氯化铵和磷酸二氢钠对小球藻增殖的影响

通过小球藻一次性培养试验,研究了不同氯化铵浓度和无机磷浓度对小球藻增殖的影响.结果表明,氯化铵和磷酸二氢钠对该藻增殖具有极显著作用,且这两种营养盐之间存在交互作用.此小球藻生长所需的NH4 -N最适浓度为150μmol/L;相应的无机磷最适浓度为10μmol/L;二者的比例是15:1.营养盐浓度过高或者过低均不利于小球藻的增殖.     

翅果油甾醇对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

体外培养大鼠前脂肪细胞,分别以2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L的翅果油甾醇对其进行处理.采用MTT比色法检测细胞增殖情况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）分析过氧化物酶增殖物激活受体γ2（PPARγ2）mRNA表达情况,探讨翅果油甾醇对前脂肪细胞增殖分化的影响及其可能的机制.结果显示：各组细胞MTT测试OD值均低于对照组,4μmol/L及8μmol/L组细胞油红O染色的OD值及PPARγ2mRNA的表达量均显著下降.     

己烯雌酚、邻苯二甲酸二丁酯和丙基硫脲嘧啶对小鼠垂体瘤神经细胞增殖的联合作用研究

目的探讨己烯雌酚(DES)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、丙基硫脲嘧啶(PTU)对小鼠垂体瘤神经细胞(GT1-7神经细胞)的增殖效应及其联合作用。方法 DES的剂量为0.1、1、10、100、1 000μmol/L,DBP的剂量为0.01、1、10、100、1 000μmol/L,PTU的剂量为0.000 1、0.01、1、100、1 000μmol/L。联合作用的剂量设计为DES0.1~1 000μmol/L,DBP 0.01μmol/L,PTU 0.000 1μmol/L。采用CCK-8法检测3种物质单独作用和联合作用24 h后GT1-7神经细胞存活率。结果 DES、DBP单独作用于细胞,随DES或DBP浓度的增大细胞存活率呈现先增加后降低的趋势。PTU单独作用于细胞,各组的细胞存活率与对照组比较有所增加,但基本维持在一定水平。DES、DBP、PTU单独作用时,其浓度分别低于10、100、1 000μmol/L时,GT1-7神经细胞存活率在90%以上。DES与DBP联合暴露时,细胞存活率随DES浓度的增加而降低。DES与PTU联合暴露时,细胞存活率随DES浓度增加表现为先增加后降低,DBP与PTU联合暴露时,细胞存活率随DBP浓度增加表现为先增加后降低。与DES单独作用体系比较,0.01μmol/L DBP和0.000 1μmol/L PTU同时加入到0~10μmol/L DES后细胞存活率明显增加,差异有统计学意义(P0.05),而DES浓度为100μmol/L时细胞存活率由80%左右降至4%左右,差异有统计学意义(P0.05)。结论 DES、DBP、PTU对GT1-7神经细胞的增殖效应呈先促进后抑制的趋势,3种物质在一定剂量下共同作用对GT1-7神经细胞增殖呈现联合作用。     

灭草烟在甘蔗组培苗生根阶段浓度筛选试验

以ROC22增殖阶段的组培苗为材料,探究了不同浓度灭草烟处理对小苗生根及生长的影响。灭草烟处理浓度为0.5μmol/L时,生根率低于50%,小苗没有假茎,绿叶数量显著减少。处理浓度为1.2μmol/L以上时,生根率为0。当处理浓度为1.6～2.5μmol/L时,接近半致死浓度。综合致死率和苗的生根及生长情况分析,灭草烟浓度为1.2μmol/L时,ROC22组培苗能部分存活但不能长根。因此,适合ROC22组培苗生根阶段的灭草烟浓度为1.2μmol/L。     

全反式视黄酸通过RARα对铁调节蛋白2的基因表达的影响

目的:通过体外肝细胞培养来研究全反式视黄酸(atRA)对铁调节蛋白2(IRP2)的影响。方法:体外实验将大鼠原代肝细胞按Seglent法分离后,随机分为严重缺乏组A、边缘性缺乏组B、正常生理组C、治疗剂量组D、RARα阻抑组E,分别给予0、0.5、1.0、50μmol/L全反式视黄酸和50μmol/L全反式视黄酸+10μmol/L RO培养96h。用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR法)检测肝脏的IRP2 mRNA的表达。结果:大鼠全反式视黄酸缺乏时,肝脏IPR2 mRNA表达增强(P0.05),补充全反式视黄酸后,IPR2 mRNA表达减弱,但阻抑RARα后,VA这种作用减弱。结论:全反式视黄酸可通过RARα改变IRP2 mRNA的转录来影响铁代谢。     

