石花菜多糖的分离纯化及单糖组成分析

以石花菜为原料,对石花菜多糖进行分离纯化,并对纯化后多糖组分的理化性质及单糖组成进行分析。利用复合酶法提取石花菜多糖并采用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52离子交换柱层析及Sephadex G-200凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,按峰收集主要的多糖组分GAP1,对其总糖、蛋白质、糖醛酸及硫酸基质量分数进行测定,并采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)对多糖进行衍生化,通过高效液相色谱法测定其单糖组成。结果表明:石花菜粗多糖经柱层析后收集得到主要多糖组分GAP1,其总糖质量分数为92. 56%,糖醛酸质量分数为44. 53%,硫酸基质量分数为6. 92%,不含蛋白质; PMP柱前衍生高效液相色谱法测得GAP1主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和L-岩藻糖6种单糖按照不同比例缩合而成,各单糖物质的量比为1. 00∶1. 00∶4. 45∶27. 31∶2. 27∶1. 88。     

武夷岩茶“黄片”茶多糖的提取工艺优化及其理化性质分析

为提高武夷岩茶"黄片"茶多糖的提取率及分析其纯化后的理化性质,以茶多糖提取率为响应值,运用响应面法优化"黄片"茶多糖的提取工艺参数,并通过生化分析及红外光谱研究去蛋白纯化后的茶多糖理化性质。结果表明,"黄片"茶多糖最佳提取工艺为提取时间30.29 min、温度为71.15℃、料液比为1:25,在此条件下,茶多糖提取率的理论值为8.45%。经过纯化后的茶多糖还原糖、中性糖、蛋白质和糖醛酸质量分数分别为12.37%、18.99%、9.563%和6.358%;对茶多糖进行红外光谱分析,发现存在糖类及蛋白质的吸收峰,表明武夷岩茶"黄片"茶多糖是一种结构复杂的糖蛋白。     

响应面优化石花菜琼胶提取工艺

采用高温高压法提取石花菜琼胶,以提取率和凝胶强度为指标研究其提取工艺。在单因素实验的基础上,采用BBD中心组合实验设计,利用Design-Expert软件,建立数学模型,确定琼胶最佳提取工艺参数:柠檬酸为0.03%、提取时间为33 min,料液比为1∶36、提取温度为110℃,此条件下琼胶提取率高达37.85%,其感官性质、理化性质符合国家标准,凝胶强度为873 g/cm2,属于高强度产品,为石花菜深加工提供一定的理论依据。     

米糠多糖理化性质研究

通过Molish、Benidick、I-KI等颜色反应研究米糠多糖的理化性质,并运用NMR、HPLC、IR等现代分析手段对米糠多糖的单糖组成、分子量分布、理化性质进行了研究。结果表明米糠多糖中葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖的摩尔比为1.669∶1∶0.225∶1.228,分子量在4.878×105(±0.506%)范围的多糖含量为70.8%,分子量在9.802×104(±3.368%)范围的多糖含量为29.2%。     

火棘水溶性多糖PP-A2理化性质研究

对火棘水溶性多糖的PP-A2组分的理化性质进行了研究。结果表明:PP-A2的相对分子质量约为30kDa,其单糖组分主要是由阿拉伯糖和鼠李糖以及保留时间为3.46min的未知组分(由红外光谱分析推测其可能是糖醛酸)组成的杂多糖,其中还含有少量的果糖、半乳糖和甘露糖,PP-A2中各糖残基物质的量的比为:(阿拉伯糖+鼠李糖)∶果糖∶半乳糖∶甘露糖=9.56∶3.37∶1.88∶1。     

