毛水苏多糖对糖尿病小鼠肾脏的保护作用

目的:探究毛水苏多糖（polysaccharides from Stachysbaicalensis, SBP）对糖尿病小鼠肾脏的保护作用。方法:采用高糖饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导建立Ⅱ型糖尿病模型，连续灌胃28 d后，考察毛水苏多糖对糖尿病小鼠的体重、空腹血糖水平、肾脏指数、肾功能指标血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿蛋白以及肾脏组织抗氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）活力与含量的影响，并进行肾脏组织病理学检测，采用qRT-PCR法测定肾脏组织中VCAM-1、IL-1β及IL-6的mRNA水平。结果:毛水苏多糖可明显减轻糖尿病症状，体重异常情况明显改善，空腹血糖值与肾脏指数明显降低。给药组小鼠肾功能指标Scr、BUN、尿蛋白含量显著降低（P<0.05），肾脏组织抗氧化指标SOD、GSH-Px、CAT含量与活力显著升高（P<0.05），抑制MDA的产生，对抑制肾脏肿胀和修复组织损伤具有良好的效果，有效降低肾脏组织中VCAM-1、IL-1β及IL-6的mRNA水平。结论:毛水苏多糖对于STZ诱导的糖尿病小鼠的肾脏保护作用可能与增强体内抗氧化能力、抑制机体的过氧化损伤、减少脂质过氧化合成以及调节炎症因子有关。     

桦褐孔菌与其固体发酵物对2型糖尿病大鼠的氧化应激损伤作用

目的:研究比较桦褐孔菌菌核、固体发酵物和二者的水提物给药对糖尿病大鼠机体炎症和氧化应激损伤的作用。方法:本研究采用高糖高脂饮食联合STZ诱导的2型糖尿病大鼠模型,监测大鼠体重、口服糖耐量试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清中炎症因子白细胞介素IL-6、IL-1β,肿瘤坏死因子TNF-α、超氧化物歧化酶SOD及丙二醛MDA的含量。结果:与模型组相比,桦褐孔菌IO 3.08、6.16 g/kg剂量组、桦褐孔菌水提物WIO 0.4 g/kg剂量组、桦褐孔菌固体发酵物水提物WSFIO 0.8 g/kg剂量组均可显著提高糖尿病大鼠体重;固体发酵物SFIO 1.3、2.6 g/kg剂量组能显著地改善大鼠口服糖耐量（P<0.05,P<0.01）;WIO 0.4、0.8 g/kg剂量组、WSFIO 0.4 g/kg剂量组均可显著降低血清中IL-1β的水平;IO 3.08、6.16 g/kg剂量组、WIO 0.4 g/kg剂量组、SFIO 1.3、2.6 g/kg剂量组和WSFIO 0.8 g/kg剂量组均可显著降低血清中TNF-α的水平;桦褐孔菌各给药组在不同程度上均可显著提高血清中SOD的水平（P<0.05,P<0.01或P<0.001）;桦褐孔菌各给药组均可降低血清中MDA的水平（P<0.01或P<0.001）。结论:桦褐孔菌固体发酵物具有良好的抗炎及抗氧化活性。直接以菌粉、固体发酵物或二者的水提物给药对各个指标的影响不一,总体来说,固体发酵物代替野生桦褐孔菌改善2型糖尿病的炎症及氧化应激具有可行性。     

桦褐孔菌多糖对小鼠免疫调节作用的影响

探讨桦褐孔菌粗多糖对正常小鼠和低免疫力小鼠免疫功能的影响。依据各实验具体分组进行试验观察该实验材料对小鼠免疫器官（胸腺、脾脏、肝脏）、炭粒廓清指率和和血清溶血素含量的影响。桦褐孔菌多糖可显著提高小鼠免疫器官指数、吞噬指数和血清溶血素含量。结论：桦褐孔菌多糖有提高免疫功能的作用。     

桦褐孔菌水提物免疫活性的研究

研究桦褐孔菌水提物对免疫低下BALB/c小鼠的免疫调节作用。方法:72只BALB/c小鼠按体重随机分为6组(n=12),各组分别为:正常实验组、模型对照组、阳性对照组、桦褐孔菌水提物低剂量组、中剂量组、高剂量组;通过小鼠腹腔注射环磷酰胺的方式,建立免疫缺陷模型,饲养13天后,断颈处死,评价小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏淋巴细胞的增殖能力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)等含量的变化情况,考察桦褐孔菌水提物的免疫调节作用。结果表明:桦褐孔菌水提物剂量组与模型组比较,剂量组500mg/kg、1000mg/kg、2000mg/kg对环磷酰胺致免疫低下小鼠的体重和脏器指数都有显著的提高作用,能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,促进脾脏淋巴细胞的增殖能力,显著的提高NK细胞的杀伤活性;提高免疫低下小鼠肝脏和血清中的GSH-Px、SOD、CAT、AKP等酶的活性,从而提高免疫低下小鼠的免疫功能。     

