羊肚菌菌丝体液体培养富锌条件的优化

通过对蛹虫草(Cordyceps militaris)、大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)、铆钉菇(Gomphidiaceae)、杏鲍菇(Pleurotus eryngii)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、羊肚菌(Morehella esculenta)、灵芝(Ganoderma lucidum)和真姬菇(Hypsizygus marmoreus)等食用菌富锌能力的考察,筛选出具有较强的耐锌和富锌能力的羊肚菌做为富锌菌种,并采用液体发酵技术对羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源、锌浓度和发酵条件进行了优化.结果表明:羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源是Zn(CH3COO)2,在100～ 800mg/L的锌浓度范围内菌丝体都可以生长,菌丝体对锌的最适富集浓度为600mg/L羊肚菌菌丝体最优富锌条件为:发酵温度25℃,起始pH7,振荡转速150r/min,250mL三角瓶装液50mL,锌添加量为600mg/L,接种量5％(V∶V)培养时间4d时,羊肚菌菌丝体的生物量及含锌量达最高,总富锌率可达23.20％,富集锌的有机化程度为37.71％.     

鸡腿菇菌丝深层培养富硒的研究

通过正交试验,从4株鸡腿菇菌株中筛选出1株具有较高生物量和较强富硒能力的鸡腿菇菌株CcⅢ,并探讨了其耐硒和富硒特性。结果表明,CcⅢ菌株具有一定的耐硒能力和很强的富硒能力,其固态培养最大耐硒浓度为10μg/mL,液态培养最大耐硒浓度为4μg/mL。在硒浓度2μg/mL时,菌丝体生物量为4.11 g/L,富硒量246.74μg/g,富硒率为50.57%,有机化程度高达92.95%。     

大绿菇菌丝体富锌能力的研究

对大绿菇菌丝体进行液体富锌培养。首先对大绿菇的耐锌和富锌特性进行研究,结果表明:大绿菇具有很强的耐锌能力和富锌能力,其菌丝体在锌浓度为50～2000mg/L的固体培养基上均能够生长;菌丝体对锌的最适富集质量浓度为200mg/L,超过300mg/L锌质量浓度对菌丝体的生长有较大影响。本试验还对富锌培养条件进行优化,在培养温度26℃,起始pH5～6,振荡速度100r/min,250mL三角瓶装液75mL,接种量15%(V∶V),培养基中锌添加量为200mg/L时,大绿菇菌丝的生物转化量及菌丝体富锌率最高,此时菌丝体生物量达到8.79g/L,菌丝体含锌量为2.530mg/g,富锌率为10.51%。对锌的有机化研究结果表明:大绿菇能将锌转化形成体内共价结合的有机锌,而不是简单的物理吸附,且其有机化程度在81.6%左右。     

古尼虫草富硒发酵条件优化

利用液体发酵技术,对古尼虫草进行富硒发酵,开发新的有机硒化物食品添加剂。筛选古尼虫草富硒发酵中最佳硒浓度,得出亚硒酸钠的最佳质量浓度为7μg/m L;利用单因素试验和正交试验对古尼虫草富硒发酵营养条件和培养条件进行优化,得出最优发酵条件为蔗糖6%,蛋白胨0.6%,KH2PO40.3%,Mg SO40.25%,培养基p H 6.0,培养温度25℃,接种量8%。经验证试验得出,古尼虫草生物量为(11.657±0.134)g/L,富硒率为(78.33%±0.67)%,与对照组相比【(11.067±0.224 g/L),(69.30%±0.43)%】分别提高了5.32%和13.03%。本研究为开发新的有机硒化物食品添加剂提供一途径。     

两种梭柄松苞菇富硒多糖的制备及其降血糖和抗氧化活性研究

本研究以梭柄松苞菇为载体,亚硒酸钠为硒源,分析评价了在两种富硒培养方法(固体培养和液体培养)下,硒浓度对梭柄松苞菇的生产效率、富硒量、有机硒转化率以及单位干重中有机硒含量的影响。结果表明,在最适硒浓度条件下,固体培养时,每千克培养基可收获91.30 g子实体,富硒量达到69.8μg/g,有机硒转化率为92.60%,有机硒含量为64.63μg/g;而液体培养时,每升培养液可收获4.50 g的菌丝,富硒量达到199.50μg/g,有机硒转化率为84.60%,有机硒含量为168.78μg/g。同时分别测定了梭柄松苞菇的富硒子实体多糖(SFCs)、富硒菌丝多糖(SPCs)、未经富硒的子实体多糖(FCs)和菌丝多糖(PCs)的体外降血糖活性和抗氧化活性,结果表明SFCs和SPCs对硒元素的富集,可能是其降血糖和抗氧化活性高于FCs和PCs的重要原因,并且SPCs的降血糖和抗氧化活性均显著高于阳性对照。     

