核电厂数字化仪表控制系统商品级物项适用性确认方法研究与应用

随着核电建设步伐的加大，国产化核电厂数字化仪表控制系统（DCS）面对着极大的市场需求，但是DCS中执行或影响安全功能所需的大量零部件难以寻找到满足法规要求的核级供应商，只能采用非核级供应商的基于一般工业要求的非核级设备即商品级物项。这些商品级物项根据法规要求，需要对其品质进行充分的控制和保证。参考当前国际经验，应用商品级物项适用性确认（CGD）是一个成功的方法。本文结合田湾核电站5&6号机组安全级DCS的设计与供货工作，对国内外相关标准及CGD过程和方法进行研究和探讨，摸索出一套适合国内CGD的工作体系和方法。相关方法已在田湾核电站5&6号机组中得到成功应用，对未来在国内乃至国际整个核电领域中商品级物项的正确应用具有一定的参考价值。      

木贼科植物的化学成分和药理活性及其在食品工业中的开发应用

综述木贼科植物的化学成分和药理活性作用,同时概述该科植物在食品工业中的开发应用进展,对进一步研究、开发木贼科植物资源有一定的参考意义。     

基于PC12细胞的西维因神经损伤作用机理研究

本文以PC12细胞为神经细胞模型,研究了西维因对神经细胞的损伤作用机理。当PC12细胞暴露于0.00μg/m L~200.00μg/m L不同浓度的西维因溶液时,表现出了一系列显著变化。随着西维因溶液浓度的增大,细胞的存活率从(100.00±0.46)%下降到了(27.86±1.69)%;细胞内乳酸脱氢酶(LDH)漏出率增多;丙二醛(MDA)含量从19.27±0.96 nmol/mg prot逐渐增加到112.39±1.59nmol/mg prot;超氧化物歧化酶(SOD)活力从4.08±0.87 U/mg prot增强到17.77±0.43 U/mg prot,同时其抑制率也从(19.00±1.66)%增加到了(73.00±1.71)%;同时谷胱甘肽(GSH)含量从96.15±6.10μmol/g prot逐渐减少到22.91±3.98μmol/g prot;细胞相对荧光强度(RFI)从37.38±11.48先增强到45.56±11.96,后因细胞严重损伤又减弱到17.11±1.50。细胞液内乙酰胆碱(ACh)含量也逐渐增加。同时,利用激光共聚焦扫描显微镜观察到了线粒体膜电位的显著下降。西维因对PC12细胞表现出很强的神经毒性。     

基于RSM酶法提高蛋清ACE抑制活性

研究胰蛋白酶提高蛋清ACE抑制活性的最优条件。在单因素实验(加酶量、pH、温度、底物浓度)的基础上,通过Design-Expert软件结合4因子3水平的Box-Behnken模型响应面设计,建立胰蛋白酶酶解蛋清制备ACE抑制肽的三元二次回归正交模型。结果表明:胰蛋白酶酶法提高蛋清ACE抑制活性的最佳参数为:加酶量8%、底物浓度3%、温度39℃、pH8.0,水解3h,蛋清ACE抑制活性为54%,活性提高近10倍。     

蛋清源活性肽抗氧化及抗炎活性

食源性抗氧化肽安全性高,抗氧化能力较好,近年来成为多肽研究领域的热点。本实验以蛋清源抗 氧化肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）,及其拆分肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN （Trp-Asn）、AD（Ala-Asp）为研究对象,首先采用2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）体外抗氧化评价方法,对5 条肽的抗氧化活性进行了评价,建立H2O2 诱导的人胚肾细胞（HEK293）氧化损伤模型,利用HEK293细胞模型评价5 条肽的抗氧化活性,然后检测抗氧化 肽WNWAD对细胞氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione,GSSG）含量的影响,最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒 检测了炎症因子人白细胞介素-8及人肿瘤坏死因子的含量。结果表明：活性肽浓度为40 μmol/L时,WNWAD清除 ABTS＋?能力最强,Trolox抗氧化当量（Trolox equivalent antioxidant capacity,TEAC）为（98.411±0.020）μmol TE/L, 其次为WN、WNW、WAD,其TEAC分别为（96.629±0.008）、（94.978±0.003）、（88.807±0.003）μmol TE/L, AD没有ABTS＋?清除能力。在H2O2浓度为400 μmol/L时,细胞相对存活率为（50.240±0.505）%,有高度显著性差 异（P＜0.001）,不同浓度的蛋清源活性肽对H2O2诱导的HEK293细胞氧化损伤均有保护作用,且随着各条肽浓度 升高保护作用呈增强趋势,其中WNWAD的保护作用最强,浓度为30 μmol/L时,细胞存活率已高达99.12%。并且 WNWAD可明显降低细胞中GSSG含量,降低炎症因子人白细胞介素-8和人肿瘤坏死因子的含量。以上研究结果显 示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平、提高细胞抗氧化能力、抗炎能力等有重要作用。     

基于组合色谱技术的蓝莓果实中花色苷元制备

首先采用液液萃取及大孔树脂层析技术研究花色苷的制备方法,萃取剂为乙酸乙脂,大孔树脂为Amberlite XAD-7HP,在此基础上制得花色苷粗提液。花色苷经酸水解、浓缩后,采用固相萃取技术（C18小柱）对花色苷元进行除酸、除糖处理,制得了纯度为70.2%的花色苷元混合物。最后采用半制备型高效液相色谱技术实现4 种主要花色苷元单体的分离,分别为飞燕草素（纯度98.2%）、矢车菊素（纯度96.3%）、牵牛花素（纯度92.6%）、锦葵色素（纯度90.5%）。本研究可为花色苷元的规模化制备及后期功能活性研究提供技术参考和依据。     

