食品内外部因素对金属抗菌肽SIF4抑菌活性影响及生物相容性分析

为阐明食品内外部因素对金属抗菌肽SIF₄抑菌活性的影响规律,以金黄色葡萄球菌为指标菌,考察了温度、pH、金属阳离子、蛋白酶、反复冻融和化学试剂等因素对抑菌活性的影响,并研究了SIF₄的生物相容性。结果表明,金属抗菌肽SIF₄具有较好的热稳定性和pH稳定性,121℃仍可保持（92.68±0.40）%抑菌活性,pH 2～8可保持（99.45±0.40）%以上抑菌活性;Ca²⁺、Mg²⁺、K⁺和Na⁺等金属阳离子对抑菌活性无显著影响（P>0.05）;胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K处理后仍可保持较高抑菌活性,具有较好的酶耐受性;6次冻融处理后抑菌活性仍高达（99.00±0.81）%,表明具有较好的冻融稳定性;EDTA和Tween-80处理对抑菌活性无显著影响（P>0.05）;低浓度十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate, SDS）和尿素处理对抑菌活性无显著影响（P>0.05）,高浓度处理后抑菌活性稍有下降...     

酪蛋白酶解物中抗菌肽的抑菌性及稳定性研究

对酪蛋白胰蛋白酶酶解物中抗菌肽的抗菌性及稳定性进行研究。实验通过以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌为指示菌,验证了抗菌肽的抑菌性,并以大肠杆菌为指示菌,研究了酶解物中抗菌肽在不同温度、不同pH值、不同储藏时间条件下的抑菌稳定性。结果表明:此抗菌肽能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的生长,具有广谱抗菌活性;碱性及中性条件下,此抗菌肽对大肠杆菌抑菌活性稳定,酸性条件下,抑菌活性随pH值下降而增强;此抗菌肽冻干样品在室温下可长期储藏。     

薤白乙醇提取物的抑菌特性

通过抑菌实验和稳定性实验,对从薤白中提取的薤白抑菌物质的抑菌特性进行研究。结果表明：薤白抑菌物质对供试菌的抑菌效果大小顺序为：大肠杆菌＞金黄色葡萄球菌＞青霉＞酵母菌＞黑曲霉。稳定性实验表明,温度和pH值对薤白醇提物抑菌效力有一定影响,表现为50～60℃时抑菌活性最强,超过100℃时抑菌活性开始下降;薤白抑菌物质在中性、中性偏酸性、中性偏碱性条件下抑菌活性较强,在酸性(碱性)条件下随pH值的降低(升高)抑菌活性下降;紫外光照射对抑菌物质的抑菌活性有微小的影响,可以适当避光操作。K+对薤白抑菌物质的抑菌效果影响较小,Mg2+、Ca2+、Zn2+二价阳离子,Fe3+三价金属离子对其抑菌效果有一定影响,其中三价金属阳离子(Fe3+)对其影响最大。     

Spinigerin α抗菌肽的理化特性研究

本研究在对Spinigerin α抗菌肽成功的进行了克隆及表达的基础上,对Spinigerin α抗菌肽的理化性质,包括抑菌特性、温度、pH稳定性等外界条件对其抗菌活性的影响进行了进一步研究。研究结果表明:Spinigerin α抗菌肽的自身浓度、温度、及pH对其抑菌活性均有重要影响,对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为1.52%、3.13%、12.5%。当抗菌肽加热至60-100℃时,抗菌肽抑菌效果依然明显,当加热至121℃时,其抑菌效果开始有下降趋势。当处于pH值6.0-8.0的近中性环境中,Spinigerin α抗菌肽的抗菌活性最强。     

花椒籽蛋白抗菌肽的抑菌作用及其稳定性研究

本研究采用菌落计数法对花椒籽蛋白抗菌肽的抑菌效果及稳定性进行了研究。结果表明:抗菌肽对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑制作用;抗菌肽的抑菌活性随浓度的升高而增强;经不同温度、加热时间处理后,抗菌肽的抑菌活性与对照相比无显著差异(p0.05);抗菌肽在经p H 2.0~12.0处理后仍有抑菌活性,p H 2.0时的抑菌率最低(58.13%),p H 12.0时的抑菌率最高(79.17%);随着金属离子浓度的增加,经K+、Ca2+和Fe3+处理后的抗菌肽的抑菌活性分别呈降低、增加、变化平缓的趋势,经0.1 mol/L K+处理后的抗菌肽的抑菌活性明显增强;经有机溶剂处理后,抗菌肽的抑菌活性有所降低;经吐温20、吐温80处理后,抗菌肽的抑菌活性极显著增强(p0.01),SDS对抑菌活性的增加不显著。因此,抗菌肽具有很好的热、酸碱、金属离子和有机溶剂稳定性,而表面活性剂(吐温20、吐温80)能使抗菌肽的抑菌活性显著增强。     

蚯蚓抗菌肽的提取与抗菌活性研究

用30%～80%不同浓度硫酸铵沉淀蚯蚓蛋白,用考马斯亮蓝测定蛋白含量,采用管磲法和微量稀释方法分别测定蚯蚓抗菌肽和苯甲酸钠在pH值分别是4.0、7.0、9.0下的抑菌活性及最小抑菌浓度(MIC).结果显示40%、50%、60%、70%硫酸铵沉淀出的蛋白都表现出抗菌活性,并对G (金黄色葡萄球菌)和G-(大肠杆菌)均有抑菌性.同时证实蚯蚓抗菌肽抗菌性受pH影响不大.     