大球盖菇培养基的筛选及培养条件的优化

大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)具有很高的营养价值和药用价值,但是目前对于大球盖菇培养基的筛选以及培养条件的优化研究还不够深入。本研究通过测定不同母种培养基配方下大球盖菇的菌丝生长速度、生长势以及菌落生长指数,筛选出大球盖菇最适宜母种培养基;测定不同液体培养基配方下大球盖菇菌丝球的生物量,筛选出最适宜的液体培养基;并在单因素试验的基础上,以大球盖菇菌丝球生物量为响应值,应用Box-Benhnken中心组合法对大球盖菇液体菌种培养条件进行了优化。结果表明:最适宜大球盖菇母种生长的配方为马铃薯200 g、干稻草150 g、蔗糖20 g、玉米粉10 g、蛋白胨3 g、酵母膏2 g、维生素B1 5 mg、琼脂20 g、水1000 mL;最适宜大球盖菇液体种生长的配方为蔗糖20 g、玉米粉30 g、稻草粉15 g、蛋白胨2 g、酵母膏1 g、维生素B1 5 mg、水1000 mL (pH自然);液体菌种最佳培养条件为转速140 r/min,接种量8%,培养时间12 d,三次平行实验得到的实际的大球盖菇菌丝球生物量平均为0.8108 g/100 mL,与预测值0.8282 g/100 mL相符。     

梯棱羊肚菌富硒条件优化工艺研究

为得到梯棱羊肚菌最佳富硒条件,在硒浓度、装液量、发酵时间及pH值单因素试验的基础上,以菌丝生物量及富硒率为指标,通过L_9(3~4)正交试验筛选出梯棱羊肚菌最佳液体富硒条件。结果表明:梯棱羊肚菌最佳液体富硒培养条件为:硒浓度20.0 mg/L、装液量125.0 mL/250.0 mL、发酵时间8 d、pH值为7.0,在此条件下菌丝生物量达到11.304 g/L,硒含量为0.683 mg/g,富硒率为37.15%。结果可为富硒羊肚菌液体菌种制备及羊肚菌富硒液体深层发酵提供参考。     

高生物量富硒产朊假丝酵母培养基优化

对富硒产朊假丝酵母发酵培养基进行优化,获得高生物量富硒酵母。从6种发酵培养基中确定G改良培养基为最佳培养基。利用Plackett-Burman设计法从影响富硒产朊假丝酵母生长的12个因子中筛选出葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、CuSO4添加量这4个关键因子。再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法确定关键因子的最佳水平及交互作用。试验得出各关键因子的最优组合为葡萄糖30 g/L、蛋白胨17 g/L、KH2PO4 6.5 g/L、CuSO4 0.01 g/L。结果表明,培养基优化后酵母生物量为12.01 g/L,有机硒含量为1 337.46 μg/g,谷胱甘肽为134.27 mg/L。将培养基中亚硒酸钠添加量由25 μg/mL提高至30 μg/mL,酵母生物量为11.21 g/L,有机硒为1 673.32 μg/g,谷胱甘肽为126.80 mg/L。     

高生物量富硒产朊假丝酵母菌株的选育

从5株优良的发酵酵母菌中筛选出耐硒和富硒能力较好的产朊假丝酵母,采用耐酸驯化和梯度浓度的耐硒驯化增加菌株的抗性。研究表明,产朊假丝酵母Ⅰ的富硒能力更好。在此基础上,经复合诱变、亚硒酸钠抗性平板初筛和摇瓶复筛,筛选出生物量和含硒量都较高的菌株D-5,再将突变株D-5进行紫外诱变,筛选出1株高生物量和高含硒量的菌株U-16,其菌株生物量为5.86 g/L,总硒量为1 575.40 μg/g,有机硒量为1 500.90 μg/g,其有机硒占胞内总硒比重的95.26%。与出发菌株相比,筛选菌株的生物量提高了67.90%,有机硒量增加了95.95%。     

高生物量富硒酵母的选育和培养条件的初步研究

对富硒酵母进行了选育并进行了条件优化，得到了摇瓶培养时富硒酵母的最适发酵条件：温度30℃，10％接种量，转速200r／min，发酵培养基最适初始硒浓度为25μg／ml，初始pH为4．0，发酵培养时间48h，经测定成品硒酵母生物量达到10g／L，硒含量超过1500μg／g，硒总含量超过15000μg／L，其中有机硒含量超过90％。     

富硒乳酸菌发酵条件的研究

通过单因素试验和L27(313)正交试验,确定了乳酸菌富硒的最佳发酵条件.正交试验结果表明,影响乳酸菌总硒量的主要因素是培养温度、接种量、亚硒酸钠浓度和培养温度与接种量的一次交互作用.最佳发酵条件为培养基初始pH为6.6,亚硒酸钠浓度为18 μg/mL,装液量为150 mL/250 mL三角瓶,接种量5.5%,培养温度 42 ℃,培养时间45.5 h.在此优化条件下,富硒乳酸菌生物量可达6.85 g/L,细胞硒含量达1100 μg/g,硒总含量可达7536 μg/L,细胞硒含量的92.15%为有机硒.     

