花色苷递送系统研究进展

花色苷作为植物中常见的功能色素物质,具有广泛的生理功能。然而,花色苷在加工和贮存过程中稳定性较差,容易发生降解。许多研究报道递送系统可应用于提高花色苷稳定性,进而提高其在体内的生物利用度。本文介绍了花色苷在人体内消化吸收的过程,并综述了目前用于提高花色苷肠道稳定性的几种递送系统,包括蛋白质递送系统、多糖递送系统、脂质体递送系统、复乳体系递送系统以及复合递送系统,以期为功能因子在食物中的进一步开发和利用提供理论依据。     

广东省水生动物中的维氏气单胞菌和无乳链球菌的耐药性评估

为研究广东省水生动物中的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)对不同种类抗生素的药物敏感性,从广东省9个地区人工养殖的水生动物体内分离维氏气单胞菌及无乳链球菌。其中分离出32株维氏气单胞菌和16株无乳链球菌。利用药敏纸片法检测分离菌株对14种抗生素的药物感受性,发现两种病菌对其中的7种抗菌药物有明显的敏感性。利用最小抑菌浓度法检测分离菌株对7种敏感抗生素的耐药性,发现32株维氏气单胞菌对甲砜霉素(29%)部分耐药,盐酸土霉素(41%)和交沙霉素(38%)部分敏感,对盐酸环丙沙星(82%)、强力霉素(82%)、氟苯尼考(75%)和磺胺二甲嘧啶(100%)都敏感。16株链球菌对甲砜霉素(100%)全部耐药,对交沙霉素(25%)部分敏感,对盐酸环丙沙星(100%)、强力霉素(100%)、盐酸土霉素(100%)、氟苯尼考(100%)和磺胺二甲嘧啶(88%)都敏感。本论文的研究可以对今后抗生素在维氏气单胞菌与无乳链球菌的使用中提供一定的参考,促进抗生素的合理使用。     

猪流行性腹泻病毒冻干qLAMP检测体系的建立

为建立猪流行性腹泻病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV）实时荧光定量LAMP（Quantitative LAMP,qLAMP）与冻干技术结合的快速检测方法。该实验根据PEDV的高度保守序列设计了引物并进行筛选,建立PEDV的qLAMP检测方法。筛选棉子糖、甘露醇和牛血清蛋白作为冻干辅料并优化,将最佳的配方与等温扩增试剂（除甜菜碱）混合后进行冷冻干燥处理。优化主干燥升温方式和二次干燥时间,制作出一条适合等温扩增试剂的冻干曲线,并以此制备PEDV qLAMP冻干检测试剂盒。结果显示：通过对冻干成品性状、溶解性及剩余水分含量的测定,确定了主干燥后期采用一步升温的方式进行升温,解析干燥时间为3.5 h。PEDV qLAMP冻干检测体系的最低检测限为每微升157 copies,与工艺优化前相比,其检测速率得到提升。对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒等5种病原无扩增反应,重复性实验变异系数均小于5%,常温条件下保存30 d,在4 ℃条件下至少保存12个月。该研究通过使用冻干技术建立了LAMP检测方法,具有现场操作简便快捷、检测效果好、储存时间长,适用于基层现场快速检测。     

氨基酸同时消除甲醛和乙二醛的机理及消减产物的细胞毒性

探讨氨基酸同时消除甲醛和乙二醛的机理及消减产物的细胞毒性。将γ-氨基丁酸或L-丙氨酸与甲醛、乙二醛物质的量比5∶1∶1在95℃反应4 h,采用二硝基苯肼衍生法测定体系中残留的甲醛和乙二醛含量,发现甲醛促进γ-氨基丁酸消除乙二醛,乙二醛的消除率由不加甲醛的55.8%提高至70.6%;乙二醛促进L-丙氨酸消除甲醛,其消除率从不加乙二醛的2%提高至41.3%。经高分辨质谱及核磁共振表征,发现主要消减产物都为咪唑盐。其反应机理是一分子氨基酸先与一分子甲醛脱水形成Mannich碱,后者再与一分子氨基酸反应形成含两个亚氨基的中间产物,亚氨基通过亲核加成反应同时进攻乙二醛,脱水后形成咪唑盐。采用消减产物孵育人体正常胃上皮细胞,发现消减产物的形成明显降低了甲醛和乙二醛的毒性。在自制和市售的饼干和薯片中均发现了两种消减产物的存在,且当原料中氨基酸含量增加时,消减产物的含量也随之增加。结果表明,两种氨基酸在减控热加工食品中甲醛和乙二醛等有害醛类中具有一定应用潜力。     

