色谱法在鸡蛋清主要过敏原分离纯化中研究进展

鸡蛋营养丰富,同时也是引起人体过敏的主要食物之一。蛋清中含有4种主要过敏原,包括卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白和溶菌酶。概述了鸡蛋中4种主要过敏原的理化特性及色谱法纯化过敏原的研究进展,旨在为规模化分离得到高纯度和高活性的过敏原提供参考。     

一步层析法分离高纯度蛋清过敏原卵转铁蛋白

鸡蛋是引起食物过敏最常见的食物之一.为了快速高效分离鸡蛋中主要过敏原卵转铁蛋白,开展鸡蛋过敏的研究,采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析一步分离出高纯度、高回收卒的卵转铁蛋白,纯度达97%,回收率为87.47%.本实验所建立的方法操作简便,设备简单,分离效率高,纯化出的卵转铁蛋白可为进一步研究提供实验材料.     

食品加工对蛋清致敏性的影响研究进展

摘要：鸡蛋是人们日常生活中不可或缺的营养品，然而，鸡蛋也是最常见的引起过敏反应的食物之一。婴儿和儿童是鸡蛋过敏的高发人群，鸡蛋过敏反应主要是由血清免疫球蛋白E（IgE）介导的，引发皮肤、消化道、呼吸道相关的症状，甚至可导致危及生命的严重过敏反应。鸡蛋过敏目前尚无特效治愈方法，患者严格避免摄入鸡蛋成分被认为是最有效的预防手段，但严格避食会影响患者的生活质量和膳食营养，且因意外摄入鸡蛋过敏原导致过敏症状出现的情况屡屡发生。可见在鸡蛋过敏的应对方面，迫切需要新的有效方法。食品加工技术作为从鸡蛋致敏的源头上控制过敏反应的方法，近年来发展迅速。本文综述了各种常见食品加工方法对蛋清致敏性的影响，为后续开发低致敏鸡蛋产品提供思路。     

鸡蛋过敏人群中主要过敏原的反应性及卵类粘蛋白抗原表位的初步研究

目的分析年龄、性别对鸡蛋过敏人群中主要过敏原反应性的影响,初步探索我国鸡蛋过敏儿童卵类粘蛋白的主要抗原表位。方法以卵类粘蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白纯品为抗原,采用免疫斑点印迹,检测21例鸡蛋过敏儿童血清特异性免疫球蛋白E(SIgE)与蛋白反应性,分析年龄、性别因素对过敏原反应性的影响;应用DNAStar生物分析软件,预测并合成卵类粘蛋白抗原表位肽段,采用免疫斑点印迹检测抗原表位与鸡蛋过敏儿童血清的反应性。结果 A(≤1岁)组、B组(2~3岁包括3岁)、C组(3岁)的卵类粘蛋白反应率差异有统计学意义(P0.05),卵白蛋白、卵转铁蛋白反应率各组间均差异无统计学意义(P0.05);性别对各过敏原的反应率差异无统计学意义(P0.05);卵类粘蛋白抗原表位反应率较低。结论卵类粘蛋白sIgE在不同年龄段存在差别,卵白蛋白sIgE在21例患者均可检测出,卵转铁蛋白s Ig E在各年龄段无明显差别;应用DNAStar生物软件预测的卵类粘蛋白抗原表位,在天津地区反应性低,不是该地区主要抗原表位。     

腰果过敏研究进展

腰果过敏是一种严重的树坚果过敏。近年来,随着腰果消费量迅速增长,腰果过敏发生率随之呈上升趋势,腰果正在成为一种重要的食物过敏原。少量的过敏原可导致严重的过敏反应,甚至危及性命。然而,目前腰果过敏显然是一个被严重低估的健康问题,尤其是对儿童。因此,社会迫切需要给予腰果过敏足够的重视,并有必要向公众广泛宣传腰果过敏的严重性。本文就腰果过敏的流行病学、过敏原成分、临床特点、诊断以及预防治疗等方面进行系统综述,旨在为腰果过敏的社会认识和深入研究提供科学信息。     

食物过敏原构象性表位鉴别的研究进展

构象性表位是表位的重要组成之一,在过敏反应中起重要作用。表位定位工作是过敏原研究的重要领域。目前应用于构象性表位研究的方法主要有3类:基于线性表位的氨基酸组成和特性预测构象性表位;利用噬菌体筛选得到模拟肽,通过生物信息学定位构象性表位以及利用光谱学等方法测定构象性表位与抗体结合的相关参数确定构象型表位。前两种方法比较常用,而光谱学方法是近年来发展的一种新方法,准确性更高。这3类定位方法可为过敏原的研究提供认识和了解构象性表位的途径,并为构象性表位在过敏中的作用机制提供部分理论依据。     

