不同地区林蛙油无机元素及重金属元素含量特征分析

通过测定林蛙油中12种无机元素和重金属元素的含量,对其质量和食用安全进行评价.试验采用原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体质谱法对11个不同地区的林蛙油样品中Zn、Fe、Cu、Mn、As、Se、Pb、Cd、Hg、K、Na、Mg 12种元素进行了定量分析,并运用SAS统计分析软件进行元素及产地聚类分析.定量分析结果表明,林蛙油中含有丰富的无机元素,其中K、Na、Mg含量最高,达到了百分含量级别,为0.045%~1.48%;Fe、Mn、Zn、Cu含量次之,为7.4 mg/kg^59.5 mg/kg;Se含量为0.38 mg/kg^0.47 mg/kg;林蛙油中重金属Pb、Cd、Hg、As含量较低,均未超出标准GB/T 19507-2008《地理标志产品吉林长白山中国林蛙油》规定的限量值.聚类分析结果表明,林蛙油中各种元素含量存在较大差异,但含量相近或是相邻地区的能聚为一类.     

凝胶电泳分离-液相色谱-质谱法分析林蛙油及其伪品中的特异性蛋白

本研究应用凝胶电泳分离、蛋白酶酶解、纳升液相色谱分离、串联质谱检测、数据库检索等技术,建立了林蛙油及伪品青蛙输卵管、牛蛙卵巢、牛蛙输卵管和明太鱼输卵管中特异性蛋白的鉴定方法。根据定性肽段数量、肽段的响应高低,蛋白在电泳图谱中条带位置的特异性等因素综合判断,筛选出林蛙油及其相关伪品的特异性蛋白,通过对特异性蛋白的分析测定,判断样品的真伪。采用该方法对市场上的4种林蛙油产品进行检测,通过分析特异性蛋白,发现所检测的样品均为林蛙油伪品。研究结果表明,利用凝胶电泳分离液相色谱质谱法构建的特异性蛋白识别技术可以有效检测林蛙油产品的真伪。     

复方林蛙油辅酶Q10口服液制备工艺研究

目的：研究林蛙油的水解工艺和辅酶Q10的纳米化工艺,制备出质量稳定、口味适宜的复方林蛙油辅酶Q10保健口服液。方法：通过正交试验,确定胰蛋白酶和胃蛋白酶水解林蛙油的最佳工艺;采用纳米微乳制剂,增加辅酶Q10的水溶性。结果：将含量为1%的林蛙油经过溶胀、匀浆、煮沸等预处理,通过三因素三水平正交试验,得到了双酶法水解林蛙油的最佳工艺条件,即：以1∶20的酶与底物比加入胰蛋白酶,50℃、水解5h后,以1∶10的酶与底物比加入胃蛋白酶,60℃、p H=3.5,水解8h后,加入辅酶Q10的纳米化制剂,最终进行口味调配。结论：该双酶法水解工艺可最大限度地水解林蛙油组织蛋白,并提高林蛙油的溶解性。与辅酶Q10纳米乳剂调配后制备的口服液溶解性好、澄明度佳、口味适宜、工艺稳定,适合大规模生产。     

哈蟆油非水溶性成分及其酶解物的抗氧化功效研究

研究哈蟆油非水溶性成分及其酶解物的抗氧化作用。采用D-半乳糖法建立小鼠过氧化损伤模型。设立哈蟆油非水溶性成分及其酶解物高、中、低(0.30、0.15、0.075g/kg)3个剂量组和模型对照组、空白对照组,灌胃给药30d。观察过氧化损伤模型小鼠肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的变化。哈蟆油非水溶性成分可以显著降低肝组织中MDA含量,但对SOD、GSH-Px活力的升高无影响;哈蟆油非水溶性成分酶解物可显著降低丙二醛(MDA)含量,显著增加肝组织GSH-Px、SOD的活力。哈蟆油非水溶成分酶解物具有明显的抗氧化作用。     

林蛙油真空冷冻干燥工艺研究

以林蛙油为原料,采用真空冷冻干燥技术对林蛙油进行冷冻干燥。试验结果表明,在干燥室压力20Pa、物料的预冻速度为1.5℃/min,加热温度70～80℃时的条件下,冻干林蛙油复水率可达27.39%,蛋白质43.39%。     

林蛙油多肽粉的配方优化及冲调特性研究

目的改善林蛙油多肽粉的物理性质和冲调特性。方法对林蛙油酶解液复合调配后进行乳化工艺处理,采用冷冻干燥和喷雾干燥两种方法进行干燥制粉,以黏度、乳化活性、乳化稳定性、离心沉淀率为指标,确定了林蛙油酶解液制备林蛙油多肽粉的最优配方。结果林蛙油多肽粉的最优配方:β-环状糊精:麦芽糊精:乳清浓缩蛋白粉(WPC80)的添加比为1:4:5、单甘酯0.05%。研究结果表明,与酶解液直接冻干粉相比较,复配及乳化处理后冷冻干燥制得的林蛙油多肽粉水分含量下降23.72%,吸湿率下降56.10%,溶解度提升3.43%,分散时间缩短42.33%;与酶解液直接喷雾干燥粉相比,复配及乳化处理后喷雾干燥制得的林蛙油多肽粉水分含量下降25.72%,吸湿率下降46.15%,溶解度提升2.40%,分散时间缩短35.53%。结论复配后,制备的林蛙油多肽粉溶解度提高、吸湿性降低、冲调性改善。喷雾干燥制备的多肽粉品质特性优于冷冻干燥制备的多肽粉。     

影响林蛙卵油提取率工艺参数的研究

以林蛙卵为原料进行林蛙卵油提取的研究。对影响林蛙卵油提取率的因素,如提取溶剂的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行研究,并进行了正交试验。确定了获得最大提取率的条件。即:以石油醚(60~90)作提取剂;提取温度65℃;提取时间为5h;提取料液比为1∶10。并对提制的林蛙卵粗油进行精制,得到透明浅黄棕色。     

林蛙油的DNA提取及鉴定方法

目的建立基于分子生物学鉴定林蛙油真伪的检测方法。方法采集成年雌蛙卵巢组织,经风干制成林蛙油,通过改良方法提取总DNA,以已报道的东北林蛙、黑龙江林蛙、黑斑侧褶蛙、牛蛙和中华蟾蜍的COI及cytB基因为模板,设计引物探针。结果 PCR扩增产物测序结果中仅东北林蛙获得230 bp左右产物,且序列比对与东北林蛙COI序列一致性为99%左右,说明实验对象林蛙为东北林蛙。结论利用线粒体基因独特的优势,应用PCR扩增东北林蛙COI基因,通过测序确定东北林蛙亚种,建立了东北林蛙亚种及其产品的鉴别方法。