牡丹花蕊多糖三相分离纯化及其理化性质

采用三相分离法纯化牡丹花蕊多糖,并对其理化性质进行分析。结果表明,纯化的最优条件是pH 7、硫酸铵质量分数10%、叔丁醇与提取液体积比为2. 0,该条件下多糖回收率为69%,蛋白质去除率为73%,纯化后多糖纯度为99. 24%,色素清除率为95. 36%; PMP柱前衍生化高效液相色谱(PMP-HPLC)分析表明,牡丹花蕊多糖的单糖组成为鼠里糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,其摩尔比为1. 24:1. 59:2. 00:9. 11:1. 68;傅立叶红外变换光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FR-IR)与氢核磁共振波谱(~1H nuclear magnetic resonance,1H NMR)结果表明,牡丹花蕊多糖是一种以半乳吡喃糖为主的酸性多糖,并且同时存在α-构型和β-构型,以β-构型为主。     

纳豆多糖的理化性质及结构分析

对纳豆多糖各理化成分的含量进行测定,采用高效液相色谱及气-质联用色谱分析分子质量和单糖组成,并经傅立叶红外光谱测定纳豆多糖的官能团以及刚果红实验检测其空间结构。结果表明,纳豆多糖中总糖66. 01%,蛋白质1. 12%;糖醛酸及SO24-分别占2. 79%、1. 57%;纯化后发现,纳豆多糖为单一组分,分子质量为11. 53 k Da,单糖组成及摩尔比为岩藻糖∶木糖醇∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1. 04∶1. 53∶1. 57∶1. 19∶4. 68;红外光谱分析出其具有多糖的特征吸收峰,刚果红实验表明纳豆多糖具有三股螺旋结构。     

大粒车前子麸壳多糖的分离纯化及部分理化性质

以大粒车前子麸壳为研究对象,提取水溶性多糖组分并对其部分理化性质进行分析。车前子麸壳水提粗多糖经过SephacrylTMS-400 HR葡聚糖凝胶柱得到纯化的多糖组分（polysaccharide from bran of Plantago asiatica L.,PBPL）。结果显示：PBPL为均一多糖,平均分子质量为619 651 D,糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量依次为（71.420±0.007）%、（6.07±0.02）%、（20.74±0.05）%。PBPL含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖5 种单糖,物质的量比为2.24∶1.87∶1.00∶3.24∶3.49,糖醛酸主要是半乳糖醛酸。红外光谱中有多糖、蛋白、糖醛酸以及β-吡喃糖环特征吸收峰。     

响应面法优化鳞柄小奥德蘑多糖的提取及其理化性质和营养成分初探

目的:通过响应面法获得鳞柄小奥德蘑多糖的最佳提取工艺,并确定其理化性质和营养成分含量,为日后研究提供理论基础依据。方法:根据Box-Benhnken设计原则,以提取时间、提取温度、提取料液比进行3因素3水平研究,通过Design-Expert软件分析获得的最佳提取条件;通过苯酚硫酸法计算鳞柄小奥德蘑多糖中糖含量;紫外光谱扫描确定多糖中是否含有蛋白质,以考马斯亮蓝法测定蛋白含量;间羟基联苯法测定多糖中糖醛酸含量;全自动氨基酸分析仪测定其中氨基酸含量;原子吸收分光光度法测量微量元素含量。结果:多糖最佳提取条件为提取时间3 h、提取温度80℃、提取液料比为35:1,此条件下多糖提取率为8.72%;鳞柄小奥德蘑多糖中糖含量为28.30%;多糖在280 nm处有明显的紫外吸收峰,测得蛋白质含量为9.40%;多糖中几乎不含糖醛酸;多糖中富含赖氨酸、色氨酸等8种人体必需氨基酸及多种其他氨基酸;多糖中含有铁、铜、锌等多种微量元素。结论:鳞柄小奥德蘑多糖的多种测试结果均表明其理化性质优良,富含多种营养成分,具有广泛的开发空间。     

不同提取工艺下葛根多糖的比较研究

研究了Sevag法脱蛋白和三氯乙酸法脱蛋白对葛根多糖得率及多糖性质的影响.采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以重量法确定多糖得率;运用碘-碘化钾反应和硫酸-咔唑反应鉴定两种工艺下葛根多糖的理化性质;通过紫外吸收光谱和红外光谱验证两种多糖的结构.研究结果表明,Sevag法脱蛋白所得多糖得率为4.44%,三氯乙酸法脱蛋白所得多糖得率为7.90%.碘-碘化钾反应和硫酸-咔唑反应鉴定表明两种多糖理化性质一致;紫外吸收光谱和红外光谱验证均反应两种多糖结构基本一致.     