桦褐孔菌多糖对糖尿病小鼠的干预作用及机制

目的:评价桦褐孔菌体内降血糖作用,挖掘其有效干预高血糖的物质基础。方法:采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病小鼠模型,比较干预前、后小鼠体质量及空腹血糖值的变化,并对不同处理组小鼠进行葡萄糖耐受试验。通过测定血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖化血清蛋白,肝组织中丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的含量变化,探究桦褐孔菌不同提取物对糖尿病小鼠糖脂代谢和氧化应激水平的影响。在此基础上,开展桦褐孔菌水提物体外α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究。结果:体内试验结果表明桦褐孔菌水提物和醇提物均有一定的降血糖效果,水提物效果优于醇提物;体外酶活抑制试验显示水提物对α-葡萄糖苷酶的抑制率远高于阳性药阿卡波糖。结论:桦褐孔菌水提物可作为一种有效干预高血糖的功能因子,多糖组分是其发挥降血糖作用的物质基础,其降血糖的可能机制是对α-葡萄糖苷酶的良好抑制效果。     

辐照处理对桦褐孔菌多糖抗疲劳作用的影响

目的:研究经过辐照处理的桦褐孔菌多糖对小鼠的抗疲劳作用.方法:用60Co-γ射线进行辐照,得到5、10、20、30 kGy辐照剂量和未辐照的桦褐孔菌菌粉制得多糖.分为对照组、辐照高中低剂量组和未辐照高剂量组,对雄性昆明种小鼠进行四周连续灌胃,测定小鼠爬杆、力竭游泳时间,肝糖原(LG)、肌糖原(MG)、全血乳酸(BLA)...     

辐照处理对桦褐孔菌多糖降血糖作用的影响

为探究⁶⁰Co-γ射线辐照对桦褐孔菌多糖降血糖作用的影响,分别提取5,10,20,30 kGy辐照剂量下的多糖测定含量。按分组剂量对由链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠模型进行灌胃试验,期间每天测定小鼠体重、摄食量及饮水量,每7 d检测血糖,30 d后进行葡萄糖耐量试验(OGTT),取血解剖测定糖化血红蛋白(GHb)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平及脏器系数。结果表明:当辐照剂量为20 kGy时,多糖含量最高;相同给药剂量下经辐照后的桦褐孔菌多糖较未辐照的多糖缓解糖尿病小鼠肝肾肿大症状的效果更佳(P＜0.05),且不会对小鼠的心脾功能造成负担;同时在降血糖方面起效更快(P＜0.05)。     

桦褐孔菌多糖的抗肿瘤活性研究

研究桦褐孔菌多糖对肿瘤细胞增殖的抑制和对荷瘤裸鼠的体内抑瘤作用。采用MTT法检测桦褐孔菌多糖对Jurkat和Daudi细胞增殖的影响,建立Jurkat荷瘤裸鼠模型,研究给药后对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。表明桦褐孔菌多糖在体外具有直接杀死Jurkat和Daudi肿瘤细胞的作用,最高抑制率分别为62.29%和66.42%,具有良好的剂量-效应关系,同时具有显著的体内抗肿瘤活性,大小剂量对Jurkat荷瘤的抑制率分别为43.52%和57.48%,并且能显著提高裸鼠的脾脏指数,表明桦褐孔菌多糖具有显著的抗肿瘤活性和增强免疫功能。     

桦褐孔菌多糖对小鼠免役调节作用的影响

探讨桦褐孔菌粗多糖对正常小鼠和低免疫力小鼠免疫功能的影响.依据各实验具体分组进行试验观察该实验材料对小鼠免疫器官(胸腺、脾脏、肝脏)、炭粒廓清指率和和血清溶血素含量的影响.桦褐孔菌多糖可显著提高小鼠免疫器官指数、吞噬指数和血清溶血素含量.结论:桦褐孔菌多糖有提高免疫功能的作用.     

