜生长的变化情况。研究结果表明,随着时间的推移(从0.5 h到1 h再到1.5 h),与对照组菌株相比,实验组菌株的存活率显著降低(p<0.05),其中在1 mmol/L H₂O₂的处理下,实验组比对照组显著降低24.83%、15.69%、11.36%;在2 mmol/L H₂O₂的处理下,实验组比对照组显著降低4.92%、11.16%、5.75%;在2.5mmol/LH₂O₂的处理下,实验组比对照组降低6.83%、2.98%、0.39%。实验组较对照组相比,细胞形态受损和DNA外渗更加严重。利用结晶紫染色、扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜检测在不同浓度H₂O₂胁迫下生物膜形成的变化,结果表明,与对照组菌株的生物膜相比,在含有1 mmol/L和2 mmol/L H₂O₂的Luria Bertani(LB)培养基中实验组菌株的生物膜形成在培养48 h和72 h后显著减少。结果表明,H2S能增强H₂O₂对铜绿假单胞菌细胞的损伤。