秦巴山区低温型香菇的硒耐受力及富硒液体培养基优化

考察秦巴山区低温型香菇的硒耐受力,优化其在富硒条件下的培养基配方,拟为富硒香菇的相关产品开发提供参考依据。以秦巴山区规模化栽培的低温型香菇9608#菌株为试材,根据菌丝平均生长速度筛选其耐受Na_2Se O_3的最佳浓度;以菌丝体生物量为主要指标,通过Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验、Box-Behnken响应面实验及验证实验,研究香菇9608#菌株最优的富硒液体培养基。结果表明,香菇9608#菌株耐受Na_2Se O_3的最佳浓度为20.00 mg/L,其最佳富硒液体培养基为:马铃薯288.78 g/L、麦麸64.56 g/L、麦芽糖15.00 g/L、酵母膏10.00 g/L、KH2PO40.80 g/L、Mg SO_4·7H_2O 2.00 g/L、Na_2Se O_320.00 mg/L。以此培养基对实验结果进行验证,菌丝生物量可达66.34 g/L,实测值与拟合值相比,相对误差约为2.05%,说明本研究方法可行、结论可靠。     

红树林植物阔苞菊内生真菌硒富集工艺优化

为了获得有机硒的来源新途径,以菌丝体的富硒总量为指标,采用单因素、正交实验法研究了一株阔苞菊内生真菌的硒富集能力,对培养基中硒溶液添加量、盐浓度、碳源浓度、培养时间、碳源种类等影响因素进行了优化。结果表明,适合的培养条件为硒溶液添加量为30 m L、盐浓度5 g/L、碳源(葡萄糖)浓度15 g/L、培养时间24 h;代谢产物中硒含量为181.6μg/g,菌丝体富硒总量为1941.7μg/L,其有机硒转化率偏低,仅为16.2%。为进一步筛选开发滨海红树林中内生富硒微生物资源提供理论依据。     

富硒冬虫夏草发酵工艺优化

采用冬虫夏草作为富硒的载体,啤酒糟为基质,进行富硒冬虫夏草液态深层发酵试验,研究冬虫夏草对无机硒的生物转化能力.利用正交试验设计,对富硒冬虫夏草液态深层发酵条件如摇床转速、接种量、pH等进行了优化.结果表明,冬虫夏草能在含有低质量浓度亚硒酸钠（10～25mg/L）的培养基中生长,并在菌丝体内富集硒,最佳发酵工艺为摇床频率180r/min、培养10d的条件下,装液量50mL/250mL,pH值为7.0,接种量15％,温度20℃,亚硒酸钠质量浓度25 mg/L,啤酒糟质量浓度20 mg/L.在此优化的发酵条件下,富硒冬虫夏草菌丝体总富硒量为5808.20 μg/L.     

富锌冬虫夏草菌丝体有机化程度及氨基酸含量分析

对冬虫夏草进行液体富锌培养 ,结果表明 ,培养基中适宜添加锌浓度为 1 5 0 μg/mL ,此时菌丝体生物量达到 1 0 7g/L ,菌丝体含锌量为 4875 1 μg/g ,富锌率为 3 4 0 5 % ,有机化程度达到76 3 3 %。分析氨基酸含量 ,富锌冬虫夏草菌丝体中氨基酸含量比对照明显增加 ,说明锌能促进其氨基酸生物合成。     