基于微流控技术的橙黄决明素对HepG2细胞的体外安全性评估

目的 本研究将微流控技术运用到HepG2细胞模型构建及对橙黄决明素的潜在体外安全性评估中。方法 以鼠尾胶原Ⅰ型（1.3 mg/mL）+明胶（7.5%）构建仿真人体微环境,对乙酰氨基酚（APAP）作为阳性对照组,通过不同浓度橙黄决明素对HepG2细胞的增殖活性、活/死细胞染色和功能性生化指标进行体外安全性评估。结果 该平台实现了HepG2细胞的稳定培养与应用,经72 h培养,细胞成团增殖。橙黄决明素连续处理48 h后计算细胞存活率,结果表明随着橙黄决明素浓度的增加,0、50、100和200μmol/L细胞存活率分别为100.0%、95.3%、90.3%和81.6%,与空白对照组比较,尤以200μmol/L差异最为显著（P<0.05）;红色标记的死细胞数量随橙黄决明素浓度增加逐渐增多,绿色标记的活细胞数量则逐渐减少;尿素氮（BUN）含量随着浓度的增加而显著降低,与空白对照组（0μmol/L）比较,50～200μmol/L组差异具有显著性（P<0.05）,且200μmol/L与APAP组BUN含量接近;谷丙转氨酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性之间随着浓度的变化均无显著性差异。结论 ...     

多种绿色DNA嵌入染料实时荧光PCR检测猪DNA效果比较

实时荧光定量PCR是食品科学领域一种高效、灵敏的研究技术,荧光染料的种类和浓度会对实时PCR反应产生一定影响。以8种绿色荧光DNA嵌入染料SYTO 11~14,SYTO 16,SYTO 21,SYTO 24~25为研究对象,体系选择荧光染料浓度分别为10,5,2,1,0.5μmol/L,以从猪肉中提取的基因组DNA为模板进行扩增,产物长度149 bp。通过分析Ct值和熔解曲线,评价染料浓度对扩增效果的影响,初步筛选出最适染料及相应浓度:SYTO 11(5μmol/L,2μmol/L),SYTO 13(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 21(1μmol/L)和SYTO 24(0.5μmol/L)。根据筛选结果自配反应预混液,以2种商业实时荧光PCR预混液为参照,通过模板10倍梯度稀释绘制标准曲线,计算扩增效率,R2均大于0.99,线性范围均在40 ng~0.04 pg之间,其中染料SYTO 13(10μmol/L)和SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L)扩增效率分别为99.35%,100.50%和99.71%,接近商业试剂盒2(BYRT染色,扩增效率99.61%),高于商业试剂盒1(Evagreen染色,扩增效率97.80%),具有实际应用价值。     

维生素A通过铁调节蛋白2基因表达来影响铁代谢

目的:通过大鼠原代肝细胞培养(体外试验)来研究维生素A通过铁调节蛋白2(IRP-2)来影响铁代谢.方法:将SD大鼠原代分离肝细胞(seglent法),随机分组严重缺乏A、边缘缺乏B、常规组C、预防治疗组D、RO阻抑组E,分别给予0、0.5、1.0、50 μmol/L全反式视黄酸和50 μmol/L全反式视黄酸+10 μ...     

香芹酚抗氧化和抑制酪氨酸酶活性的研究

采用清除DPPH、ABTS、羟自由基和超氧自由基,抑制脂质过氧化活性和抑制酪氨酸酶活性的方法,检测香芹酚的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性。实验结果显示,香芹酚具有明显的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性,呈浓度依赖性效应。在清除DPPH、ABTS、羟自由基、超氧自由基,抑制脂质过氧化活性和抑制酪氨酸酶活性试验中,香芹酚的体系终浓度IC50分别为100μmol/L、18.18μmol/L、16μmol/L、16μmol/L、12.5μmol/L和6.67μmol/L。作为阳性对照药物的山奈酚的体系终浓度IC50分别为80μmol/L、9.09μmol/L、12μmol/L、12μmol/L、8.33μmol/L和3.33μmol/L。香芹酚具有1个酚羟基,山奈酚具有3个酚羟基,分子结构的不同,导致山奈酚和香芹酚抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性不同。研究表明香芹酚具有明显的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性,是值得进一步研究的抗氧化防衰老类候选药物、化妆品原料和食品添加剂。     

