sisI替换genP在绛红小单孢菌G1008中的功能表达

将依纽小单孢菌3′,4′-双脱羟基基因sisI组合到绛红小单孢菌G1008中,替代其中的同工异源酶基因genP,研究sisI基因异源表达的内在特征.以温敏型质粒pKC1139作为克隆载体,构建sisI替换genP的重组质粒pIP303,利用接合转移技术,将穿梭质粒导入绛红小单孢菌G1008基因组,影印筛选并通过PCR(聚合酶链式反应)鉴定,获得一株基因重组工程菌GIP95.借助TLC(薄层色谱)、HPLC(高效液相色谱)和MS(质谱)检测代谢产物组分及结构变化,结果表明突变株GIP95的代谢流未被阻断,仍能够合成庆大霉素C族组分.由此得出结论,外源基因依纽小单孢菌3′,4′-双脱羟基基因sisI参与了庆大霉素生物合成中绛红糖胺3′,4′-双脱羟基这一关键步骤,在绛红小单孢菌G1008中实现异源表达.     

一种基于Petri网的代谢流分析方法

基于Petri网理论构建生物代谢网络模型,提出一种新的采用不等式的代谢流分析方法。以克鲁斯假丝酵母分批发酵,生产甘油的代谢网络为例,验证这种分析方法。结果表明,新分析方法,在前提假设和分析性能两方面均比采用方程式的传统方法明显优越。首先,方法允许实验数据有一定误差,使模型更加接近真实的实验系统。其次,新方法还可以做代谢模型更详细的分析:代谢流分裂比分析、敏感性分析。实际上,分析结果还可直接用于校正代谢物浓度、酶活力的边界值,为进一步研究代谢途径优化提供约束条件。     

LU分解和Laplace算法在GPU上的实现

随着图形处理器(GPU)性能的大幅度提升以及可编程性的发展,已经有许多算法成功地移植到GPU上.LU分解和Laplace算法是科学计算的核心,但计算量往往很大,由此提出了一种在GPU上加速计算的方法.使用Nvidia公司的统一计算设备架构(CUDA)编程模型实现这两个算法,通过对CPU与GPU进行任务划分,同时利用GP...     

解淀粉芽胞杆菌α-淀粉酶高活力突变体的创建与性质研究

为进一步提高解淀粉芽胞杆菌α-淀粉酶(Bacillus amyloliquefaciensα-amylase,BAA)发酵生产与应用性能,对BAA编码基因实施了体外随机突变,建立了含有2×10~4个转化子的BAA突变库。BAA编码基因的突变频率为56%,基因突变效率为2.8/kb DNA,错义突变26.8%;以平板筛选法和摇瓶发酵法对BAA突变库进行筛选,得到6个酶活力显著提高的突变体,其中突变体BAA28的酶活力提高最多,提高达37%;进一步分析突变体BAA28序列,发现其4个氨基酸残基发生突变,分别是:T341P、P348L、T356P和P362L,其中T341P和T356P位于无规卷曲结构中,P348L位于α-螺旋结构中,P362L位于β-折叠结构中。进一步制备与纯化BAA28,并比较分析其酶学特征,与野生型BAA相比,BAA28的离子依赖性、热稳定性发生了显著变化;BAA28的比酶活提高了约31%,κcat/Km值提高了92%。突变体BAA28较BAA在催化与应用属性上有了显著提升,可应用于后续中温α-淀粉酶高产新菌种的构建并可显著改善其工业应用性能。     

不同低温冻融循环对鱼糜品质与加工特性的影响

为研究不同低温条件下的冻融循环对鱼糜加工品质变化的影响.将制得的鱼糜样品定量分装成3组,分别置于4、?18、?35℃冰箱中,并模拟5次冻融循环.期间,分别进行各组冻融鱼糜的流变特性、凝胶特性、水分变化(低场核磁共振、冷冻损失率、解冻损失率、蒸煮损失率和持水性)、质构特性,并结合微观结构观察,以综合判定贮藏温度对鱼糜冻融...     