牦牛血胰蛋白酶水解液中抗菌肽的筛选研究

以牦牛血的胰蛋白酶水解液为原料,用Sephadex G-15凝胶柱,在以10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)为洗脱液,流速为0.4 mL/min的洗脱条件下,利用抗菌肽与细菌细胞膜的吸附结合特性,分离出两个含抗菌肽组分的洗脱峰。研究显示抑菌活性大的洗脱峰再经过RP-HPLC反复纯化,收集组分并检测抑菌活性,得到两个色谱纯的抗菌肽YakB-1和YakB-2。抑菌实验表明,抗菌肽YakB-1/2对细菌和真菌都具有广谱抗菌活性;抗菌肽YakB-2无论对G-菌还是G+菌的抗菌活性都比YakB-1强,但YakB-1对真菌的抑菌活性更强。研究结果可为牦牛血资源开发与利用提供参考依据。     

嗜酸乳杆菌产类细菌素Lactobacillin NX2-6的初步研究

从内蒙古传统乳制品酸马奶中筛选出1株产生具有广谱抑菌活性物质的嗜酸乳杆菌NX2-6。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,菌株NX2-6所产生的类细菌素对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等革兰氏阴性菌及米曲霉等真菌具有较强的抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性明显下降,但仍具有较强的抑菌活性,对α-胰凝乳蛋白酶抗菌活性没有显著变化,因此表明该抗菌活性物质为蛋白类物质或非单一物质。在酸性条件下它具有很好的热稳定性,pH2.0时活性最强,中性或碱性条件下不具有抗菌活性,抑菌活性pH值范围在2.0-5.0。此抗菌物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为Lactobacillin NX2-6。菌株NX2-6产物在生防、食品具有潜在的应用价值。     

青刺果抗菌肽组分的分离及其稳定性分析

旨在高值化利用青刺果榨油后副产物青刺果粕中的蛋白质，以青刺果粕为原料，提取青刺果蛋白并制备蛋白酶解物，采用活菌吸附法联合反相高效液相色谱（RP-HPLC）从蛋白酶解物中筛选出抗菌肽组分，评价其抑菌活性，并对抑菌活性最好的组分进行稳定性分析。结果表明：筛选出的3个抗菌肽组分（F1、F2和F3）中，F2组分抑菌活性最好，当其质量浓度为10 mg/mL时对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性分别达到45.5%和39.1%；抗菌肽组分F2抑菌活性随温度升高和盐溶液浓度增加均降低，最适pH为6.0，在酸性环境中极不稳定，对酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的耐受性均较差，对中性蛋白酶耐受性较好。综上，青刺果粕中的蛋白酶解物具有抑菌活性，具有开发青刺果抗菌肽的潜力。     

合浦珍珠提取物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性及稳定性研究

目的:研究合浦珍珠提取物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性及稳定性。方法:采用牛津杯法及96孔法测定合浦珍珠提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及最小抑菌浓度,并探讨温度、反复冻融、酸碱、紫外线、金属离子、胰蛋白酶和胃蛋白酶对合浦珍珠提取物抑菌活性的影响。结果:合浦珍珠提取物对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌活性,最小抑菌浓度为0.94 mg·mL-1,且抑菌活性呈一定的剂量依赖效应。以8×MIC合浦珍珠提取物进行抑菌稳定性实验,以金黄色葡萄球菌的OD₆₀₀值为指标进行探讨,结果显示,合浦珍珠提取物在pH3.0~9.0抑菌活性保持稳定,但在pH11.0相比pH7.0抑菌活性,保留约70%;在-80~80 ℃抑菌活性保持稳定,但在100 ℃相比4 ℃处理30 min抑菌活性保留约68%;在-20 ℃反复冻融及20 W紫外灯照射条件下,提取物抑菌活性保持良好的稳定性;在25~200 mmol·L-1的NaCl、KCl、CaCl₂条件下,提取物抑菌活性稳定,但在25~200 mmol·L-1MgCl₂条件下,抑菌活性逐渐降低,在200 mmol·L-1 MgCl₂时,抑菌活性相比未添加金属离子组保留约40%;提取物对胰蛋白酶处理保持良好的抑菌稳定性,但在胃蛋白酶处理下,抑菌活性消失,说明对胃蛋白酶敏感。结论:合浦珍珠提取物对金黄色葡萄球菌具有稳定的体外抑制活性,为其今后在食品工业上的应用和开发提供一定的理论基础。