基于高通量测序技术的蓝莓果实中细菌和真菌菌群多样性分析研究

目的 分析蓝莓中细菌和真菌菌群的组成及其多样性,探究不同蓝莓样品中微生物的暴露水平。方法 构建了蓝莓中微生物菌群的基因组文库,利用高通量测序技术分析了5种蓝莓中细菌和真菌菌群的组成及其多样性,借助微生物属水平和种水平分析比较了蓝莓中细菌和真菌菌群组成和丰度信息。结果 5种蓝莓中微生物菌群的多样性较高,但其细菌和真菌菌群组成仍存在共有特征,细菌和真菌中共有的操作分类单元数量分别为76和42。蓝莓中优势细菌主要归属于放线菌门、拟杆菌门、蓝藻菌门、厚壁菌门和变形菌门,优势真菌主要归属于子囊菌门、担子菌门和被孢霉门。结论 不同蓝莓样品中微生物菌群的组成变化较大,真菌菌群的多样性比细菌更丰富,这对蓝莓的腐烂变质、贮藏保鲜和生物防控研究具有重要意义。     

菌根食用菌研究进展

菌根食用真菌因其独特的美味和营养价值在食用菌占据重要地位。菌根食用菌除了营养价值,还具有很好的药用作用,并且在生态安全、生态系统稳定、环境修复等方面也具有重要的应用和研究潜力,菌根食用菌的非食用价值成为菌根菌研究的另一热点。本文从菌根食用真菌的资源、食药价值、生态安全、环境修复等方面对其研究现状进行概述。     

不同丛枝菌根真菌对大豆耐酸、铝能力的影响

通过砂培实验,探讨磷高效耐铝大豆基因型巴西10号在低pH、铝处理条件下,接种7种丛枝菌根真菌,其植株生物量、根系形态指标的变化,以及不同丛枝菌根真菌侵染结构丰度的变化.结果表明,低pH值和铝毒均是大豆生长的限制因子.低pH和铝处理条件下,与不接种的对照相比,接种7种丛枝菌根真菌均能显著增加大豆植株生物量、总根长及植株吸磷量,降低植株铝含量.其中,植株地上部干重增加2倍以上;总根长和吸磷量增加1.5倍以上,而植株铝含量降低了49.0%以上.菌根侵染结构的丰度发生变化.低pH显著增加了Glomusspurcum的丛枝丰度和外生菌丝丰度;铝处理显著增加了Gigaspora margarita和Acaulospora mellea的丛枝丰度,以及Scutell poracalospora的外生菌丝丰度;而低pH和铝处理均显著增加了Glomus etunicutum的外生菌丝丰度.暗示不同丛枝菌根真菌对酸、铝毒害的忍耐机制可能有所不同.     

接种丛枝菌根真菌对烟草青枯病抗性的影响

为探讨丛枝菌根真菌(Glomus intraradices和Glomus mosseae)对烟草青枯病抗病性的影响,采用盆栽试验研究了接种丛枝菌根真菌对烟草青枯病发病情况、抗病相关酶活性及丙二醛含量的影响。结果显示,接种Glomus intraradices和Glomus mosseae可促进烟草植株生长,烟株地上部和根系的干质量和磷含量以及地上部的氮含量显著增加,同时烟草青枯病的病情指数及发病率降低;在接种青枯菌条件下,与对照(烟株接种病原菌,但不接种丛枝菌根真菌)相比,接种Glomus intraradices和Glomus mosseae后,烟草叶片过氧化物酶活性分别增加22.9%和26.9%,同时丙二醛含量呈下降趋势。表明接种丛枝菌根真菌能提高烟株对烟草青枯病的抗性。     

基于高通量测序解析不同品种蓝莓表面菌群结构的多样性

为了解蓝莓果实表面真菌菌群多样性,明确不同品种蓝莓表面的优势菌群,采用高通量测序技术分析北陆、蓝金、莱克西、奥尼尔蓝莓中ITS1区基因序列,比较不同品种蓝莓表面微生物群落结构组成及多样性差异。结果发现:蓝莓主要的优势属为枝孢属、链格孢属;优势种为枝孢菌、链格孢、枝孢霉。由Simpson指数可知微生物群落丰度及群落多样性由高至低为莱克西、北陆、奥尼尔、蓝金。不同品种蓝莓表面的菌群结构与品种存在一定的聚类关系:北陆和莱克西群落结构相似度较高,而其它样品间微生物群落差异较大,各品种蓝莓表面的主要菌落相对丰度差异较大,枝孢菌、链格孢、枝孢霉为主要差异菌种。研究初步明确了蓝莓表面菌群结构的多样性,为保证蓝莓贮藏期间的品质安全提供一定的理论支持。     