雌马酚及大豆活性成分对人前列腺癌细胞DU145的生长影响

目的:观察大豆异黄酮代谢产物雌马酚对人前列腺癌细胞DU145的生长影响,并在生理浓度下比较其与大豆异黄酮主要成分金雀异黄素、大豆素的体外抗增殖活性。方法:采用MTT法检测不同浓度的雌马酚、金雀异黄素及大豆素对DU145细胞增殖的影响,并以流式细胞术分析细胞周期分布情况。结果:雌马酚在1×10-6～1×10-5mol/L表现为抑制作用,金雀异黄素在1×10-7～1×10-6mol/L时表现为促增殖效应,达到5×10-5mol/L时出现抑制作用,大豆素在生理浓度下则主要表现为促增殖效应;雌马酚在1×10-6mol/L时使细胞在G0/G1期阻滞,在5×10-6～1×10-5mol/L时使S期及G2/M期细胞增多,金雀异黄素在5×10-6mol/L出现G2/M期阻滞,大豆素使S期及G2/M期细胞增多。结论:雌马酚在体外具有一定的抗前列腺癌活性;在生理浓度下,其抗癌活性可能强于金雀异黄素及大豆素。     

雌马酚对人乳腺癌MCF-7细胞生长的影响

目的：观察雌马酚在不同浓度水平下对雌激素依赖阳性人乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。方法：采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布情况。结果：MCF-7细胞经去雌激素处理以后,与对照组相比,雌马酚在10-6～10-5mol/L时可显著抑制细胞增殖,使S期细胞增多,其抑制作用可被雌激素受体特异性抑制剂ICI-182780阻断。结论：雌马酚对人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖具有抑制作用,可干扰DNA的复制,具有一定的雌激素样作用,且其抑制作用可能是通过雌激素受体（ER）介导的。     

尿酸和嘌呤在水和磷酸盐缓冲介质中溶解度的测定

目的：测定尿酸和4种嘌呤（鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺嘌呤）在水和磷酸盐缓冲介质中的溶解度,以期为嘌呤在体内的代谢及其终产物尿酸对心血管作用的研究提供参考。方法：在室温20℃下,将上述5种物质分别溶于蒸馏水及磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L,p H=7.40）中制成饱和溶液,采用紫外分光光度法分别测定其浓度。结果：在水中的溶解度由高至低依次为腺嘌呤（66.15 mg/100 m L）、次黄嘌呤（39.95 mg/100 m L）、尿酸（6.23mg/100 m Ll）、黄嘌呤（1.14 mg/100 m L）和鸟嘌呤（0.17 mg/100 m L）;在磷酸盐缓冲液中溶解度由高至低依次为尿酸（194.54 mg/100 m L）、腺嘌呤（65.22 mg/100 m L）、次黄嘌呤（29.27 mg/100 m L）、黄嘌呤（2.27 mg/100m L）和鸟嘌呤（〈0.1 mg/100 m Ll）。结论：尿酸在磷酸盐缓冲液中的溶解度远远高于水中,是水中的32倍;腺嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤在2种介质中的溶解度相近,鸟嘌呤在2种介质中均最难溶,甚至在磷酸盐介质中几乎不溶。     

五味子乙素逆转人结肠癌细胞多药耐药性

目的:研究五味子乙素(SchisandrinB,SchB)抑制逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞(THC-8307/OXA)多药耐药性(MDR)。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测奥沙利铂(OXA)和五味子乙素的细胞毒性;Western Blot检测SchB对耐奥沙利铂人结肠癌细胞THC-8307/OXA细胞BCRP蛋白水平的影响。结果:SchB(12.5、25、50μg/mL)对人结肠癌细胞(THC-8307)和THC-8307/OXA无显著毒性作用(P>0.05,)OXA对THC-8307的IC50为3.50μg/mL,而对THC-8307/OXA的IC50为12.21μg/mL,THC-8307/OXA较THC-8307对OXA耐药3.49倍,SchB(12.5、25、50μg/mL)能使OXA对THC-8307/OXA细胞的IC50从12.21μg/mL依次下降至5.94、4.47、3.15μg/mL,逆转倍数分别为2.06、2.73、3.88倍。Western Blot检测SchB(25μg/mL)和OXA(20μg/mL)处理48h后,THC-8307/OXA细胞BCRP蛋白表达明显降低。结论:SchB具有逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞的MDR作用,其作用机理与下调BCRP表达有关。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠心肌保护机制的研究