芡实皮渣多糖的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

为了实现芡实加工副产物资源的高值化利用,优化芡实皮渣多糖的提取工艺参数,分析其理化性质,初步研究多糖的体外抗氧化活性。在单因素实验基础上,选择料液比、提取温度、提取时间、醇沉浓度为自变量,多糖得率为因变量,通过L₉(34)正交试验法优化芡实皮渣多糖的提取工艺。利用5种体外抗氧化活性测试方法,即总还原力,清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐,并与抗坏血酸进行对比,评价芡实皮渣多糖的抗氧化能力。结果表明:芡实皮渣多糖最佳提取工艺为料液比1:40、浸提温度55 ℃、浸提40 min、醇沉浓度80%,提取3次,得率45.94%,纯度82.67%。碘-碘化钾反应显示其属于非淀粉类多糖,HPLC分析显示该多糖的基本结构单元为葡萄糖。吸水性和吸油分别为(65.15±1.52)和(1.27±0.04) g/g,多糖凝胶质构特性结果显示其黏性很大,弹性较低,回复能力弱。多糖对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子和亚硝酸盐具有一定的清除能力,当芡实皮渣多糖浓度为1.0 mg/mL时,对羟基自由基、超氧离子和亚硝酸盐的清除率分别为35.56%、34.88%和20.63%,对DPPH自由基清除率IC₅₀为(0.307±0.008) mg/mL;本研究优选的芡实皮渣多糖提取工艺稳定可靠,多糖具有一定的抗氧化能力,实验结果可为芡实加工副产物资源的综合开发利用提供理论基础。     

不同干燥方式对刺梨多糖多糖含量及抗氧化活性的影响

目的比较3种不同的干燥方式对刺梨多糖的多糖含量及抗氧化活性的影响。方法采用3种不同干燥方包括热风干燥、冷冻干燥和喷雾干燥法干燥刺梨多糖,通过多糖含量、蛋白质含量、红外光谱分析对刺梨多糖的理化性质进行评价,并研究了其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), ABTS]自由基的能力。结果热风干燥多糖,冷冻干燥多糖和喷雾干燥多糖具有不同多糖含量和抗氧化活性。与热风干燥和冷冻干燥相比,喷雾干燥多糖具有更强的抗氧化能力。结论考虑到多糖的理化性质和抗氧化活性,喷雾干燥法是制备刺梨多糖的一种较好的方法,建议在食品工业中应用。     

石花菜醇提物抑菌活性和抗氧化活性研究

本实验研究了石花菜醇提物的抑菌活性和抗氧化活性。采用生长速率法测定各相提取物的抑菌活性,结果表明石花菜含有丰富的抗病原真菌资源;采用水杨酸法和邻苯三酚法分别测定各相提取物对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,结果表明石花菜有较强的抗氧化能力。同时对各相提取物进行了系统的化学成分定性检测,结果表明石花菜的生物活性可能与其中含有的海藻多糖、黄酮、甾体皂甙、内酯及香豆素等活性成分有关。     

响应面法优化桦褐孔菌多糖提取工艺及其抗氧化活性

利用超声波辅助技术研究桦褐孔菌多糖的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行评价。在单因素试验基础上,以多糖提取率为指标,采用Box-Behnken响应面法优化超声辅助提取条件;采用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)法纯化多糖后,通过DPPH自由基清除试验来评价其抗氧化活性。结果表明,桦褐孔菌多糖的最佳提取条件为:超声时间31 min,超声温度52℃,液料比为21∶1(mL/g),多糖提取率达到(3.81±0.19)%。桦褐孔菌粗多糖中多糖质量分数为19.0%(以葡萄糖计),蛋白质量分数为13.9%(以牛血清蛋白计)。体外抗氧化试验显示,桦褐孔菌精制多糖对DPPH自由基有一定的清除作用。     