土壤有机质含量和酸碱度对烟草内生真菌生物多样性的影响

为研究环境生态因素对烟草内生真菌的影响,在湖北省恩施州选取不同有机质含量和酸碱度的田块,以云烟87为供试植株,探究土壤有机质含量和酸碱度对烟草内生真菌生物多样性的影响。试验分别选取6块不同有机质含量（分别为16.3,20.7,23.3,27.1,31.4和35.6 g/kg）及4块不同pH（分别为4.3,5.5,6.4和7.6）的田块,采用五点取样法采集健康烟草植株,分离纯化根中内生真菌并根据rDNA-ITS序列分析进行菌种鉴定,以Shannon多样性指数及相对分离频率反映内生真菌生物多样性。结果发现,烟草内生真菌生物多样性随土壤有机质含量的升高呈先上升后下降的趋势,在6个不同土壤有机质含量下,内生真菌Shannon多样性指数分别为0.53、0.67、0.82、1.09、0.86和0.59;而烟草内生真菌生物多样性随土壤pH的升高呈下降的趋势,在4个不同土壤pH下,内生真菌Shannon多样性指数分别为1.36、1.12、0.93和0.83。研究表明,土壤有机质含量和酸碱度会对烟草内生真菌生物多样性产生一定影响。在一定范围内,土壤有机质含量的升高或者pH的降低可以增加烟草内生真菌的物种丰富度。     

AM真菌在赤霞珠扦插苗上的应用研究

在盆栽条件下,研究AM真菌Glomus mosseae、Glomus etunicatum 和两种真菌混合接种对酿酒葡萄赤霞珠扦插苗生长的影响.结果表明,接种AM真菌的植株均有效地被感染,显著促进葡萄扦插苗株高和茎基粗的生长,提高植株的生物量,促进根系活力的增加,而且菌根依赖性和根系活力都和菌根侵染率显著正相关.与对照相比,3个接种处理都显著提高葡萄扦插苗中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和P含量,以混合接种显著高于单接种,而且接种AM真菌对可溶性糖含量的影响最大.葡萄扦插苗的5个光合指标,接种AM真菌都显著高于对照,综合分析5个指标,可得知混合接种对植株光合作用增强作用大于单接种,Ge单接种要大于Gm单接种.可见,与对照相比,接种AM真菌可以显著促进赤霞珠扦插苗生长,其中以混合接种效果好于单接种,Ge单接种好于Gm单接种.     

蓝莓采后病原真菌分离及其生物学鉴定

为了深入研究贵州麻江县蓝莓果实采后贮藏过程中的病原真菌及其生物学鉴定,首先对贮藏库中蓝莓果实的病害真菌进行分离、纯化和观察;然后采用真菌ITS区特异性引物对所分离的蓝莓病原真菌ITS区进行PCR扩增测序,将病原真菌的ITS区序列与NCBI中核酸数据库进行比对分析,确定蓝莓病原真菌的生物学分类。同时对病原真菌在不同贮藏条件下的生长状况进行初步研究。在采后蓝莓果实的贮藏期分离得到12株蓝莓真菌,其中引起采后腐烂的病原真菌主要为1号拟盘多毛孢(Pestalotiopsis)、2号Neofusicoccum、3号青霉(Penicillium)、6号地霉(Geotrichum)和8号枝孢霉(Cladosporium)。对病原真菌进行初步研究后发现青霉是低温贮运过程中的主要病原菌、Neofusicoccum和地霉是高温贮运过程中的主要致腐菌。该试验分析结果可为微生物污染途径分析以及生物防治蓝莓腐烂提供一定的理论依据。     