广州某生猪养殖场大肠杆菌流行性及抗生素的耐药性

本研究采集广州某规模化养殖场腹泻仔猪、健康仔猪及环境样本共147份,据国标GB 4789.6-2016分离鉴定大肠杆菌,用K-B法分析分离株对12种抗生素的敏感性,并用PCR检测其对应的耐药基因。结果共检出大肠杆菌115株;分离菌株依次对复方新诺明,左氧氟沙星、加替沙星、环丙沙星呈高水平耐药,耐药率30%;对庆大霉素、头孢他啶、氨曲南也呈现一定水平耐药(20%~30%);对多粘菌素B、替加环素、亚胺培南耐药水平较低(15%),对美罗培南敏感;46.09%菌株呈现多重耐药(≥3种抗生素),且腹泻仔猪源菌株多重耐药率显著高于健康仔猪源及环境源菌(p0.05)。分离株耐药基因携带严重,其中ant(3')-Ⅰa、aac(3')-Ⅰb、sul1、aac(3)-Ⅱb,blaTEM、blaCTX、tet M基因检出率50%,因此,这可能是本研究菌株的主要耐药机制。研究结果表明该养殖场大肠杆菌污染严重,耐药水平高,有关部门需加强养殖中腹泻仔猪防治用药的监管与指导。     

3种添加物抑制模拟体系中羟甲基糠醛(HMF)的形成

根据羟甲基糠醛(HMF)形成途径,首先在由其不同反应前体物质构成的模拟反应体系中,研究了碳酸氢钠、碳酸氢铵、食盐、硫酸铝钾和硫酸铝铵对各体系中HMF形成的影响。结果表明:当碳酸氢钠和碳酸氢铵添加量为2.00mg/m L时,美拉德、果糖反应体系中HMF的生成量均显著下降,分别为5.01、3.02 mg/L和3.30、17.52 mg/L;在美拉德、葡萄糖、果糖和蔗糖反应体系中添加0.60 mg/mL硫酸铝钾时,体系中的HMF均明显增高,分别为80.53、13.02、265.02和310.11 mg/L,最大增幅为对照组的620.26倍;而硫酸铝铵处理组HMF的增幅可高达197.00倍。而后考察了5种添加物对饼干中HMF的影响,证实碳酸氢钠、碳酸氢铵和食盐显著降低了饼干中的HMF含量,最大降幅为35.34%。然而,即使在添加了食盐、碳酸氢钠和碳酸氢铵的情况下,硫酸铝钾和硫酸铝铵(0.10 g/80.00 g面粉)仍使饼干中HMF含量增加62.41%和55.64%。综上所述,碳酸氢钠、碳酸氢铵和食盐在模拟体系和饼干中显著减少HMF形成;硫酸铝钾和硫酸铝铵则大幅增加HMF生成量。结果进一步支持了国家限制含铝膨松剂使用的合理性。     

