两组天麻提取物的制备及对灰树花发酵的影响

在灰树花深层发酵体系中,分别添加两组天麻的醇提液,分析其对灰树花菌体生长和胞外多糖(Extracellular Polysaccharide,EPS)合成的影响,利用HPLC测定两组天麻醇提液中天麻素的含量。结果显示,两组天麻醇提液的添加体积浓度在4%时均能显著促进灰树花菌体的生长和胞外多糖(EPS)的产量(p<0.05),然而试验组2的天麻醇提液对灰树花细胞生长和胞外多糖的促进作用优于试验组1。天麻素含量的测定显示,试验组2的天麻醇提液中的天麻素含量是试验组1的1.33倍。研究表明,不同加工条件的天麻,所制得的天麻醇提液对灰树花菌体生长和胞外多糖的影响效果差异显著,说明天麻制品的制作方法不同,将得到不同的使用效果。     

天麻影响灰树花深层发酵产胞外多糖的动力学模型及应用

灰树花多糖是灰树花中最具生物活性的成分之一,通过在灰树花发酵体系中添加一定量的天麻,可以提高灰树花胞外多糖（exopolysaccharides,EPS）的产量。基于Logistic和Luedeking-Piret方程,采用MATLAB软件分别得到了天麻醇提液浓度为7%（v/v）时,灰树花菌体生长、EPS合成、基质消耗的动力学模型和模型参数。结果表明模型与实验数据能较好地拟合,基本上反映了天麻醇提液浓度为7%（v/v）时,灰树花发酵产胞外多糖过程的动力学特征。     

对羟基苯甲醛等3 种天麻成分对灰树花胞外多糖生物合成的影响

在灰树花液体发酵体系中,分别添加不同量的天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛3 种天麻成分,分析这3 种成分对灰树花菌体生长和胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）合成的影响,采用苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量。结果表明：适宜质量浓度的这3 种天麻成分均能促进灰树花菌体生长和胞外多糖的生物合成,其中对羟基苯甲醛添加量为0.15 g/L时效果最佳,并且略低于体积分数7%天麻醇提取物。动态分析0.15 g/L对羟基苯甲醛和7%天麻醇提取物对灰树花EPS合成促进作用的结果表明：在整个发酵过程中,二者促进灰树花EPS生物合成的效果基本一样,并且从发酵第7天开始,二者的EPS产量均显著高于空白组（P＜0.05）。采用高效液相色谱法动态测定发酵期间对羟基苯甲醛含量变化,结果表明：在发酵的第5天,对羟基苯甲醛基本被完全吸收,而此时灰树花EPS开始大量积累。因此,灰树花可利用对羟基苯甲醛来促进EPS的生物合成。     

茯苓提取物参与灰树花液态深层发酵及对其活性物质产量的影响

中药茯苓提取物参与灰树花液态深层共发酵,进而探究不同溶剂提取的、不同添加比例的茯苓提取物对灰树花活性物质产量的影响。结果表明,添加5 g/L的茯苓醇提液和7 g/L的茯苓水提液时,均能够提高灰树花的生物量及多糖、总黄酮、蛋白的含量。相比于空白对照组,在最适醇提物和水提物添加量下的菌丝体生物量分别提高了24.28%和29.04%,具有显著促进作用(P<0.05)。5 g/L醇提物添加条件下的胞外多糖、胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白组与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了17.8%、30.29%、8.32%、10.13%、10.49%和10.24%。7 g/L水提液添加条件下胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了19.8%、3.16%、9.29%、10.24%和8.78%。表明添加一定量的茯苓提取物能够在一定程度上增加灰树花菌丝体的生长和活性代谢产物的含量,并且对多糖的产量影响尤为明显。     

天麻提取物的制备及其对灰树花发酵的影响

通过6种不同处理方式制取天麻提取物,用HPLC测定各种提取方法中提取物中的天麻素含量,并在灰树花发酵体系中添加天麻提取物,研究天麻提取物对灰树花细胞生长和多糖生物合成的影响。结果表明,6组天麻提取物中的天麻素含量不同,其中第6组天麻提取物添加浓度在5%(V/V)时能显著促进灰树花的菌体生长、胞外多糖(EPS)和胞内多糖(IPS)的生物合成(P<0.05),并对天麻提取物发酵前后的物质变化做了初步的HPLC图比较。     