桦褐孔菌多糖对高脂饮食诱导的高脂血症大鼠血脂和肝脏的保护作用及机制

目的:以血清脂质浓度、抗氧化损伤、肝脏损伤以及脂肪酸合成酶的水平为观测指标,探究桦褐孔菌多糖(Inonotus obliquus polysaccharide,IOP)对高脂血症大鼠肝脏疾病的干预作用。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、高脂模型组和桦褐孔菌多糖低、中、高剂量组。采用试剂盒测定血脂指标:总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)水平;抗氧化指标:超氧化物歧化酶(superoxide diamutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxide,GSH-Px)活力;肝损伤指标:谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(asparate aminotransferase,AST);脂肪酸合成酶(fatty acidsynthetase,FAS)、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(humanhydroxymethylglutarylCoAreductase,HMGCR)活力。结果:相较于高脂模型组,高剂量(200 mg/kg mb)的桦褐孔菌多糖对于降低大鼠血脂水平,保护肝脏受损有明显的作用效果,其中TC、TG、LDL水平明显下降,HDL水平明显上升,MDA浓度降低,SOD、GSH-Px活力升高,FAS和HMGCR活力明显降低。结论:桦褐孔菌多糖能够对高脂饮食引起的高脂血症大鼠脂质紊乱、肝脏损伤起到保护作用,可能与其抗氧化作用有关。     

两种基质桦褐孔菌菌丝多糖免疫功能研究

培养桦褐孔菌菌丝体和药质菌丝体,采用超声波方式提取两种粗多糖,再将粗多糖分别作用于小白鼠,研究小白鼠的碳廓清实验和对小白鼠免疫器官质量的影响。结果表明:桦褐孔菌菌丝体粗多糖和桦褐孔菌药质菌丝体粗多糖都可以提高小白鼠的非特异性免疫功能;多糖种类和灌胃剂量对小白鼠非特异性免疫的影响不同,药质粗多糖比粗多糖对小白鼠的非特异性免疫功能的影响大,效果好。     

桦褐孔菌纯化多糖体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法得到桦褐孔菌发酵粗多糖,将粗多糖过DEAE-52纤维素柱分离纯化得到两种多糖(EIOP1、EIOP2),本文以α-葡萄糖苷酶抑制活性、正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞的单位细胞葡萄糖消耗量为主要指标,探究桦褐孔菌两种纯化多糖不同浓度(10、20、40、80、160和320 μg/mL)的降血糖活性,其中α-葡萄糖苷酶抑制活性以阿卡波糖作为阳性对照,葡萄糖消耗实验以二甲双胍作为阳性对照。结果表明,EIOP1、EIOP2的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照组阿卡波糖与粗多糖,IC₅₀值分别为39.18、29.87 μg/mL。EIOP1在浓度为80 μg/mL时,对HepG2细胞的葡萄糖消耗量极显著高于对照组,促进效果最好,比对照组提高了30.62%(P<0.01);EIOP2在浓度在40 μg/mL时,葡萄糖消耗量极显著高于对照组,比对照提高了75.99%(P<0.01);对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗实验发现EIOP1在浓度为40 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了30.00%,EIOP2在浓度为80 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了90.49%,高于Met组(P<0.01)。因此,桦褐孔菌纯化多糖对正常HepG2细胞和胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗均具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于粗多糖。     

乌贼墨汁黑色素对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用

目的：探究不同剂量的乌贼墨汁黑色素对链脲佐菌素（streptozocin,STZ）诱导的糖尿病肾病模型小鼠肾 脏的保护作用及其机制。方法：采用腹腔注射STZ方法建立糖尿病肾病小鼠模型,将实验小鼠分为正常组、模型 组、阳性治疗组（盐酸二甲双胍120 mg/kg,以体质量计,下同）、黑色素低（120 mg/kg）、中（240 mg/kg）、高 （480 mg/kg）剂量组,连续灌胃4 周,测定肾脏指数、肾功能、肾脏抗氧化体系相关酶活力;组织切片观察肾脏形 态变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（real time polymerase chain reaction,RT-PCR）测定诱发肾脏纤维化细胞因 子的mRNA表达量。结果：与模型组相比,乌贼墨汁黑色素中、高剂量组能极显著增强肾功能（P＜0.01）,提高 抗氧化酶活性（P＜0.05或P＜0.01）,减少丙二醛含量（P＜0.05或P＜0.01）,降低肾纤维化转化生长因子及其受 体mRNA的表达（P＜0.01）,上调抗炎性因子过氧化酶体增殖物活化受体mRNA表达量（P＜0.01）;高剂量组肾 小管基底及系膜区细胞外基质积聚减轻,肾小管间质纤维化程度下降;低剂量组无显著差异。结论：中、高剂量的 乌贼墨汁黑色素能减轻糖尿病肾病的肾发炎,增强肾功能,其作用机制可能与提高肾脏抗氧化能力,抑制肾纤维化 细胞因子的过度表达相关。     