松茸多糖的体外抗氧化性及对乙醇氧化损伤小鼠作用的研究

本文以超氧阴离子自由基（Superoxide anion radicals,O₂－ · ）、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（2,2'-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS）自由基清除能力、总还原能力为指标研究松茸多糖（Tricholoma matsutake polysaccharide,TMP）体外抗氧化能力;建立乙醇氧化损伤小鼠模型,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶（Alanine transaminase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase,AST）和碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,AKP）的活力以及肝脏中过氧化氢酶（Catalase,CAT）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）的水平研究松茸多糖的体内抗氧化活性。体外抗氧化结果表明,松茸多糖对超氧阴离子自由基和ABTS自由基有较好的清除能力,当浓度为1 mg/mL时,清除率分别为56.67%和96.60%,而松茸多糖的总还原能力较低,当浓度为1 mg/mL,吸光值为0.163;动物实验结果表明,连续灌胃四周后,与模型对照组相比,松茸多糖可以使小鼠血清中的ALT、AST和AKP活力显著降低（P<0.05）,使肝脏中CAT、SOD和GSH-Px的水平显著升高（P<0.05）,MDA的含量显著降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。研究表明松茸多糖有一定的抗氧化活性,可为松茸多糖的后续开发应用提供思路。     

黑木耳中多糖和类黄酮的隔氧提取及其协同抗氧化作用

采用隔氧与超声波辅助相结合方式提取黑木耳中多糖和类黄酮,研究复配比例、复配液浓度、降温过程和反应时间对DPPH自由基和羟自由基清除能力的影响,并评价黑木耳多糖与类黄酮的协同抗氧化作用。结果表明,隔氧超声提取的黑木耳多糖和类黄酮含量较高,分别为3.85%和4.2 mg/100 g,两者抗氧化能力均显著(p<0.05)高于有氧超声提取法。黑木耳多糖和类黄酮复配比例为7:3时,复配液对DPPH自由基清除率达到95%,对羟自由基清除率为62%。黑木耳多糖和类黄酮复配液浓度、反应时间与DPPH自由基清除能力显著正相关(p<0.05)。复配液浓度、反应温度与羟自由基清除能力显著正相关(p<0.05)。黑木耳多糖和类黄酮复配品可提高对DPPH自由基和羟自由基清除效率,具有协同抗氧化作用。     

蝉花孢梗束多糖的抗氧化及对环磷酰胺致肝损伤小鼠的保护作用

采用水提醇沉法制备蝉花孢梗束粗多糖,经DE-52离子交换纤维素及葡聚糖G-100凝胶柱层析纯化后得蝉花孢梗束多糖纯品。以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基能力、还原力、清除羟基自由基能力和螯合铁离子能力为指标,评价了蝉花孢梗束多糖组分的抗氧化活性;采用环磷酰胺致肝损伤小鼠模型评价了蝉花孢梗束多糖组分BSG-2的保肝作用。结果表明,蝉花孢梗束多糖各组分均具有较好的剂量依赖型抗氧化能力,BGS-2的体外抗氧化能力最高,清除DPPH自由基、清除羟基自由基、螯合铁离子的EC₅₀值分别为0.45、0.73和2.06 g/L。BSG-2能极显著降低环磷酰胺致肝损伤小鼠的血清ALT和AST活性(P<0.01),极显著提高小鼠肝脏SOD、CAT和GSH-Px活性,降低丙二醛含量(P<0.01),表明蝉花孢梗束多糖具有缓解环磷酰胺致小鼠肝损伤作用。BGS-2可能通过提高体内抗氧化酶活性、直接清除自由基和螯合金属离子等途径发挥其对环磷酰胺致小鼠肝损伤的保护作用。     