天麻提取物及其3 种主要成分对灰树花产胞外漆酶和菌丝体的影响

以天麻提取物为外源添加物,加至灰树花液体深层发酵体系中,通过外源诱导实验,考察天麻提取物对灰树花液体发酵产菌丝体及胞外漆酶的影响,并进一步重点研究起显著影响作用的关键成分。研究表明,天麻提取物及单一成分天麻素（gastrodin,GA）、对羟基苯甲醛（p-hydroxylbenzaldehyde,HBA）、对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol,HA）均对灰树花菌丝体和胞外漆酶活力有显著的促进作用。结果显示,当添加3?g/L的天麻醇提物时,对灰树花菌丝体生物量和胞外漆酶活力有最大的促进作用,与对照组相比,分别提高了1.62?倍和7.41?倍（P＜0.05）。同时,利用高效液相色谱对3?g/L天麻醇提物中的GA、HBA、HA含量进行分析,以相应量添加到灰树花发酵体系中。结果表明,HA和HBA均能显著提高灰树花漆酶活力和菌丝体生物量,与添加3?g/L天麻醇提物实验组相比,添加HA使酶活力提高10.25%,生物量增加9.17%。本研究可为中药提取物及成分促进真菌生长和产漆酶提供理论依据。     

天麻、苦荞醇提物对灰树花胞外多糖合成酶类的影响及天麻苦荞醇提物复配发酵液的抗疲劳作用

该实验探究了天麻（Gastrodin elata Bl.）、苦荞（Tartary Buckwheat）醇提物的添加对灰树花（Grifola frondosa）胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）合成过程中磷酸葡萄糖变位酶（Phosphogluconate Mutase,PGM）、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose Pyrophosphorylase,UGPase）和磷酸葡萄糖异构酶（Phosphogluconate Isomerase,GPI）三种关键酶的影响。并以此为前提,采用动物实验进一步探究灰树花发酵液的抗疲劳作用。结果表明：天麻、苦荞醇提物的复配添加可显著增强PGM和UGPase的活力,降低GPI的活力,与空白组相比PGM和UGPase的活力分别增加了86.98%和69.12%,GPI的活力降低了65.78%。此外,其复配发酵液在抗疲劳作用方面表现最佳,显著高于空白组（p<0.05）和实验组（p<0.05）。主要在提高小鼠游泳力竭时间、肝糖原（Hepatic Glycogen,HG）和乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase,LDH）含量,降低乳酸（Lactic Acid,LA）和尿素氮（Blood Urea Nitrogen,BUN）含量几个方面体现。研究表明复配液的添加可显著改变灰树花EPS合成途径中关键酶类的活力,从而提升发酵液中EPS的含量,使其具有良好的抗疲劳作用。     

天麻提取物对灰树花深层发酵胞外蛋白合成的影响

在灰树花深层发酵系统中加入天麻提取物,以灰树花生物量和胞外蛋白合成量为指标,对天麻提取物添加量进行优选;利用HPLC对天麻提取物成分进行分析,研究天麻提取物灭菌前后主要成分(天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛及巴利森甙)含量的变化,并研究其促进灰树花生物量和胞外蛋白合成的关键成分在灰树花发酵体系中的含量变化。结果发现,7%(体积分数)天麻提取物可以促进灰树花菌丝体生长和胞外蛋白的合成,生物量和胞外蛋白合成量在发酵第11天时达到最大值;在天麻提取物灭菌后,巴利森甙含量明显减少,天麻素含量明显增加;天麻提取物加入灰树花发酵体系14d后,天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛含量均降低,但巴利森甙含量增加了161.11%。     

对羟基苯甲醇对灰树花产胞外多糖的影响及其发酵动力学

通过向灰树花发酵液中添加不同质量浓度梯度的对羟基苯甲醇,分析其对灰树花菌体生长和胞外多糖合成的影响,并且进一步研究了添加对羟基苯甲醇后发酵液中菌丝体生长、残糖（还原糖）含量、胞外多糖产量、pH值、对羟基苯甲醇和天麻素含量的变化情况,并做动力学分析。结果表明：当对羟基苯甲醇添加量为200 mg/L时效果最佳,相比于空白组（未添加对羟基苯甲醇）使菌丝体生物量提高了22.73%,胞外多糖产量提高了10.24%,均显著高于空白组（P＜0.05）。动力学研究结果表明：在整个发酵过程中,灰树花生长从第8天趋于稳定,葡萄糖作为碳源不断被消耗并且胞外多糖逐渐合成,到第10天二者趋于稳定。此外,对羟基苯甲醇含量减少,部分转化为天麻素。     

天麻醇提物对灰树花发酵菌丝体多糖及β-葡聚糖合成量的影响

在灰树花液体深层发酵体系中添加天麻醇提物,考察天麻醇提物对灰树花发酵菌丝体生物量、菌丝体多糖及β-葡聚糖含量的影响,并进一步研究起显著促进作用的关键特征成分;同时,采用高效液相色谱法对7 g/L天麻醇提物中的特征成分进行定量分析,研究了对灰树花菌丝体生物量、菌丝体多糖及β-葡聚糖起促进作用的关键特征成分及优化添加量。结果表明,适当浓度的天麻醇提物能够显著提高灰树花菌丝体生物量、菌丝体多糖及β-葡聚糖的含量,在其质量浓度为7g/L时,菌丝体干重、菌丝体多糖及β-葡聚糖含量均达到最大值,分别为1.708 g/L、5. 974%和2. 055 mg/g,与不添加天麻醇提物相比分别增加了0. 36、1. 29和1. 44倍(P<0. 05)。天麻醇提物中的特征成分分别为天麻素5. 837 5 mg/g,对羟基苯甲醇1.107 2 mg/g,对羟基苯甲醛0.660 1 mg/g,对灰树花菌丝体生物量、菌丝体多糖及β-葡聚糖起促进作用的关键特征成分均为对羟基苯甲醛,其.优化添加量分别为100、250、150 mg/L。     