目的:研究银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠脂代谢及心肌细胞PPARγmRNA表达的影响,探讨银杏叶提取物对2型糖尿病的治疗作用。方法:用高糖-高脂肪饲料刺激加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型,将空腹血糖>16.6mmol/L的20只大鼠随机分为糖尿病组(10只)和治疗组(10只),另设正常组(10只)。治疗组大鼠给予银杏叶提取物灌胃,糖尿病组和正常组给予0.9%氯化钠注射液灌胃。治疗10周后取血清测定血脂、空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(INS),计算胰岛素抵抗指数(IRI);测定心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量;采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测正常组、糖尿病组和治疗组大鼠心肌细胞PPARγmRNA表达量。结果:与糖尿病组大鼠相比较,治疗组大鼠心肌组织PPARγmRNA表达量升高(P<0.05)、MDA降低(P<0.01)、SOD升高(P<0.01);而FBG、INS及IRI显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:银杏叶提取物能够明显降低2型糖尿病大鼠的高血糖,降低胰岛素抵抗水平,改善脂质过氧化状态,并且可以提高2型糖尿病大鼠心肌细胞PPARγmRNA的表达,对2型糖尿病有一定的治疗作用。     

黑木耳化学成分的研究

目的:对黑木耳中的化学成分进行研究。方法:采用硅胶、凝胶等多种色谱方法对黑木耳中的化学成分进行分离和纯化,通过核磁共振色谱和质谱等方法对化合物结构进行鉴定,采用比浊法测定分离纯化后的黑木耳提取物抗血小板凝集活性。结果:从黑木耳的甲醇层提取物中得到3种化合物,通过结构鉴定,分别为尿苷(uridine)、α-D-吡喃葡萄糖(α-D-glucopyranose)、脑苷酯B(cerebroside B)。结论:尿苷、脑苷酯B为首次从黑木耳中分离得到。脑苷酯B对大鼠血小板凝集无抑制作用,尿苷(100μg/mL)对血小板凝集有抑制活性,抑制率为17.9%。     

2010年江苏省现榨果蔬汁中合成着色剂的快速测定与结果分析

目的:建立一种快速、灵敏、准确的HPLC法测定现榨果蔬汁中的合成着色剂,了解江苏省餐饮业现榨果蔬汁中合成着色剂的使用状况。方法:采用HPLC法测定。将样品离心、过滤,以甲醇+乙酸铵(0.02mol/L,pH=4.0)为流动相,梯度淋洗分离,定性、定量分析均采用多波长检测。结果:于260份果蔬汁中检出合成着色剂4种,分别为胭脂红、日落黄、柠檬黄、诱惑红。检出含有一种或多种合成着色剂样品23份,含量范围为0.4—2.2mg/kg,检出率8.85%。结论:该方法简单、准确、灵敏,适用于现榨果蔬汁中合成着色剂的定性、定量分析。     

蒲公英及其多糖提取物对小鼠免疫功能的调节研究

目的:了解蒲公英(TM)及其多糖提取物对免疫功能低下小鼠的影响。方法:经口灌服醋酸地塞米松(DEX)诱导小鼠免疫功能低下,7d后经口灌服蒲公英水煎液及其多糖提取物,采用蒲公英水煎液及其多糖提取物和黄芪精口服液对小鼠进行体液免疫功能测定。结果:蒲公英水煎液(4g/kg.d)及其多糖提取物(0.5g/kg.d)可增强巨噬细胞吞噬指数水平,提高小鼠抗体生成水平和巨噬细胞的吞噬率,即通过改善机体的免疫抑制状态,进而增强和调节机体免疫功能作用。结论:蒲公英水煎液及其多糖提取物有增强和上调免疫功能低下机体的作用。     

烟草抗PVYN突变株SN01的SRAP—PCR反应体系的建立与优化

采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素（dNTPs、Mg2＋、TaqDNA聚合酶、引物和DNA）进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是：dNTPs（2．5mmol／L）3．2μL、Mg2＋（25mmol／L）1．6μL、TaqDNA聚合酶（2．5u／μL）0．16μL、引物（10μmaol／L）0．6gL、DNA模板120ng。对该SRAP—PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明,最佳退火温度为57℃,循环次数为35次。该优化体系的建立,为进一步对烟草抗PVYN突变株SN01的抗病基因研究提供了可靠基础。     

南瓜多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂联素基因表达的影响

目的:探讨南瓜多糖对2型糖尿病(2-diabetes mellitus,2-DM)大鼠糖脂代谢和脂联素(adiponectin)基因表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C、D、E:南瓜多糖高、中、低剂量治疗组。8周后,测定空腹血糖(fasting bloodglucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、血脂和胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI);半定量RT-PCR检测adiponectin基因mRNA的表达水平。结果:南瓜多糖治疗组FBG、FINS、TG、LDL、VLDL、CH、IRI均低于模型组,而HDL的含量则高于模型组(P<0.05);adiponectinmRNA的表达高于模型组(P<0.05)。结论:南瓜多糖可上调adiponectin基因表达,降低胰岛素抵抗;降低2-DM大鼠血糖和改善其脂代谢紊乱。