基于FUNGuild的镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落研究

为了解镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株在根际真菌群落结构与功能上的差异,联合应用高通量测序和FUNGuild技术研究了镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落,结果表明:（1）镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落的Shannon指数为4.14,而未发病烟株则高达4.71,未发病烟株根际真菌群落多样性显著高于发病烟株,镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落在组成上有显著差异;（2）镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌以病理营养型为主,占54.64%,而未发病烟株根际真菌则以腐生营养型为主,占46.10%;（3）镰刀菌根腐病发病烟株根际的病原菌相对丰度为30.73%,显著高于未发病烟株的1.12%,镰刀菌在病原菌群落中占绝对优势地位。高通量测序与FUNGuild联用可对土传病害感病烟株的根际优势病原真菌群落进行准确鉴定,可为烟草病害的防控提供科学参考。      

蓝莓果实常温贮藏过程中表面病原真菌的分离与鉴定

蓝莓果实采后常温贮藏过程中极易腐烂变质,严重影响了蓝莓果实的贮藏品质。以"蓝丰"蓝莓果实为试材,通过对采后常温贮藏过程中自然发病果实表面病原菌的分离与筛选,明确蓝莓腐烂的主要病原菌的种类。采用传统混菌法对表面病原真菌进行培养和纯化,经形态学观察分析,初步确定蓝莓表面病原真菌种类,并进行返接试验再确定。最终采用真菌ITS区特异性引物对所分离的蓝莓病原真菌ITS区进行PCR扩增,测序后比对分析确定蓝莓果实常温贮藏过程中的表面病原真菌为青霉、产黄青霉和链格孢霉。分别确定各菌种的最适生长温度,其中青霉、产黄青霉和链格孢霉的最适生长温度分别为28,26~28℃和26℃。本研究结果为蓝莓果实贮藏保鲜过程中病害的预防和控制提供了理论依据。     

“多菌灵”对AM真菌侵染烟苗及菌根效应的影响

为了摸清杀真菌剂对丛枝菌根真菌侵染烟苗及菌根效应的影响,设置了漂浮育苗阶段接种丛枝菌根真菌(AM真菌)同时施用"多菌灵"试验。结果表明:接种AM真菌总体上表现出促进烟苗生长的趋势,但菌根效应因菌株不同而异,且因施用杀真菌剂使之复杂化。在施用低浓度的"多菌灵"(稀释倍数500倍)时,接种球囊霉真菌Glomus intraradicesSmith(BEG-141)和Glomus intraradicesSchenck(BEG-193)均不同程度地增加了烟苗的生物量、含磷量和磷吸收量,以及叶绿素含量和几丁质酶活性。在施用高浓度的"多菌灵"(稀释倍数为≤500倍)时,AM真菌感染率降低,菌根烟苗生长受到抑制,菌根效应减弱。此外,两株AM真菌对"多菌灵"的敏感性不同,BEG-193菌根烟苗的生长对施药不敏感,但高浓度的杀真菌剂抑制BEG-141菌根烟苗的生长。因此,为使烟苗能正常生长,以及保证AM真菌能改善烟苗营养和提高其抗逆性,在施用"多菌灵"时,稀释倍数应大于500倍。     

植物内生真菌的研究与展望

植物内生真菌具有丰富的多样性;可以产生与宿主相同、相似或在农业、医药等行业有重要应用价值的活性物质;通过与药用植物的共生关系对某些药物的形成具有重要作用。从植物内生真菌物种多样性与产生生物活性物质多样性等方面总结近年最新的研究进展,提出了植物内生真菌及活性物质研究的未来发展方向。     

块菌属真菌的化学成分及生物活性研究进展

块菌(truffles)是一类稀有的地下生外生菌根的食药用真菌,它富含丰富的化学成分和广泛的生物活性,具有极高的食用和药用价值。块菌属真菌中主要含有甾类、鞘脂、挥发性成分、核苷、酚类、多糖和营养元素等成分,其子实体具有抗诱变和抑菌作用,其多糖具有抗氧化和抗肿瘤作用等。本文总结了块菌属真菌中含有的化学成分及其生物活性,为进一步研究开发利用,将其活性成分添加到食品和药品中提供理论依据。     