食用芒果过敏的研究进展

芒果是我国亚热带地区重要经济作物,含有多种功能性成分,然而大部分人群在接触或食用芒果后会出现不同程度的过敏临床反应。本文简单介绍食用芒果导致的过敏反应,包括接触性皮炎、口腔过敏症状、交叉过敏等,并详细阐述了芒果导致过敏现象的两种途径,以及不同过敏原物质、反应类型和发病人体的免疫途径。根据过敏原Allergome数据库(http://www.allergome.org/)分析得到芒果中所含有的9种主要的过敏原,并对其中2种过敏原蛋白,即抑制蛋白和几丁质酶进行了结构域的分析。通过对芒果过敏交叉反应的介绍,得到不同物种中的过敏蛋白氨基酸序列具有高度同源性,而这些同源性序列决定与免疫球蛋白E具有相同作用的表位。本文以期从分子水平上提供芒果低过敏品种培育的新途径和过敏防治的新思路。     

小麦过敏原抗原抑制技术研究进展

食物过敏是全球范围内被广泛关注的食品安全问题之一。小麦是世界上生产和消费最广泛的食物之一,同时也是公认的八大过敏性食品之一,食用小麦会诱发多种过敏症状。麦醇溶蛋白和麦谷蛋白是小麦中主要过敏原,在它们链结构中,重复的氨基酸序列区域存在大量抗原表位,摄入或接触均可能会诱发过敏反应。对小麦中的主要过敏原、过敏病症和现阶段过敏原的检测方法以及抑制过敏原抗原性的方法进行了综述。为低敏性小麦制品的开发提供参考。     

花生过敏原及其检测方法研究进展

花生过敏可导致某些人群严重的食品安全问题。过敏患者只能通过避免食用含有花生过敏原成分的食物来避免过敏。但是,食品在生产加工、储存、运输、销售过程中有可能被过敏原污染。因此,确定各类加工食品中是否含有花生过敏原成分,对于预防食用者发生花生过敏反应具有重要意义。花生中已确定的过敏原蛋白有13种(Ara h 1~Ara h 13)。本文综述了花生中过敏原蛋白的结构信息,当前流行的提取方法,以及各种定性定量的检测方法,总结了各种方法的优缺点。同时对建立一种具有特异性强、灵敏度高、定量准确的花生致敏蛋白检测方法的发展趋势进行了展望。     

鸡蛋清中主要过敏原的研究进展

鸡蛋是引起食物过敏最常见的过敏原食物之一。本文重点介绍了鸡蛋清中主要过敏原卵类粘蛋白、卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶的研究进展。     

一步法分离鸡蛋清中三种主要过敏原的研究

为快速高效分离鸡蛋中主要过敏原开展鸡蛋过敏的研究,本实验采用DEAE-Sepharose FF 色谱柱一步分离鸡蛋中的三种主要过敏原卵白蛋白、卵转铁蛋白和溶菌酶,通过SDS-PAGE 比对,纯度均高于相应标准品纯度,得率分别为87.66%、55.87% 和92.80%。本实验操作简便、设备简单、分离效率高,是一种分离鸡蛋过敏原的好方法。     

桃过敏原的种类、制备、鉴定及检测技术研究进展

作为日常食用的植物源食品,水果可为人体提供糖类、维生素、矿物质等多种营养物质,从而调节机体的多项生理功能。然而,水果中的致敏成分可诱发过敏反应,由此引发的食品安全问题也越来越引起关注。桃是一种最常见的过敏水果,可引起轻微过敏症状和严重过敏反应甚至过敏性休克。文章综述桃过敏原的种类、亚类及其生物特性,阐述不同亚类桃过敏原在品种或地区的差异性,总结桃过敏原的分离制备方法和分子鉴定技术,并从过敏原基因检测、免疫检测技术和仪器检测技术3个方面对桃过敏原检测技术进行概括,以期为桃过敏原的致敏机制、消减技术和食品加工的安全控制提供研究基础。     

食物过敏原标准物质的研究进展

食物过敏原标准物质是解决食物过敏问题的关键实验材料之一。在食物过敏原标准化方面,鸡蛋、牛奶和花生过敏原的分离纯化、结构和免疫学性质表征方面取得了良好的效果,为研发单个过敏原蛋白标准物质提供了支撑。在美国国家标准与技术研究院（NIST）颁布的8种过敏性食物标准物质中,只有RM8445用于检测食物过敏原;由欧盟资助的两大项目中,EuroPrevall项目主要构建了一个食物过敏原信息的数据库,而CREATE项目则首次证实重组花粉过敏原rBetv1可作为天然花粉过敏原Betv1的候选标准物质,为开发重组食物过敏原标准物质提供了一种可借鉴的策略。总之,研发食物过敏原致敏性蛋白标准物质是一项重要的任务,极具挑战性。     

减少过敏原危害

正据统计,我国存在2亿多过敏患者,其中约90%是由食物过敏原引发的过敏性疾病。食物过敏已成为最严重的卫生学问题之一,过敏反应轻则恶心、呕吐、皮肤瘙痒,重则可导致休克,甚至死亡。然而食物过敏目前尚无有效的根治措施,只能通过避免食入过敏原来预防食物过敏的发生。详尽的食物标签可为消费者成功避免过敏原提供关键信息,因此过敏原的检测和标识就显得尤为重要。本专题就过食物敏原的检测技术、标识管理等方面进行了介绍,希望使读者更加了解过敏原的现状及如何减少过敏原的危害。     