绿茶天然果胶的酶法提取及其组成、结构与性质

采用4种商业酶(3种纤维素酶S22178、FoodPro^R CBL、Viscozyme^R L和半纤维素酶)提取绿茶果胶,并探究其对果胶主要结构的影响,以及纯化果胶的成分、分子质量分布、粒径分布与果胶黏性的关系,以获得结构相对完整的天然果胶的提取方法。结果表明:4种酶均能高效提取果胶,提取率均能达到80%。S22178和Viscozyme^R L对果胶的HG主链结构有破坏,而半纤维素酶和FoodPro^R CBL对果胶的主链和侧链结构均没有显著影响。FoodPro^R CBL纯化样的黏度最大(η1=1 227 mPa·s),半纤维素酶纯化样的黏度较低(η1=154 mPa·s),Viscozyme^RL黏度基本为0。结论:经FoodPro^RCBL处理获得的果胶最接近天然果胶状态,提取纯化后的果胶含量为48%(HG主链43%,RG-I侧链5%),组分间颗粒大小相近,流变学性质较好,呈现典型的剪切稀化现象。     

石花菜醇提物成分分析

目的：研究石花菜的成分,为其功能食品的研发提供基础数据。方法：采用薄层色谱、液-质谱联用方法分析石花菜醇提物的化学成分的丰富度。通过硅胶柱、高效液相等色谱方法对其进行分离纯化,并用气-质谱联用、核磁结合文献确证化合物结构;并对部分化合物抗氧化活性进行测定。结果：薄层色谱、液-质谱联用分析表明石花菜醇提物中含有丰富的次级代谢产物,且很可能是甾醇类成分。采用气-质谱联用方法从中鉴定到29个化合物（5个为甾醇类化合物）,其中棕榈酸（46.76%）、棕榈酸乙酯（13.82%）、胆甾醇（7.20%）、胆甾-4,6-二烯（4.99%）为含量最高的4个化合物。经色谱分离、核磁鉴定出9个单体化合物,分别为胆甾醇（1）、1,2-二醇植烯（2）、帕格甾醇C(3)、6-羟基-胆甾-4-烯-3-酮（4）、胆甾-5-烯-7-酮（5）、胆甾-5-烯-3β,7α二醇（6）、胆甾-5-烯-3β,7β二醇（7）、胆甾-4-烯-6-酮（8）、3-羟乙基-2-甲基-马来酰亚胺（9）。其中,化合物7清除DPPH自由基和ABTS自由基能力最好,其IC50值分别为180μg/mL和12.2μg/mL。结论：首次系统研究了石花菜醇...     

Pd/C催化剂用于大豆油电化学氢化的研究初探

采用自制的质子转移膜式电化学氢化反应器,在低温(60℃)和常压条件下实施大豆油氢化反应,反应以稀甲酸盐溶液作为介质,以负载型贵金属钯/碳(Pd/C)作为催化剂,考察Pd/C催化剂量对氢化大豆油脂肪酸组成、碘值、反式脂肪酸、异构化指数和氢化反应选择性影响。结果表明:增加催化剂量有利于提高催化剂表面的氢浓度,提高氢化反应速率,并改变氢化反应选择性和同分异构化作用;结果还表明,Pd/C催化剂具有很好的稳定性,通过催化剂回收实验证明钯催化剂可重复使用5次,因而在工业化应用上仍具有竞争力。     

枇杷番茄混合果肉饮料的研制

以枇杷、番茄为原料,研发含60％果浆的混合果肉饮料,通过果汁护色,复合酶解、复含稳定剂筛选,原辅科学组合,经正交试验优化工艺参数,确定了产品生产工艺。     

低场NMR研究KGM的溶胀过程

目的:研究魔芋葡甘露聚糖(KGM)在去离子水中的溶胀过程。方法:采用低场NMR为主要手段,研究KGM在过量去离子水中的原位溶胀过程,考察不同加水量条件下,KGM对水分的吸收及其中水分状态的变化情况。结果:在原位溶胀过程中,自由水的横向弛豫时间保持不变,质子密度逐渐减小;KGM所吸收水的横向弛豫时间逐渐变大,质子密度不断增加;与KGM紧密结合的水在溶胀开始15min后其信号消失。向KGM中加入水,当加入的水量较少时,体系中主要存在KGM吸收的水和紧密结合水;当加入的水分过量时,体系中出现自由水。结论:在KGM溶胀过程中存在紧密结合水、KGM吸收的水和自由水3种状态的水。在溶胀过程中,这3种水的运动性发生了变化。