VA菌根真菌在烟草上接种方法研究

试验研究在不同土壤类型上以及在不同苗龄时期接种ＶＡ菌根真菌,结果得出：ＶＡ菌根真菌与烟草能建立很好的共生关系,在烟苗大十字期接种能达到较好的浸染效果。ＶＡ菌根真菌的侵染率在红壤上高于河砂,灭菌处理高于不灭菌处理。较为明显的是,ＶＡ菌根真菌、烟株以及土壤之间存在着最佳组合关系,以Ｇ．Ｍ菌种在红壤上接种为优。     

烟草VA菌根研究进展

综述了烟草VA菌根真菌资源 ,VA菌根真菌对烟草病虫害的影响、作用机理及在烟草防虫防病中的应用。     

蓝莓营养保健功能及其活性成分提取技术研究进展

蓝莓因其独特的风味、丰富的营养成分以及功能的多样性而倍受人们的喜爱。文章综述蓝莓的营养价值,重点介绍其在保护视力、抗氧化、增强记忆力和抗衰老等方面的保健功能,并对蓝莓活性成分提取技术的发展现状进行概述,展望蓝莓的发展前景。旨为蓝莓进一步的开发利用提供参考和借鉴。     

甘蔗大田接种AM菌剂效应研究

为了探讨丛枝菌根(AM)真菌对大田甘蔗生长的影响,本研究进行了甘蔗大田接种AM菌剂的试验,初步分析其对甘蔗土壤及其微生物群落,以及对甘蔗植株生长的影响。结果表明:施AM菌剂能提高土壤中有效氮、磷和钾的含量;提高土壤的pH值,促进根系对根际土壤微量元素的吸收,特别是对Mn的吸收。没有施用化肥,仅施AM菌剂的处理土壤中的真菌数量极显著地高于其它处理;甘蔗大田施AM菌剂能增加株高、有效茎数和茎径,有效促进蔗株生长。     

间作对连作葡萄生长及根际环境的影响

为了探究间作对连作葡萄根际环境的影响以及葡萄长势与根际环境的关系,在前期试验基础上,调查了不同间作作物对连作葡萄长势、根际土壤理化性质及微生物群落的影响。结果发现：间作大葱、花生对连作葡萄长势有促进作用,间作苦荬对连作葡萄有抑制作用;间作大葱、花生提高了根际土壤细菌与真菌结构多样性比值,间作苦荬该比值降低;葡萄根际土壤细菌、真菌结构多样性分别与根际土壤中pH、碱解N存在显著相关性,而土壤中细菌与真菌结构多样性比值与连作葡萄植株长势具有极显著相关性。因此认为,可通过间作大葱、花生提高根际土壤细菌与真菌结构多样性比值,来改善葡萄的连作障碍。     

中国白酒窖池真菌的研究进展

窖池是白酒酿造过程中的重要固态生物反应器,其中参与发酵的菌群结构对白酒风格和质量具有重要影响。该文综述了酱香型、浓香型、清香型等不同类型白酒的窖池真菌多样性及其功能与作用,提出了窖池真菌研究方法和研究技术的未来发展方向。     

银/壳聚糖复合物制备及其对蓝莓真菌的抑制作用

制备银/壳聚糖复合物。采用紫外-可见光光谱(UV-Vis)、傅里叶红外变换光谱(FT-IR)、动态光散射(DLS)以及透射电镜(TEM)对产物进行表征和确定。以蓝莓为代表,探讨银/壳聚糖复合物在果蔬真菌病害防治应用的可能性。从蓝莓中分离鉴定到蓝莓病原真菌,研究银/壳聚糖复合物对此真菌的抑制作用,结果表明:银/壳聚糖复合物对该病原真菌的菌丝生长、孢子萌发及芽管伸长都有明显抑制作用。当银/壳聚糖复合物质量浓度为0.4 mg/m L时,其对菌丝生长的抑制率可达70.6%,而壳聚糖(0.4 mg/m L)使用量仅为11.7%;当银/壳聚糖复合物质量浓度为0.20 mg/m L时,孢子萌发完全受到抑制,而壳聚糖质量浓度为2.0 mg/m L时才能达到完全抑制效果。对蓝莓进行抗病性试验,结果表明腐烂率随银/壳聚糖复合物浓度的增加而降低。当银/壳聚糖复合物的质量浓度为1.6 mg/m L时,蓝莓发病率降到10%以下。