虫草素对脂多糖诱导巨噬细胞过度活化的抑制作用研究

目的:研究虫草素对脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞过度活化的抑制作用。方法:培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用LPS（1μg/m L）激活巨噬细胞,同时给予0.1¹0μmol/L的虫草素处理细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞存活率,Griess法检测细胞一氧化氮（NO）释放量,酶联免疫吸附分析实验（ELISA）分别检测三种细胞炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）的释放水平,采用Fluo-3/AM染色法以流式细胞仪测定胞浆游离钙离子浓度([Ca²⁺]i)的变化,采用水杨酸法考察虫草素对羟自由基（·OH）清除作用,L-酪氨酸法检测其对过氧亚硝酸根离子自由基（ONOO-）清除作用,邻苯三酚自氧化法检测其对超氧阴离子自由基（O₂^-·）清除作用。结果:虫草素在0.1¹0μmol/L浓度范围内可显著抑制LPS激活的RAW264.7巨噬细胞释放NO及3种炎症因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）,同时对细胞存活率无显著影响;虫草素（10μmol/L）可显著抑制LPS诱导的巨噬细胞内[Ca²⁺]i水平异常升高;此外,虫草素对·OH、ONOO-和O₂^-·自由基具有显著清除作用。结论:虫草素可抑制LPS激活的RAW264.7巨噬细胞释放NO及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6,这可能与其抑制了细胞内[Ca²⁺]i的增高及清除·OH、ONOO-和O₂^-·自由基有关。虫草素可能对巨噬细胞过度激活引起的炎症相关疾病具有一定的防治作用。      

清咽润喉双华李凉果的研制及功效评价

本文以双华李果胚为原料,采用响应面优化四种中草药（金银花、甘草、胖大海、薄荷）提取浓缩液的复配比,结合凉果传统加工工艺研发一种具有清咽润喉功效的双华李凉果,以脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞为模型,通过对炎症因子（TNF-α、IL-lβ、IL-6、PGE₂、NO）分泌的影响评价其清咽润喉效果。结果表明,四种中草药提取浓缩液的最佳复配浓度分别为:金银花56 mg/m L、甘草59 mg/m L、胖大海61 mg/m L、薄荷105 mg/m L。在炎症反应中,一定浓度的样品均能使炎症因子TNF-α、IL-lβ、IL-6、NO的分泌显著降低（p<0.05）,而对PGE₂的分泌没有显著性影响（p>0.05）;当浓度达到为50 mg/L时的抑制抑制作用最强,对TNF-α、IL-lβ、IL-6、NO的抑制率分别为54.42%、69.14%、38.50%、27.17%,说明研制的双华李凉果能够抑制炎症因子的分泌,具有清咽润喉功效。      

Toll样受体预活化的人脂肪间充质干细胞对人肺癌H460细胞生长的抑制作用

目的 观察聚肌胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,简称为Poly(I∶C)]和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预活化后的人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,bADMSCs)对人肺癌H460细胞生长的抑制作用.方法...     

植物甾醇对脂多糖诱导小鼠炎症的抑制作用

以预饲喂植物甾醇的小鼠为研究对象,采用脂多糖诱导小鼠产生炎症,研究不同剂量的植物甾醇对炎症发生的预防效果。结果表明：与脂多糖组相比,植物甾醇组小鼠血清中炎症因子白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）降低,肝脏和脾脏炎症病变损伤明显改善,植物甾醇组小鼠肝脏、脾脏中一氧化氮合酶（iNOS）的分泌显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）减少;在蛋白水平上,核转录因子κB（NF-κB）p65蛋白的表达及其磷酸化蛋白水平显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）降低;与脂多糖组相比,预饲喂植物甾醇的小鼠发生炎症后,其肝脏、脾脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）极显著升高（P<0.01）。据此推测负调控因子SHP-1表达上调后,抑制了NF-κB激活,进而降低iNOS表达水平,抑制下游炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的生成,起到了降低炎症对机体器官损害的作用。因此,植物甾醇在降低小鼠机体炎症方面有显著效果,在预防养殖动物感染方面具有重要意义。     

细菌内毒素的生物合成途径及分子结构多样性

细菌内毒素,又名脂多糖,是构成大多数革兰氏阴性细菌外膜外层的主要成分。内毒素的合成途径相当复杂,涉及到几十个基因编码的酶。内毒素的合成起始于细胞质中,随着合成的进行,内毒素分子不断变大,并先后穿越细胞内膜、周质空间和外膜,最后定位于细胞表层。内毒素可以通过TLR4/MD2受体激活先天性免疫系统,可用于开发新的细菌疫苗和疫苗佐剂。     

