链格孢侵染对伽师瓜果皮活性氧代谢的影响

本文以采后伽师瓜果实为试验材料,无损接种链格孢菌(Alternaria alternata),比较伽师瓜无网纹、小网纹、大网纹果皮组织抗病性差异,研究活性氧代谢及关键酶活性变化规律。结果表明:链格孢菌侵染30 d时,伽师瓜果皮无网纹病害发生率77.77%、小网纹84.17%、大网纹88.02%。各实验组超氧阴离子(O_2·~-)产生速率和还原型谷胱甘肽(GSH)含量呈先升高后降低的变化趋势,过氧化氢(H_2O_2)含量呈升高-降低-升高的变化趋势,丙二醛(MDA)含量外果皮呈升高-降低的变化趋势,内果皮一直升高;且侵染期间外果皮O_2·~-产生速率、GSH、H_2O_2和MDA含量高于内果皮。各实验组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)均呈先升高后降低的变化趋势;SOD活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为49.19 U、39.29 U、31.81 U,内果皮峰值为32.36 U、24.28 U、19.30 U;CAT活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为485.95 U、393.68 U、220.40 U,内果皮峰值为202.67 U、228.30 U、137.93 U;POD活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为28.62 U、24.84 U、23.13 U,内果皮峰值为14.46U、9.73 U、8.58 U;GR活性无网纹、小网纹、大网纹外果皮峰值为378.32 U、170.24 U、196.15 U,内果皮峰值为70.58 U、45.61 U、66.67 U;抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性呈上升趋势,外果皮活性高于内果皮,无网纹活性高于小网纹和大网纹。由此表明,伽师瓜果皮抗病性与活性氧代谢关系密切,外果皮抗病性强于内果皮,无网纹组抗病性强于小网纹组和大网纹组。     

链格孢侵染采后甜瓜病程相关蛋白基因表达及酶活性变化规律

以伽师瓜和86-1甜瓜为试材,损伤接种链格孢菌,比较两种甜瓜果皮与果肉抗病性差异。甜瓜果实接种链格孢,（7±1）℃、相对湿度85%～90%冷库贮藏,测定病斑直径,观察病斑组织显微结构,实时聚合酶链式反应比较CmGLU、CmCHT1、CmCHT2相对表达量,测定几丁质酶（chitinase,CHT）和β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）活性。结果表明：链格孢侵染两种甜瓜,伽师瓜病斑直径小于86-1甜瓜,果皮小于果肉,第30天时,86-1甜瓜果皮和果肉病斑直径是伽师瓜的1.28 倍和1.29 倍;观察病斑组织显微结构,发现伽师瓜和86-1甜瓜果皮通过细胞壁增厚抵御链格孢侵染,果肉组织细胞壁抵抗能力较弱,侵染末期果皮与果肉组织细胞壁分层、皱缩,细胞内布满菌丝体和分生孢子,部分果肉细胞解体,无法辨认细胞结构;伽师瓜CHT和GLU基因始终高于86-1甜瓜,果皮高于果肉,CmCHT1相对表达量在侵染初期至侵染中期较高,CmCHT2相对表达量在侵染中期较高,表明病原菌在侵染初期至侵染中期诱导了CHT基因的表达;CmGLU相对表达量在侵染中期至侵染末期较高,表明病原菌在侵染中期至侵染末期诱导了GLU基因的表达;链格孢侵入伽师瓜和86-1甜瓜后,果皮和果肉组织CHT和GLU活性随贮藏时间延长呈升高-降低的变化趋势,伽师瓜高于86-1甜瓜,果皮高于果肉。表明伽师瓜更强的抵御能力与CHT、GLU基因与酶活性密切相关。     

虎杖提取物处理对采后梨果实抗性相关酶活性的诱导

研究了虎杖提取物对梨果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHT)与β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性的诱导情况及对梨果实青霉病的防治效果。结果表明,梨果实用虎杖提取物处理1d后,PAL、CHT和GLU活性开始升高,并在整个实验过程中一直保持较高的水平;另外,虎杖提取物对梨青霉病具有很好的抑制效果。     

不同浓度外源水杨酸对甜瓜果实抗病相关酶活性的影响

以伽师瓜和86-1甜瓜为实验材料,研究水杨酸(Salicylic acid,SA)处理对甜瓜果实抗链格孢侵染的影响。伽师瓜和86-1甜瓜经3、6、9 mmol/L水杨酸浸泡处理10 min,以蒸馏水处理为对照,接种Alternaria alternata,置于6℃冷库贮藏,测定抗病性相关酶活力。结果表明:SA处理可显著提高甜瓜果实PAL、SOD、CAT、POD、GLU、CHT活性,可有效提高甜瓜果实的抗病性,增强甜瓜果实对链格孢抗病能力。3 mmol/L SA处理可有效提高伽师瓜果实贮藏过程中抗链格孢侵染能力,6 mmol/L SA处理可有效提高86-1甜瓜果实贮藏过程中抗链格孢侵染能力。     