黑皮鸡枞菌菌丝体发酵富硒条件优化及菌丝体多糖抗氧化活性研究

目的 初步考察菌丝体发酵条件下，黑皮鸡枞菌的富硒规律及菌丝体多糖的体外抗氧化活性。方法 以菌丝体干重、菌丝体多糖含量和硒利用率为主要考察指标，分别考察外源硒浓度和发酵条件对黑皮鸡枞菌菌丝体发酵富硒的影响。以3种自由基清除率为指标，考察菌丝体多糖及富硒菌丝体多糖的体外抗氧化能力。结果 黑皮鸡枞菌菌丝体富硒的最佳条件为：硒元素添加量5 mg/L，发酵温度25℃，装液量250 mL，发酵起始pH 7.0。在该条件下，黑皮鸡枞菌的生物量、菌丝体多糖含量、硒利用率分别为(7.68±0.48)g/L、(3.82±0.24)%和9.22%。当富硒菌丝体多糖浓度为0.7 mg/L时，其对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除率分别为(49.05±1.94)%、(52.43±3.05)%和(63.87±2.95)%。结论 低浓度硒(5~10 mg/L)可以促进菌丝体生长及菌丝体多糖的累积，但高浓度硒(≥15 mg/L)会对菌丝体生长和菌丝体多糖累积产生抑制。硒利用率主要受菌丝体产量影响。通过富硒培养，可以提高菌丝体多糖的抗氧化性。     

响应面法优化富硒粗毛纤孔菌菌丝生长培养基成分

本研究考察了粗毛纤孔菌对无机硒的耐受度,并通过响应面法对富硒粗毛纤孔菌菌丝生长培养基成分进行了优化。以粗毛纤孔菌菌丝生长速度为指标,通过单因素实验及Box-Behnken响应面优化,确定该菌菌丝富硒培养基的最佳组成成分,并通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对该菌菌丝硒富集量进行检测。结果表明,粗毛纤孔菌菌丝的生长情况受外源硒影响较大,当硒浓度≥37.25 mg/L时,该菌菌丝生长开始受到显著的抑制(P<0.05),其对硒的最大耐受浓度约为298~596 mg/L;经响应面法优化得到富硒粗毛纤孔菌菌丝生长最优培养基成分为:麸皮56.8 g/L、葡萄糖49 g/L、Se 22.4 mg/L、MgSO₄ 0.75 g/L、KH₂PO₄ 1 g/L、V_B1 1 mg/L、琼脂15 g/L,在此条件下,富硒粗毛纤孔菌实际菌丝生长速度达到8.41 mm/d,与未优化对照组相比,菌丝生长速度提高了0.965倍,且硒富集量达到31.584 μg/g。本研究获得了富硒粗毛纤孔菌菌丝生长培养基最优配方,为富硒粗毛纤孔菌菌丝体的大量制备、富硒粗毛纤孔菌子实体的栽培及其它后续研究提供了理论依据。     

富硒灵芝液态深层发酵工艺研究

采用灵芝作为富硒的载体,进行富硒灵芝液态深层发酵实验,研究灵芝对无机硒的生物转化能力。利用正交实验设计,对富硒灵芝液态深层发酵条件如摇床转速、接种量、pH等进行了优化。结果表明,灵芝能在含有低浓度亚硒酸钠(50～200mg/kg)的培养基中生长,并在菌丝体内富集硒。在优化的发酵条件下,富硒灵芝菌丝体干质量为38.0g/L,菌丝体硒含量为1568μg/g,总富硒量为59584μg/L。     

荷叶离褶伞菌丝体富硒条件的研究

为获得荷叶离褶伞富硒菌丝体,以菌丝体干重和富硒率为评价指标,研究灭菌条件、培养时间、硒添加量和硒添加时间对荷叶离褶伞菌丝体生长及其富硒效果的影响.采用L9(34)正交实验优化荷叶离褶伞菌丝体富硒条件,结果表明当灭菌条件为115℃、20min,于发酵至第5d在发酵液中加入4.μg/mL Na2Se03,待发酵至13d时,菌丝体干重量和富硒量分别为0.8232g/100mL和0.7040mg/g,由此确定上述条件为荷叶离褶伞菌丝体的最优富硒发酵条件.     

灵芝富硒发酵条件优化及硒多糖抗运动疲劳活性研究

为研究灵芝富硒发酵最佳条件，探讨灵芝菌丝体硒多糖对小鼠运动疲劳活性的影响。以菌丝体生物量为指标，利用单因素和响应面试验优化发酵条件，并分析硒多糖的抗疲劳活性。结果显示，最佳富硒发酵条件为：Na₂SeO₃浓度39 mg/L，摇床转速185 r/min，温度28℃，此条件下，灵芝菌丝体干重12.47 g/L，富硒率96.87%，硒多糖386.52 mg/L，多糖中硒含量93.58 mg/kg。硒多糖可显著提高小鼠力竭游泳时间，降低小鼠体内血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)和丙二醛(MDA)含量，提高肝糖原(HG)、肌糖原(MG)含量，提高骨骼肌细胞中抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性，从而缓解细胞的氧化应激损伤。综上，本研究通过富硒发酵获取的灵芝菌丝体硒多糖具有较好的抗运动疲劳活性，有深入开发利用的前景。