朝鲜辣白菜中抗扩展青霉乳酸菌的筛选与鉴定

该研究采用菌饼法从朝鲜辣白菜中筛选抗扩展青霉（Penicillium expansum）的乳酸菌,采用形态观察、生理生化试验及分子生物学技术进行菌种鉴定,并对乳酸菌抗扩展青霉的机理进行初步研究。结果表明,经过筛选和鉴定,获得1株对扩展青霉抑制效果最佳的清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）PC-3,抑菌率为68.62%。菌株PC-3无细胞上清液（CFS）的抗真菌活性随pH的升高呈现先升高后降低的趋势;随温度的升高逐渐下降。初步判定菌株PC-3 CFS中抗扩展青霉的有效成分是乳酸和乙酸,其对扩展青霉抑菌率分别为67.58%和66.73%。经扫描电镜观察发现,菌株PC-3 CFS抗扩展青霉的机制为破坏其细胞结构,导致胞内物质泄漏。     

碰撞池-电感耦合等离子体质谱法快速检测化妆品中重金属

目的建立碰撞池—电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定复杂基质化妆品中铬、镍、砷、镉、汞、铅等重金属含量的快速检测方法。方法样品经过微波消解处理,用ICP-MS进行分析,八级杆碰撞反应池结合屏蔽炬技术消除质谱干扰,在线加入内标元素72Ge、115In和209Bi校正基体干扰。结果各元素校正曲线的相关系数均大于0.9992,方法检出限为0.4~2.2 ng/g,相对标准偏差小于5.69%,加标回收率为85.8%~104.2%,有证标准参考物质的测定结果与标准值相符。结论该方法前处理步骤简便快速,适用于复杂基质化妆品中多种有害元素的快速准确测定。     

基于多孔碳球修饰硼掺杂金刚石电极的甲基对硫磷检测

目的研究甲基对硫磷检测的快速检测方法。方法 用多孔碳球材料修饰硼掺杂金刚石(BDD)电极,将乙酰胆碱酯酶(ACh E)固定在修饰电极表面制得酶传感器,用于甲基对硫磷的检测。对所制备的酶传感器进行电化学表征,对实验参数进行优化。结果 底物氯化乙酰胆碱的产物在ACh E/BDD电极和ACh E/多孔碳球/BDD电极上的氧化峰电流分别为0.4930μA和1.102μA,峰电流提高了123.53%。在ACh E/多孔碳球/BDD电极上,建立抑制率与甲基对硫磷浓度的负对数的对应关系,在浓度范围10-10~10-7g/L内呈良好的线性关系,线性方程为Y=-13.20297X+148.375,相关系数R2为0.9985。按抑制率为10%计算检出限为3.02×10-12g/L。对实际样品黄瓜汁进行检测,样品回收率为92.60%~102.00%。结论 此方法简单、快速、灵敏度高,适合用于实际样品中的甲基对硫磷残留分析。     

微波辅助溶剂法提取橡胶籽油工艺

为了优化微波辅助溶剂提取橡胶籽油的工艺,以橡胶籽为材料,采用微波辅助溶剂提取法,提取橡胶籽油,在单因素试验基础上,采用Box-Benhnken响应面法优化橡胶籽油的提取工艺,以提取温度、提取时间、液料比和微波功率为自变量,橡胶籽油的得率为因变量建立数学模型,并且同时对橡胶籽油的脂肪酸组成进行分析。结果显示:优化得到微波辅助提取橡胶籽油的工艺条件为——提取温度80℃,提取时间2 h,液料比(m L:g)7∶1,微波功率555W。在最佳工艺条件下,橡胶籽油得率为41.32%;共测出9种脂肪酸——肉豆蔻酸、花生酸、硬脂酸、棕榈酸、棕榈油酸、亚油酸、α-亚麻酸、油酸、二十碳烯酸。其含量分别为0.115 74%、0.244 23%、6.609 85%、9.645 46%、0.288 59%、40.911 7%、18.403 1%、23.632 4%、0.1489 2%。     

金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用

为建立检测金黄色葡萄球菌(SA)的PCR方法,以SA Sa442基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了SA的DPO-PCR快速检测方法。结果显示,在45~65℃退火温度范围内均能高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感,该方法的灵敏度为2.27×102cfu/m L,同时DPO引物特异性强,与其他菌株无非特异性扩增反应。利用该方法和行标法分别对采集的175份样品进行检测,均共计检出13份SA阳性样品,两者符合率为100%。作者建立的DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性,为快速准确检测SA提供新的检测手段。     