不同产地灰树花多糖含量测定

目的测定不同产地灰树花多糖含量,为灰树花多糖的综合开发利用提供科学依据。方法采用蒽酮-硫酸法,正交试验确定最佳工艺,测定不同产地灰树花粗多糖、可溶性糖含量。结果 18批不同产地灰树花粗多糖含量8.17%~34.82%,可溶性糖含量27.46%~55.65%。结论不同产地灰树花多糖含量具有显著差异。     

天麻中香草醇对灰树花菌丝体生物量和胞外多糖合成的影响

目的 探讨高血压亚急症患者循环内皮祖细胞(EPC)功能的改变以及一氧化氮(NO)、肱动脉血流介导的内皮依赖性舒张功能(FMD)与EPC功能的关系。方法 招募高血压亚急症患者13例,血压正常者20例(对照组),取外周血提取原代EPC培养后以Transwell小室和CCK-8法评估EPC的迁移、黏附和增殖能力,通过检测FMD、血浆和EPC分泌的NO、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)水平评估血管内皮功能。结果 高血压亚急症组与对照组相比,EPC细胞功能(包括迁移、增殖和黏附能力)明显下降(P＜0.05);血浆及EPC分泌的NO水平有明显差异(P＜0.05);血浆及EPC分泌NO水平均与EPC迁移、黏附和增殖能力呈明显的线性关系(P＜0.05);FMD与EPC迁移、黏附和增殖能力具有明显相关性(P＜0.05)。两组血浆和EPC分泌的GM-CSF、VEGF、IL-6水平均无明显差异(P＞0.05)。结论 相对血压正常者,高血压亚急症人群的EPC功能(迁移、黏附和增殖)明显下降,且NO水平和FMD均与EPC功能正相关。     

灰树花富锗培养研究

对食药用真菌灰树花的耐锗和富锗特性进行了研究 .结果表明 ,灰树花的耐锗能力和富锗能力都很强 .在锗质量分数为 1 0 0～ 3 0 0 0mg/kg的固体培养基上 ,菌丝均能生长 ,当锗质量分数超过 2 50 0mg/kg时 ,菌丝生长受到一定影响 .采用液体深层培养 ,在锗质量分数为 1 0 0～ 1 50 0mg/kg范围内 ,菌丝体富集锗的范围为 2 96～ 3 74 6mg/kg(以干菌丝计 ) ,当锗质量分数为 50 0mg/kg时 ,菌丝体对锗的吸收率最高 ,达 3 .58% .适当的锗还能促进菌丝体对培养液中还原糖的利用并提高菌丝干收率及胞外多糖分泌量 ,但对发酵液 pH值、发酵周期及菌丝体胞内多糖产量没有明显影响 .     

均匀设计法优化灰树花多糖超声波辅助提取工艺及其抗氧化活性分析

采用均匀设计法优化灰树花多糖超声波辅助提取工艺参数,为其多糖资源开发利用提供参考。以灰树花多糖提取率和β-葡聚糖提取率为评价指标,以超声功率、提取时间、提取温度和水料比为因素,通过均匀设计法优化提取工艺,同时对灰树花多糖抗氧化活性进行初步研究。结果表明:灰树花多糖超声波辅助提取最佳条件为,超声功率500 W、提取时间64 min、提取温度43℃、水料比31∶1(mL/g),浸提2次,在此条件下,灰树花多糖的提取率为23.055%;β-葡聚糖的最佳提取条件为,超声功率450 W、提取时间74 min、提取温度68℃、水料比28∶1(mL/g),浸提2次,在此条件下,β-葡聚糖的提取率为3.030 mg/g;抗氧化活性研究结果显示,灰树花多糖的还原力OD₇₀₀nm值为0.561±0.005,其DPPH自由基和羟自由基的清除率均随质量浓度的增大而增大,DPPH自由基和羟自由基的清除率为分别为58.27%和89.58%,羟自由基的清除率高于V_C。     

灰树花胞外多糖特性研究进展

灰树花是一种珍贵的药、食两用蕈菌,灰树花多糖是其主要的活性成分,具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗HIV等广泛的生物活性.本文对灰树花胞外多糖的结构、分离纯化和生物活性进行了综述,分析了国内外当前的研究现状,对灰树花胞外多糖的研究做了展望.旨在为灰树花胞外多糖的深入研究和开发利用提供参考.