艾叶总三萜的提取工艺优化及其抑菌活性

本研究以湖北恩施艾叶为原料,考察溶剂种类、溶剂浓度、提取温度、液固比及超声时间对艾叶总三萜得率的影响。在单因素的基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,选取四因素三水平,以艾叶总三萜得率为响应值进行响应面分析,确定最优工艺参数,并运用倍比稀释法研究艾叶总三萜提取物对7种常见致病菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),分析了艾叶中三萜类物质的抑菌活性。实验结果表明,超声波辅助提取艾叶总三萜的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度72%,提取温度为73℃,液固比20:1 mL/g,超声时间42 min。此条件下艾叶总三萜实际得率为6.51%,其中超声时间、提取温度对艾叶总三萜得率影响较大。艾叶总三萜对所选7种致病菌均有较好的抑制作用,尤其是金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌,最小抑菌浓度为3.00mg/m L。本研究提供的提取方法操作简单、结果稳定,且提取物具有一定的抑菌性能,为艾叶总三萜的进一步开发提供科学依据。     

免疫磁分离技术在食源性致病菌快速检测中的研究进展

建立食源性致病菌快速高效的检测新方法和策略对控制食源性疾病的爆发至关重要。样品前处理是快速筛选病原体的关键步骤。常规食源性致病菌检测技术通常需要前增菌和选择性分离等预处理过程才能达到提高目标细菌浓度的目的,耗时长且灵敏度低。免疫磁分离技术（immunomagnetic separation,IMS）是一种能够在较短时间内从复杂食品样品中分离和浓缩目标病原菌的技术,已被应用于多种食源性致病菌的检测。本文综述了IMS在食源性致病菌检测中的应用,重点阐述了IMS作用原理、影响IMS效果的因素以及结合其他检测技术在食源性致病菌快速检测中的最新应用研究,以期为该技术更深层次的应用研究和我国食品安全快速检测技术的发展提供理论支持。     

模拟胃肠消化提高蛹虫草蛋白的体外抗氧化活性

探究模拟胃肠消化对蛹虫草蛋白质理化性质及抗氧化活性的影响。分别采用SDS-PAGE和酸水解法分析模拟胃肠消化前后的蛋白质分子量分布及氨基酸组成。通过体外化学评价方法,测定模拟胃肠消化前后蛹虫草蛋白质及其消化产物的抗氧化活性。构建H2O2诱导氧化损伤的PC12细胞模型,使用CCK-8试剂盒测定经蛹虫草蛋白质消化产物处理后细胞模型中的细胞活力。结果表明,经模拟胃肠消化后,蛋白质分子量的主要分布范围由10~120 ku变为8~15 ku;模拟胃肠消化前后DPPH自由基清除力的IC50值分别为1.55 mg/mL和1.06 mg/mL,Fe2+螯合力的IC50值分别为1.32 mg/mL和0.18 mg/mL,0.3 mg/mL样品的ORAC值分别为467.27±46.53μmol TE/g和948.80±24.02μmol TE/g;100μg/mL消化产物预保护H2O2损伤的PC12细胞后,细胞活力显著提高(p<0.05)。蛹虫草蛋白质模拟胃肠消化前后均具有较强的抗脂质过氧化能力及较低的Fe3+还原能力。蛹虫草蛋白质经模拟胃肠消化后产生了更多小分子量多肽,抗氧化活性显著提高,因此可对消化产物中的抗氧化肽进行进一步的研究和开发。     

猪胸膜肺炎放线杆菌微滴数字PCR定量检测方法的建立

为实现对猪胸膜肺炎的致病菌猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的量化研究,本实验根据猪胸膜肺炎放线杆菌特异性基因ApxⅣ的保守序列,设计引物探针,通过优化反应条件,建立可对其准确定量的微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度、稳定性以及适用性进行验证,与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法进行比较分析。结果表明:ddPCR最佳退火温度为52℃;线性相关系数(R~2)为0.9957,线性关系良好;灵敏度达153.8copies/μL,是qPCR的两倍;特异性良好,与其它常见猪病原无交叉反应。在实际样品检测中,110份样品的ddPCR与qPCR检测结果的Kappa系数为0.9529,说明两种检测方法结果高度一致,并且ddPCR可对qPCR无法判断阴阳性的可疑样本进行定量分析。本实验建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强、可用于猪胸膜肺炎放线杆菌的定量检测。