基于TaqMan探针双重荧光PCR检测食品中肠道沙门氏菌和肠炎沙门氏菌

建立基于TaqMan探针双重重实时荧光PCR检测肠道沙门氏菌(Salmonella enterica,SP)和肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法。根据SP的aceA基因(Gen Bank:U43344.1)、肠炎沙门氏菌特异序列SEP(GenBank:AF370707.1),分别设计引物和探针,在ace A探针的5′端标记FAM和SEP探针的5′端标记VIC,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR检测方法。试验结果,58株29种不同血清型肠道沙门氏菌均扩增出ace A基因扩增曲线,SEP特异性地扩增出15株SE,而28种不同血清型沙门氏菌和17株变形杆菌等阴性对照株扩增结果均为阴性。ace A和SEP的双重荧光PCR扩增效率分别为100%和104%,R2分别为0.999和0.998,最低检测浓度分别达到280 cfu/m L和260 cfu/m L。建立的方法特异性好、灵敏度高,整个试验可在31 h完成,是快速检测SP和SE的有效方法,可用于食品中SP和SE的特异性检测。     

基于双启动引物特异性检测单核细胞增生李斯特氏菌的PCR方法

以单核细胞增生李斯特氏菌iap基因为靶基因,利用一新型PCR引物设计方法--双启动引物(Dual-priming oligonucleotide,DPO),建立了特异性检测单核细胞增生李斯特氏菌的DPO-PCR方法,测试了DPO-PCR方法退火温度不敏感性、特异性及灵敏度,并在实践检测中进行了初步应用。结果显示:该方法检测单核细胞增生李斯特氏菌的灵敏度为1.51×102CFU/mL;退火温度不敏感性测试中,与常规PCR引物相比,DPO引物在48~68℃退火温度范围内均能够高效率地扩增靶基因;特异性测试中,DPO-PCR方法能特异地检测出目标菌,与其他菌株无非特异性扩增反应,比常规PCR方法显示出更强的特异性。实践应用证明,利用DPO-PCR方法对130份样本进行检测,共计检出9份单核细胞增生李斯特氏菌阳性样本,经国标法(GB/T 4789.30-2008)复检,两者检测结果一致,显示出良好的实用性,为单核细胞增生李斯特氏菌的快速准确检测提供了新方法。     

白菜中二硫代磷酸酯类有机磷农药降解动力学研究

培养8 叶期无菌白菜幼苗,添加5 种二硫代磷酸酯类有机磷农药（马拉硫磷、乐果、甲拌磷、乙拌磷及特丁硫磷）,用气相色谱及液相色谱-质谱联用法检测二硫代磷酸酯类农药及O,O-二甲基二硫代磷酸酯残留量。结果表明：二硫代磷酸酯类农药的含量在实验过程中呈减少的趋势,农药在样本培养过程被逐渐降解,10 d内降解水平为13.4%～65.0%,无菌苗添加药物组降解速率明显低于正常培养添加药物对照组。使用一级反应动力学模型对农药代谢动力学进行评价,无菌条件下马拉硫磷降解速率最快,降解速率常数为0.034 67,降解半衰期为19.9 d,特丁硫磷降解速率常数最小,降解速率常数为0.007 17,降解半衰期为96.7 d,乐果、甲拌磷及乙拌磷相对稳定,但降解动力学差别较大。     

季铵基改性亚麻织物服用性能的研究

用红外光谱图研究了亚麻季铵基改性的化学机理,X衍射图表明,改性后亚麻纤维的结晶度下降。与普通亚麻织物相比,改性亚麻织物的断裂伸长率、弹性回复率、柔软性、悬垂性较好,且随着改性程度增加呈增大趋势。但是改性亚麻织物的断裂强力随着改性程度增大呈下降趋势。改性亚麻织物的通透性比普通亚麻织物稍差。     

基于vvhA基因检测创伤弧菌实时荧光PCR方法的建立

为建立创伤弧菌(VV)的快速检测方法,根据vvhA基因序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果显示:所建立的方法能特异扩增出VV标准阳性菌株,而对其它14种菌株没有扩增;该方法的灵敏度为15CFU/mL;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测4次Ct值(循环阈值)的变异系数均小于2%;利用该检测方法对采集的156份样品进行检测,共计检出2份VV阳性样品,与行标法(SN/T 1870—2007)检测结果一致。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。