鸡蛋卵转铁蛋白过敏原B细胞线性表位的预测研究

为预测鸡蛋过敏原卵转铁蛋白的B细胞线性表位,以GenBank中提供的鸡蛋卵转铁蛋白氨基酸序列为基础,分别用Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法和Karplus-Schulz法对鸡蛋卵转铁蛋白的抗原指数、亲水性、蛋白表面可及性及柔韧性进行预测,并用Chou-Fasman法和Deleage-Roux法预测其二级结构,综合分析以上预测结果,得出鸡蛋卵转铁蛋白可能的B细胞线性表位区。结果表明鸡蛋卵转铁蛋白存在7个潜在表位区,包括蛋白第174～181、215～222、231～240、288～294、332～344、415～429、547～555位可能为B细胞线性表位优势区域。该结果将有助于鸡蛋卵转铁蛋白B细胞表位的进一步精确定位。     

加工导致的花生过敏原蛋白结构变化及其对性质的影响

花生是世界粮农组织(FAO)认证的八大过敏食物之一,花生可导致严重的过敏反应,甚至危及生命。由于花生作为食物配料有广泛的应用,人们对花生过敏越来越关注。本文对加工后花生过敏原蛋白结构变化与性质变化之间的关系研究进行了综述,为探索加工定向改变花生过敏原蛋白的结构和性质提供方向。     

生物信息学技术在食物过敏原表位预测中的应用

表位是过敏原与抗体结合的物质基础。基于生物信息学技术的表位预测包括线性表位预测和构象性表位预测。其中线性表位预测主要是基于过敏原蛋白的理化性质进行预测;构象性表位预测主要包括基于蛋白结构信息和结合噬菌体展示技术的两大类预测。利用生物信息学技术预测食物过敏原表位主要应用在牛乳、鸡蛋、鱼、甲壳类水产动物等动物性食物过敏原和花生、大豆、小麦、果蔬类等植物性食物过敏原方面。     

时间分辨免疫荧光法测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分

目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础.方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏原总蛋白抗体、Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,用于检测10种食品中是否舍有鸡蛋蛋白成分.结果:鸡蛋总蛋白SDS-PAGE显示带大致有10条,其中主要条带有4条,分子量分别为71、55、38、14kDa;成功地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为0.625ng/mL,标准曲线在12.5～640ng/mL范围内线性良好;8种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性.结论:初步建立了检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分的双抗体夹心TRFIA,具有较好的特异性和灵敏度;该方法对于未标注鸡蛋过敏原成分的食品检测具有一定的实际应用价值.     

大米过敏的研究进展

食物过敏是机体针对摄入的食物产生的一种有害的、具有复发性的特定免疫反应,能够引起食物过敏反应的物质称为食物过敏原,食物中含有的致敏蛋白是引发食物过敏反应的一大来源。大米是世界上公认的最重要的粮食作物之一,全球约有一半以上的人口以大米为主食。大米蛋白占大米总量的8%~10%,含有丰富的必需氨基酸,易于被人体消化吸收,是公认的谷类蛋白中的上佳者。传统上认为,大米是低致敏性谷物,已被广泛应用于婴幼儿及配方食品中,但近年来的研究表明,大米也可引发食物过敏反应,可诱发过敏性皮肤炎、过敏性荨麻疹等症状,严重者还可引起过敏性休克。本文从大米过敏的流行性分布、主要的大米过敏蛋白以及过敏蛋白的检测方法等方面阐述了大米过敏的研究进展。     

致敏小鼠血清代替过敏患者血清筛选Jug r 1 IgE线性抗原表位的可行性研究

目的:利用核桃过敏患者和核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠血清筛选Jug r 1的IgE线性抗原表位,比较两者所筛选的表位的差异性,为今后利用小鼠血清替代人血清筛选食物过敏原表位提供理论依据,对食物过敏原研究及治疗具有重要意义。方法:利用固相合成肽法合成44个覆盖了Jug r 1一级序列的重叠短肽,通过圆点印迹试验利用核桃过敏患者血清和核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠血清分别筛选出IgE抗原表位。结果:核桃过敏患者可以识别的IgE结合的线性抗原表位分别是肽段~1AALLVALLFVANAAA~(15)、4LVALLFVANAAAFRT18、~(16)FRTTITTMEIDEDID~(30)及~(125)CGISSQRCEIRRSWF~(139);核桃过敏原Jug r 1致敏小鼠所识别的抗原表位分别是1AALLVALLFVANAAA15和~(125)CGISSQRCEIRRSWF~(139)。结论:通过小鼠过敏血清筛选出的两个IgE线性抗原表位存在于过敏患者血清筛选出的4个IgE抗原表位中,提示在利用致敏小鼠血清代替过敏患者血清筛选IgE抗原表位时,可能出现假阴性结果,即有部分IgE线性抗原表位没有被识别。