链格孢菌侵染采后甜瓜果实组织几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因表达分析

以伽师瓜（抗病性强）和86-1甜瓜（抗病性一般）果实为实验材料,研究链格孢菌（Alternaria alternata）侵染后几丁质酶（chitinase,CHT）和β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）基因表达规律。甜瓜果实接种A. alternata,7?℃贮藏,测定病斑大小,荧光定量聚合酶链式反应测定CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量。结果表明：伽师瓜和86-1甜瓜接种A.?alternata,在侵染9?d时出现病斑,9～24?d病斑直径不断扩大,86-1甜瓜病斑直径大于伽师瓜,侵染24?d时86-1甜瓜病斑直径是伽师瓜的1.12?倍,伽师瓜对A.?alternata侵染的抵抗能力要强于86-1甜瓜。在侵染期间,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量显著提高,呈先升高后降低的变化趋势,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量最高峰出现时间分别相差3、6、3?d,伽师瓜CmCht1、CmCht2相对表达量始终高于86-1甜瓜,CmGlu相对表达量在侵染12～24?d高于86-1甜瓜。在侵染期间CmCht1、CmCht2和CmGlu表达规律存在差异,侵染前期CmCht1、CmCht2相对表达量较高,侵染中期和后期CmGlu相对表达量较高;A.?alternata侵染前期主要诱导了CHT基因的表达,中期和后期主要诱导了GLU的基因表达,CHT和GLU的基因协同表达,起到抗病性的作用。伽师瓜抗病性强于86-1甜瓜与CHT和GLU的基因的表达密切相关。     

黄柏提取物对采后梨果实PAL、CHT及GLU的诱导

以鸭梨（Pyrus bretschneideri Rehd．）果实为试材，用黄柏提取物进行处理，研究黄柏提取物对梨果实苯丙氨酸解氨酶（PAL）、几丁质酶（CHT）与β-1，3-葡聚糖酶（GLU）活性的诱导情况及对梨果实褐腐病的防治效果。结果表明：梨果实用黄柏提取物处理后，PAL、CHT活性均有不同程度地提高，GLU活性下降被延缓；黄柏提取物对梨褐腐病具有很好的抑制效果。     

链格孢侵染对甜瓜病程相关蛋白活性及基因表达的影响

以抗病能力强的伽师瓜和抗病能力较弱的86-1甜瓜作为实验材料,研究甜瓜果实应答链格孢侵染过程中对几丁质酶(CHT)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活力变化的影响及基因表达规律。伽师瓜和86-1甜瓜接种浓度为1×106个/m L A.alternata孢子悬浮液20μL,置于6~8℃冷库贮藏,测定病斑大小,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力及基因相对表达量。结果表明:损伤接种A.alternata后,伽师瓜和86-1甜瓜均在15 d发病,贮藏过程中伽师瓜果实的发病率及病斑大小均低于86-1甜瓜;甜瓜应答侵染过程中,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力呈现先升高后下降的趋势,分别于21 d,18 d达到酶活高峰,且接种伽师瓜酶活力显著高于86-1甜瓜(p0.05),伽师瓜通过增强病程相关酶活力来抵御链格孢的侵染;伽师瓜CHT1、CHT2、GLU基因表达量显著高于86-1甜瓜,分别在贮藏18、18、15 d表达量最大;贮藏0~21 d病程相关蛋白活力及基因相对表达量与病斑直径呈正相关,说明病程相关蛋白在植物抵御病原微生物侵染早期与中期中起到了关键作用,并且在侵染中期作用显著。     

臭氧对杏果实黑斑病的抑制及贮藏保鲜作用

为了研究臭氧对杏果实采后黑斑病的抑制效果,以新疆‘赛买提’杏为试材,损伤并接种链格孢菌（Alternaria alternata）,接种后的杏果实用200 mg/m3臭氧气体进行熏蒸处理,每次熏蒸30 min,每7 d处理一次,处理后的接种链格孢菌杏果实置于1～2 ℃、90%～95%相对湿度条件下贮藏49 d,定期统计其病斑直径和接种发病率,并测定苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia-lyase,PAL）、肉桂酸-4-羟化酶（cinnamic acid-4-hydroxylase,C4H）、4-香豆酸辅酶A连接酶（4-coumaric acid CoA ligase,4CL）、β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-glucanase,GLU）和几丁质酶（chitinase,CHT）活力及总酚和类黄酮含量。结果表明：与对照相比,200 mg/m3臭氧可有效提高杏果实PAL、C4H、4CL、GLU和CHT活力,增加杏果实总酚和类黄酮含量,显著抑制杏果实病斑直径和接种发病率的增加（P＜0.05）,增强杏果实对黑斑病的抗病性。说明臭氧处理增强杏果实的抗病性与调控苯丙烷代谢密切相关。     

采后伽师瓜和86-1甜瓜果实抗链格孢菌侵染研究

以伽师瓜和86-1甜瓜为试材,通过损伤接种链格孢菌的方法,从甜瓜果实病斑直径、病程相关蛋白活性及保护酶活性三方面比较了二者之间的差异。结果表明,伽师瓜的病斑直径小于86-1甜瓜的,果皮病斑直径小于果肉。整个贮藏期间,接种链格孢菌后伽师瓜和86-1 2种甜瓜的病程相关蛋白活性和保护酶活性得到提高,在抵御链格孢菌侵染的过程中起到了重要作用。尤其在侵染中后期作用显著,且伽师瓜接种果皮和果肉活性均高于86-1甜瓜。     

厚皮甜瓜果实对链格孢侵染抵抗能力的差异

以伽师瓜和86-1甜瓜为实验材料,研究贮藏期间甜瓜对病原菌抵抗能力的差异。用打孔器在果实赤道部位等距离打孔6个,每孔接种20 μL链格孢,于7 ℃冷库贮藏,研究果皮与果肉病斑直径、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶和4-香豆酸-辅酶A连接酶活性的变化。结果表明:贮藏期间,86-1甜瓜果实病斑直径大于伽师瓜,且果肉病斑直径大于果皮;甜瓜接种链格孢后,果实病程相关蛋白及苯丙烷代谢酶活性均高于对照,在贮藏期间整体呈现先升高后下降的变化趋势。研究表明,伽师瓜果实抗病相关酶活性高于86-1甜瓜,果皮酶活性高于果肉,伽师瓜的抗病能力强于86-1甜瓜,果皮的抗病能力强于果肉。