鱿鱼墨黑色素酶解法提取工艺优化及其紫外、红外光谱特征分析

以鱿鱼墨水解度为指标,分别测定木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶对鱿鱼墨水解效果,选用水解能力最强的胃蛋白酶为试验用酶,测定酶解反应pH值、反应时间、反应温度和加酶量对鱿鱼墨水解度的影响。在单因素试验基础上进行L9(34)正交试验优化得到胃蛋白酶水解鱿鱼墨的最佳酶解条件为酶解反应pH1.5、酶解温度37℃、酶解反应时间5h、加酶量1.5%。在最优酶解反应条件下,胃蛋白酶水解鱿鱼墨的水解度大于13.50%。紫外-可见光谱分析显示酶解法制备的鱿鱼墨黑色素在220nm处有特征吸收波长,红外光谱中的3384.54cm-1和1617.35cm-1处出现吲哚环结构归属的强吸收峰。     

乌贼墨黑色素的制备及体内外铅吸附效果研究

为研究乌贼墨黑色素体内外吸附铅的效果,采用水洗、酸洗和碱性蛋白酶酶解制备乌贼墨黑色素,以体外铅吸附量为指标确定黑色素制备方法,并通过扫描电镜及傅里叶变换红外光谱进行表征;建立铅中毒小鼠模型(饮用醋酸锌溶液),通过测定小鼠体重、肝脏系数和肝脏及血液的铅含量,分析黑色素在体内的吸附效果,利用HE染色法观察肝脏的病变情况。结果表明:通过碱性蛋白酶酶解法制得的黑色素体外吸附铅的效果优于另外两种方法,吸附量达(256.06±14.12)mg/g。扫描电镜和红外光谱实验证实吸附反应发生在黑色素颗粒表层,主要功能基团有-OH,-NH,-COOH。中、高剂量组对小鼠肝脏和血液中铅的吸附效果显著(p<0.01),分别下降17.18%±0.76%和31.09%±2.48%,20.85%±0.96%和34.45%±3.31%。HE观察显示黑色素对促进肝脏的修复有一定作用。由此可知,利用碱性蛋白酶酶解法制备乌贼墨黑色素有良好的吸附性能,具有作为一种安全吸附材料的应用前景。     

乌骨鸡黑色素的分步酶解法制备及其性能研究

为有效提取乌骨鸡黑色素,采用复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解提取得到乌骨鸡黑色素。探讨复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件,对不同的酶提方法获得的黑色素的得率、蛋白质含量、紫外图谱、抗油脂氧化性质、对VC的保护作用进行了比较。结果表明:复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件为酶解温度50℃、酶解时间3h、pH6.5、加酶量3.5%;复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解法获得的乌骨鸡黑色素得率高,蛋白质含量低,对VC的保护作用强。     

鮰鱼皮明胶的水解工艺

采用碱性蛋白酶对鮰鱼皮明胶进行水解,先确定水解度的测定方法,并通过单因素试验和正交试验对碱性蛋白酶水解鮰鱼明胶的工艺条件进行优化。结果显示：利用改进的紫外分光光度法测定鮰鱼皮明胶水解液的水解度,此方法操作简单、结果较准确,可快速测定明胶的水解度。碱性蛋白酶水解明胶的最佳工艺条件为加酶量4000U/mL、酶解温度50℃、pH9.5、酶解时间3h,此时明胶的水解度达到35.12%。     

乌贼墨黑色素的超微结构及抗氧化活性研究

应用电镜技术和体外培养试验等研究乌贼墨黑色素超微结构及其抗氧化等特性。结果表明,乌贼墨黑色素是由黑色素单体堆积而成,其单体颗粒呈圆形,表面清晰光滑,平均直径约118nm。乌贼墨黑色素对大肠杆菌有较好的光保护效果。随着黑色素浓度的增加,其光保护作用增强。黑色素可有效抑制猪油的氧化反应。在乌贼墨黑色素同一添加量水平下,POV值均随着时间的延长而增大;在一定时间条件下,乌贼墨添加量越大,POV值越小,表明乌贼墨黑色素具有较强的抗氧化能力。黑色素对大鼠自发性脂质过氧化有明显的抑制作用,其抑制率达到53.3%。同时,黑色素对Fe2+-Cys诱导大鼠肝脂质过氧化也有较明显的抑制作用,其抑制率达到22.5%。     