人工虫草多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用

目的：研究人工虫草不同部位多糖及固体培养残基多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。方法：取健康的雄性小鼠60只,按体质量随机分成6组：正常对照组、急性CCl4肝损伤模型组、虫草子实体多糖组、菌丝体多糖组、固体培养残基多糖组和阳性药物组,每组10只。用紫外分光光度法测定比较血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,测定肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总蛋白(TP)含量,并对肝细胞的组织形态学进行观察。结果：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组,能显著抑制CCl4引起的小鼠血清ALT、AST活性及肝脏MDA含量的升高,以及肝脏SOD含量的降低,并能显著减轻CCl4引起的肝小叶内的灶性坏死。结论：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组对小鼠化学性肝损伤具有保护作用,人工虫草子实体多糖效果最优,其次为菌丝体多糖,再次为固体培养残基多糖。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其抗氧化活性测定

以桦褐孔菌为原料,测定其化学组分,并采用水提醇沉法提取桦褐孔菌粗多糖（IOP）。将获取的桦褐孔菌粗多糖进行脱蛋白、脱色素的初步纯化,然后利用DEAE-52纤维素层析柱及Sephadex-100凝胶柱对多糖提取液进行分离纯化,通过抗氧化活性筛选出活性较高的多糖组分,并通过高效液相色谱分析多糖组分的纯度。实验结果表明,桦褐孔菌子实体的化学成分组成丰富,其中多糖13.10%±0.31%、还原糖4.21%±0.40%、蛋白质2.70%±0.71%、灰分9.60%±0.31%。通过对桦褐孔菌粗多糖脱蛋白、脱色素的试验方法进行筛选,得到聚酰胺层析法为最佳的脱除方法。蛋白质的脱除率为93.1%、脱色率为75.8%,多糖的保留率为90.3%。IOP经过DEAE-52纤维素柱层析后得到四个单糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3、IOP-4。对四个多糖组分进行抗氧化实验发现,IOP-2对DPPH自由基的清除率最高,清除率为81.9%。IOP-2经过Sephadex-100层析柱后获得两个多糖组分:IOP-2a、IOP-2b。对比其抗氧化活性,筛选出活性较高的多糖组分为IOP-2a。采用高效液相色谱法鉴定多糖组分IOP-2a,只检查出一个对称峰,说明IOP-2a为均一性多糖。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其组成分析

为更好地开发利用桦褐孔菌这一丰富的真菌资源,采用水提法得到桦褐孔菌粗多糖(CIP),经DEAE-SepharoseCL-6B离子交换层析、SepharoseCL-6B和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到一个桦褐孔菌多糖组分(IP2a)。采用高效液相色谱法、比旋度法及琼脂糖电泳法鉴定其纯度,气相色谱法、高效液相色谱法及红外光谱研究其组成、相对分子质量和结构。结果表明IP2a为均一组分;IP2a由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为2.3∶4.5∶1∶2.5,其相对分子质量为86053u,含有α-型糖苷键。IP2a是一种不含核酸和蛋白质的杂多糖,是桦褐孔菌水溶性多糖的重要组成。     

低分子量蛹虫草多糖降血糖活性的研究

采用高血糖小鼠模型验证低分子量蛹虫草多糖在体内的降血糖活性。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建小鼠糖尿病模型,小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、低分子量蛹虫草多糖高、中、低剂量组,研究低分子量蛹虫草多糖对小鼠空腹血糖值、糖耐量、脏器指数、体重、血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)等指标的影响。连续灌胃给药4周,与模型组相比,剂量组小鼠的体重呈升高趋势,具有显著性差异(p0.01),高剂量组(200 mg/kg)降糖效果最好,给药4周后空腹血糖降至13.7±2.4 mmol/L,结果表明,低分子量蛹虫草多糖显示出较好的降血糖效果,能明显降低糖尿病小鼠血糖值,且在一定范围内能改善小鼠糖耐量异常,同时能有效减轻高血糖对肾脏和肝脏的损伤和缓解由糖代谢紊乱所引发的体重下降问题。