灵芝肽对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究灵芝肽(GLP)对卡介苗与脂多糖(BCG/LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用.方法:将小鼠随机分成正常组、模型组、GLP低、中、高剂量组,第1d,模型组与GLP剂量组均经尾静脉注射BCG致敏;每天灌胃一次,GLP组分别灌胃GLP 60、120、180mg/kg bw,正常组、模型组给予等量生理盐水,15d后模型组和GLP组经尾静脉注射LPS攻击,诱导小鼠肝损伤.通过脏器重量和体重计算肝、脾脏指数;用试剂盒的方法分别检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,肝组织中丙二醛(MDAl、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量及超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力;并进行肝组织病理学镜检.结果:GLP高剂量组的肝、脾指数与血清ALT、AST活性均极显著地低于模型组(p＜0.01),各种剂量的GLP均可显著地对抗BCG/LPS诱导的小鼠肝损伤所致的肝组织中MDA、NO含量的升高以及肝组织中SOD、GSH-Px活力与GSH含量的降低(p＜0.05～0.01);肝组织病理学形态逐步好转;尤其以180mg/kg bw给予GLP,防止肝损伤的效果最佳,趋近于正常组.结论:GLP对BCG/LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤有很好的保护作用.     

冷溶性琼脂多糖抗肿瘤作用的研究

以琼脂中的冷溶性琼脂多糖为研究对象,探讨其体内抗肿瘤作用及机理。10～15℃下水浸提琼脂中的多糖,并对其进行了组分分析。小鼠腋下接种H22肝癌细胞建立动物模型,以1000mg/kg·d灌胃给药。通过瘤重、抑瘤率、脏器指数、免疫器官切片HE染色、脾细胞增殖能力、NK细胞杀伤活性测定、吞噬细胞吞噬能力测定等研究其抗肿瘤作用和机理。测得其总糖含量为76.74%,抑瘤率为77.81%,小鼠免疫系统得到保护,增强了抗肿瘤作用。冷溶性琼脂多糖有显著的抗肿瘤作用,在保护免疫系统,提高免疫力方面有很好的作用。     

植物多糖及其提取方法

1 前言 多糖是自然界和生物体中广泛存在的物质,它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子。它具有多种生物活性,与生物机能的维持密切相关,与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖在细胞的识别、分泌以及在蛋白质的加工、转移方面起着不容忽视的作用。近年来,植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现,各种多糖所具有的抗肿瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相继被发现^[1,14,15]。我国对多糖的研究始于20世纪70年代,植物多糖由于它们独特的功能和低毒性,作为新药发展的方向具有广阔的应用前景,越来越多的研究人员将目光投向植物多糖。     

人参、甘草、五味子复合醋提物对老年小鼠急性炎性肝损伤保护作用的研究

目的:本研究旨在通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导肝损伤小鼠考察复合醋提物(MVE)对老年小鼠炎性肝损伤的保护效果.方法:将小鼠随机分为正常对照组、MVE组、LPS组、LPS+MVE组.通过苏木精-伊红染色评估肝组织病理情况和免疫组织化学染色判断髓过氧化物酶的表达变化.同时,检测肝组织中白介...     

抗性淀粉癸酸复合物通过肠道菌群对抑郁症小鼠的干预机制

采用抗性淀粉癸酸复合物（resistant starch-capric acid,RS-CA）实现癸酸在结肠的定点释放,研究癸酸对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）引起的小鼠抑郁症的改善作用。选取40 只雄性ICR 小鼠随机分成5 组（空白组、LPS组、LPS+RS 组、LPS+氟西汀组、LPS+RS-CA 组）。所有干预样品均以体积比2∶1 溶解在小鼠的饮水中。最后一次LPS 腹腔注射后,进行行为学实验;随后处死动物,眼球取血保留海马,用于生化指标检测;保留结肠和脑组织进行苏木精-伊红染色;收集粪便进行16S rRNA 检测。结果表明,经RS-CA 预处理的小鼠在悬尾实验和旷场实验中表现良好,同时降低了抑郁小鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,提高了海马5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）水平,表明RS-CA 对LPS 造成的结肠腺细胞杂乱排列以及海马神经元核浓缩和嗜酸变性具有改善作用。16S rRNA 结果表明,RS-CA 预处理逆转了与抑郁症相关菌群的失衡,包括Firmicutes/Bacteroidetes 比值降低,Prevotella、Parabacteroides、Klebsiella 和Acfinobacteria 恢复至正常水平;同时改善了肠道菌群的均匀性,使肠道微生物组成与正常组一致。以上结果表明,RS-CA 可以通过调节肠道菌群降低下丘脑-垂体-肾上腺素（hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA）轴炎症反应从而实现抗抑郁作用。