响应面法优化金乌贼眼透明质酸的提取工艺

为了充分利用乌贼下脚料乌贼眼,对酶法提取金乌贼眼中透明质酸工艺进行研究。结果表明,在胃蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶的筛选实验中,中性蛋白酶的提取率最高,为6.64%,是酶解最适酶。采用单因素试验和响应面法研究中性蛋白酶酶解金乌贼眼中透明质酸的工艺条件。结果表明,影响提取率的工艺因素顺序为加酶量＞酶解时间＞酶解温度;其酶解最佳工艺条件为加酶量8200U/g、酶解时间3h、酶解温度60℃,在此条件下透明质酸提取率10.70%,与模型预测值基本相符。响应面优化酶法提取金乌贼眼透明质酸条件准确可行。     

仿刺参卵酶解工艺条件优化

以仿刺参卵为材料,优化出酶解工艺,获得高水解度、风味独特的水解产物。首先,通过实验从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶中筛选出合适的水解用酶。然后通过单因素试验与正交试验,分别考察酶解温度、加酶量及酶解时间对筛选出的各种蛋白酶水解度的影响,获得单酶的优化水解工艺条件。最后进行多酶体系综合酶解实验,综合考虑水解度、生产成本和水解液感官评定结果来确定最佳水解工艺条件。结果表明:最佳酶解条件为:以混合酶(木瓜蛋白酶与复合蛋白酶质量比1:1)在加酶量2.0%、酶解温度75℃条件下酶解4h,煮沸灭酶活后再添加1.5%风味蛋白酶,在酶解温度45℃条件下继续酶解1h,在此工艺条件下水解度达到了77.11%,并且水解液鲜香浓郁,状态均匀澄清,可用于开发风味独特的功能食品。     

文蛤肉复合酶分步酶解工艺的研究

本实验探讨了中性蛋白酶和胰蛋白酶的复合酶与风味蛋白酶分步酶解文蛤肉的技术。 通过q检验法确定中性蛋白酶和胰蛋白酶最佳的复合比例,再通过正交试验探讨复合酶与风味蛋白酶二段酶解的最佳工艺参数,并以水解度、水解得率及风味评分值为指标对分步酶解工艺的最佳条件进行比较验证。结果表明,胰蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3:1,风味蛋白酶二段酶解的最优工艺参数为水解温度55℃、水解时间5.0h、加酶量1000 U/g(原料)、pH值(5.00±0.05),所得文蛤肉水解液中水解度、水解得率及风味评分值分别为55.97%、87.14%及230.98。     

复合酶分步酶解法提取牛骨胶原蛋白工艺的研究

以牛骨胶原蛋白初步酶解产物为研究对象,以水解度为指标,采用甲醛滴定法监测深度酶解的进程,对比分析不同的酶解条件对水解度的影响,确定了中性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的酶解条件。通过正交试验结果表明:采用中性蛋白酶和风味蛋白酶加酶量分步水解牛骨蛋白的最佳条件为物料比1∶750,起始pH值是6.5,先用中性蛋白酶55℃酶解3h后,再用风味蛋白酶于55℃继续酶解2h。此时水解度达到63.6%。     

罗非鱼下脚料双酶法提取呈味物质的研究

研究了胰蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶对罗非鱼下脚料的水解条件;并且研究了复合蛋白酶-风味酶双酶法的水解条件.研究结果表明:复合蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量为3%,pH值为7.5,时间为2 h,温度为50℃;在最佳水解条件下,复合蛋白酶水解罗非鱼下脚料所得的水解液的水解度最高.风味酶的二次酶解的最佳水解条件是:加酶量为1%,pH值为7,时间为1 h,温度为50℃,此条件下的双酶解的水解度可以达到25.9%.     

贻贝蒸煮液酶解工艺的优化

为研究酶法水解贻贝蒸煮液的最佳条件,以水解度为指标,分别研究风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶4种酶水解贻贝蒸煮液的效果,结果表明风味蛋白酶水解贻贝蒸煮液的效果最好。以水解度和风味为指标,采用响应面分析法和气相色谱-质谱联用技术优化风味蛋白酶水解贻贝蒸煮液的条件,结果最佳酶解条件为加酶量0.63%,温度51 ℃,时间3.26 h,pH 6.87。在此条件下水解度为13.98%。     

响应面法优化腊肉酶解工艺条件

为探究腊肉最佳酶解工艺,为其进一步深加工奠定理论基础。以川味腊肉为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶及动物蛋白酶对其进行酶解,以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为测定指标,确定中性蛋白酶与风味酶的复配酶为最佳用酶;选取中性蛋白酶与风味酶的配比、料液比、加酶量、时间、p H及温度进行单因素实验,再在此基础上,以水解度为响应值,采用响应面法优化工艺条件,确定最佳酶解条件为中性蛋白酶与风味酶配比为1∶2、自然p H(5.9~6.0),加酶量0.35%、料液比1∶2(g/m L)、酶解温度47℃,酶解时间5 h。在此条件下,水解度实测值为8.77%,理论值为8.84%,实测值与理论值相差较小。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。     