基于膜技术的灵芝粗多糖分级分离及抗氧化活性比较

本文主要研究膜分离技术对灵芝粗多糖分级分离效果及其抗氧化活性的影响。以灵芝子实体为原料,通过热水浸提后用100、10和1 kDa超滤膜多级组合对灵芝粗多糖进行分级分离,分别记为GLP100、GLP10和GLP1。比较3种不同孔径膜对灵芝粗多糖的分级效果、理化性质和抗氧化活性的差异。傅里叶红外变换光谱分析结果证明3种多糖样品均具有典型的β-型糖苷键吸收峰,刚果红与圆二色谱分析证明了3种粗多糖是具有螺旋结构的多糖,且GLP100和GLP10是具有三螺旋结构的多糖。SEM结果表明三种多糖颗粒大小明显不同,进一步验证了不同膜是可以对灵芝粗多糖进行分级。还原力、OH自由基、2, 2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐阳离子自由基（ABTS自由基）和1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH自由基）清除结果表明,3种粗多糖样品均具有一定的抗氧化能力,但存在些许差异。其中三种多糖还原力十分接近,GLP100的OH和DPPH自由基清除能力好于其他两种多糖, GLP1的ABTS自由基清除能力比其他两种多糖效果更好。实验结果表明,膜分离技术可以有效地对灵芝多糖进行分级。     

纤维素酶和果胶酶提取对甘草渣多糖抗氧化和抗肿瘤性能的影响

目的:考察不同酶提取对甘草渣多糖抗氧化性和抗肿瘤性能的影响,为后续甘草资源的有效再利用提供依据。方法:选用纤维素酶和果胶酶,在实验的优化条件下分别提取甘草渣多糖,比较两种酶提取的甘草渣多糖的得率、红外光谱、抗氧化性和抗肿瘤性。结果:果胶酶和纤维素酶提取的多糖得率分别为8.43%和10.71%。红外光谱结果表明,两种酶提取的多糖均具有α-吡喃环糖环。抗氧化性实验结果表明,果胶酶和纤维素酶提取的多糖对DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基清除的IC₅₀值分别为0.00243、0.305、0.0403 mg/mL和0.226、0.0238、0.0401 mg/mL。抗肿瘤结果表明,在0.00250~0.125 mg/mL浓度范围内,纤维素酶提取的多糖肿瘤细胞的抑制率高于果胶酶提取的多糖。结论:纤维素酶提取的多糖得率更高、对羟基自由基的清除能力和抗肿瘤性能更强,果胶酶提取的多糖对DPPH自由基的清除能力更强,两者对ABTS自由基的清除能力基本相同。     

碱提桑黄菌丝体多糖的抗氧化活性

为了研究碱提桑黄菌丝体多糖PL-N的抗氧化活性。利用物理、化学方法分析了PL-N的化学组成及基本理化性质,在此基础上,通过体外抗氧化模型、细胞试验和D-半乳糖所致的小鼠亚急性衰老模型综合评价了PL-N对DPPH和羟自由基的清除作用、过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞的保护作用及体内抗氧化活性。结果表明:PL-N的总糖和糖醛酸含量分别为84.92%和16.92%,不含蛋白质,主要由D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其分子摩尔比为5.5:7.8:1.8:1。PL-N具有明显的清除自由基能力,且呈剂量依赖关系,在2.0 mg/mL时,PL-N的DPPH和羟自由基清除率分别为72.1%和83.3%。同时,在80 μg/mL时,PL-N预处理对氧化损伤细胞的存活率达到88.7%,揭示其突出的体外抗氧化活性。与模型组相比,灌胃高剂量PL-N的小鼠脏器指数、血清和肝脏中的抗氧化酶活性和总抗氧化能力均极显著增加(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,PL-N具有突出的抗氧化活性,可作为功能性食品应用于膳食、理疗中。