鱿鱼(Uroteuthis chinensis)黑色素酶法制备工艺优化及理化特征分析

本研究旨在利用响应面法优化鱿鱼黑色素酶法制备工艺条件,并分析其理化特征。选用鱿鱼墨囊为原料,通过单因素实验,研究pH、酶解温度、加酶量、酶解时间对鱿鱼黑色素得率的影响,在此数据基础上,采用Box-Behnken法设计四因素三水平的响应面分析,并通过紫外光谱分析、傅里叶红外光谱分析、扫描电镜分析、X射线衍射分析等多种检测技术对鱿鱼黑色素进行理化特征分析。结果表明,碱性蛋白酶为鱿鱼黑色素提取最适酶,在pH10.40,酶解温度65℃,加酶量2.60%(酶活2×105 U/g),酶解时间2.45 h的条件下进行酶解反应,鱿鱼黑色素得率为83.89%±0.21%。紫外吸收光谱分析显示碱性蛋白酶酶法所制鱿鱼黑色素在201 nm处有特征吸收峰;傅里叶红外吸收光谱中3388.46和1601.05,1373.66 cm-1处出现了归属于吲哚环结构的较强吸收带;扫描电镜结果表明,鱿鱼黑色素单体呈现微球状,且颗粒大小分布集中,平均直径约为120 nm;X射线衍射光谱结果可推测黑色素吲哚结构的存在。本研究成果可为鱿鱼黑色素的的高值化开发及规模化生产提供理论依据和技术支持。     

酶解蚕蛹蛋白制备降血压肽的初步研究

目的:以蚕蛹蛋白为原料,采用六种不同蛋白酶进行酶解产生降血压肽。对水解液的 ACE 抑制活性进行研究,选出水解液 ACE 抑制率最高的酶。方法:采用 Cushman 紫外分光光度法测定水解液的 ACE 抑制活性。结果:Alcalase 碱性内切蛋白酶水解液具有最大的 ACE 抑制率,体外检测为87.75%。对应最佳条件为:底物浓度15%,加酶量1250U/g 蛋白质,酶解温度60℃,pH6.5。该条件下酶解物的水解度为22.84%,平均肽长为4.38。     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

双酶协同水解乌贼内脏的工艺条件研究

以乌贼内脏为原料,利用5种蛋白酶对其进行水解,从中选出水解效果较好的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,并确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解乌贼内脏的最佳工艺。结果表明:木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3∶1,总加酶量为6000U/g;水解温度为50℃;固液比为1∶3;水解时间为7h;pH值为6.5,所得乌贼内脏水解液的水解度可达24.83%。所得酶解产物经Aglient 1200高效液相色谱分析,共检出17种氨基酸,氨基酸总量达57.44%,其中必需氨基酸含量占总氨基酸含量的41.90%,氨基酸比例均衡。     

多种酶复合制备鸡皮胶原蛋白短肽

以鸡皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白肽。研究了酶的种类、加酶量、酶解时间、酶解温度以及pH值对水解度和多肽质量浓度的影响,采用正交实验对酶解条件进行了优化。结果表明,当采用木瓜蛋白酶+胰蛋白酶+风味蛋白酶复合水解,加酶量为0.9%、酶解时间3 h、酶解温度45℃及pH为7时,为酶解最佳条件。     

酶法水解梅鱼蛋白的实验研究

主要研究了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶对小梅鱼的水解作用。采用正交试验,详细比较了温度、酶浓度、水解时间、酶比例对鱼蛋白水解度的影响。结果表明:单酶最佳水解酶为碱性蛋白酶,其水解条件:温度60℃,加酶量0.3%(以蛋白含量计),时间5h,水解度达51.02%;碱性蛋白酶与复合蛋白酶双酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度为60℃,加酶量0.3%,时间5h,水解度达57.03%;碱性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶三酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度60℃,加酶量0.3%,反应5h后添加风味蛋白酶,其反应条件:加酶量0.3%,温度60℃,时间为6h,水解度达62.57%。     

微波辅助酶解提取硫酸软骨素下脚料中胶原蛋白肽的工艺研究

以生产硫酸软骨素的下脚料为原料,采用微波辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度、相对分子量分布为指标确定最佳水解条件。通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及风味蛋白酶进行筛选,确定风味蛋白酶水解产物的水解度最高;研究了加酶量、底物浓度、反应温度、pH对酶解反应的影响,确定酶解的最优工艺条件为:加酶量6%,底物浓度10%,反应温度50℃,pH7.0。此外,与单独的酶解相比,微波辅助酶解缩短了酶解时间近50%,分子量小于1 000的胶原蛋白肽比例占91.2%。