蛋清源抗氧化肽对HEK293细胞氧化应激损伤的抑制作用及机制

食源性抗氧化肽以其安全性高,抗氧化能力好,逐渐成为多肽研究领域的热点。本文以蛋清卵黏蛋白胃蛋白酶水解产物为原料,以蛋清源五肽作为研究对象,首先,采用基于不同机理的体外抗氧化活性化学测定方法,对8条蛋清源五肽的抗氧化活性进行评价。DPPH自由基清除活性最强的为五肽CFDVF,浓度为1.0 mmol/L时,其自由基清除率为50.14%±2.1%;ABTS+·自由基清除能力最强的为五肽VYQFL,浓度为100μmol/L时,TEAC值为(94.66±0.37)μmol/L TE/100μmol/L;ORAC活性最强的为五肽WNWAD,TEAC值为(2.53±0.18)μmol/L TE/μmol/L。接着,利用HEK293细胞氧化损伤模型评价8条五肽的抗氧化活性,其中五肽WNWAD(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp)的氧化应激抑制活性最强。同时,细胞毒性试验证明,五肽本身对细胞无毒副作用,也无促进增殖作用。最后,综合体外化学和细胞试验结果,筛选出WNWAD进行蛋清肽氧化应激抑制机制研究。首先采用试剂盒方法检测细胞内LDH活性和MDA含量,以及抗氧化酶CAT、T-SOD和GSH-PX的活性,结果表明H2O2可导致细胞LDH释放率上升,MDA含量增高,而WNWAD可以抑制脂质过氧化进程,维持细胞膜完整性,提高细胞内LDH活性,降低MDA含量;H2O2可以抑制细胞内抗氧化酶CAT、T-SOD和GSH-PX的活性,而经过WNWAD预处理,可以显著增强其活性;随着肽浓度的升高,3种酶的活性均有所提高,呈浓度依赖型关系,尤其在肽的浓度为1.0μmol/L时,过氧化氢酶(CAT)活力为(20.63±0.51) U/mg蛋白、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力为(179.39±5.73)U/mg蛋白,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)为(33.97±5.02)个活力单位,较对应损伤组的酶活性均有显著性提高(P0.01);最后,利用蛋白质免疫印迹技术检测细胞内抗氧化酶相关蛋白表达水平,结果表明:WNWAD预处理可在一定程度上恢复H2O2诱导损伤的HEK293细胞中抗氧化酶CAT、SOD和GSH-PX的蛋白表达水平。     

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞抗氧化酶活力及白细胞介素8分泌的影响

食源性抗氧化肽由于抗氧化能力较好、安全性高,逐渐成为多肽研究领域的热点。本实验以H2O2诱导HEK293细胞损伤建立氧化损伤模型,研究了蛋清源活性肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）及其结构改造肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN（Trp-Asn）对H2O2诱导损伤的HEK293细胞的存活率、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平、抗氧化酶活力及细胞因子白介素8（interleukin-8,IL-8）分泌的影响。结果表明：蛋清源活性肽对HEK293细胞存活率的影响极显著（P＜0.01）,不同浓度蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN作用于氧化损伤的HEK293细胞后,其存活率明显提高,呈现浓度依赖性;其中1.0 μmol/L蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN处理细胞后,存活率从损伤组的（48.0±2.4）%分别提高到（99.7±1.8）%、（69.4±3.2）%、（78.9±5.1）%、（72.1±3.6）%,与损伤组有极显著性差异（P＜0.01）;H2O2诱导HEK293细胞内ROS的产生,经过活性肽预处理后细胞内ROS的水平极显著降低（P＜0.01）;随着蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN浓度的升高,总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶3 种酶的活力均有所提高,呈现浓度依赖型关系。最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒测定了HEK293细胞中IL-8的分泌量,经过H2O2处理的HEK293细胞上清液中IL-8含量极显著升高（P＜0.01）,加入WNWAD、WNW、WN、WAD后,细胞中的IL-8含量均有所降低,其中WNWAD和WN影响显著（P＜0.05）。以上结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平和提高细胞抗氧化能力有积极的影响。     

基于Plackett-Buman和Box-Behnken设计筛选凝胶型蛋肠原料及配方

为获得具有良好物性和感官品质的蛋肠,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken响应面试验对影响蛋肠品质的原辅料种类及工艺参数进行筛选和优化,以感官评分为主要考察指标,凝胶强度为次要指标。首先用Plackett-Burman试验设计对影响蛋肠品质的4种原料、2种辅料、2种工艺参数分别评价,筛选出显著效应的3个因素:全蛋液与加水量之比、淀粉与加水量之比及蒸煮温度;利用最陡爬坡试验逼近最近影响区域范围;最后通过Box-Behnken响应面试验确定影响蛋肠品质的主要因素的最佳配方工艺参数:加水量100%,全蛋液添加量250.38%,淀粉添加量18.27%,蒸煮温度90℃。     

基于FTIR和RF方法探究超声波对SAP_(MW<1ku)结构的影响

为探究超声波提高大豆抗氧化肽活性机制,以分子质量1 ku的大豆抗氧化肽(SAP_(MW1ku))为研究对象,以2,2-二苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为衡量指标,通过单因素和响应面试验,优选超声波技术处理SAPMW1的最佳工艺参数。研究表明,超声功率320 W,超声时间24 min,工作间歇比3/3,超声波处理的SAPMW1的DPPH自由基清除率比未经超声波处理提高了13.08%。借助傅里叶变换红外光谱(FTIR)、荧光光谱(RF)、Zeta电位技术,分析超声波对其结构的影响。FTIR分析显示,经超声波处理的样品C=CH2、-CH3键发生改变;RF分析表明,超声处理样品与未超声处理样品相比发生红移及荧光强度改变,表明超声波处理的SAP_(MW1ku)蛋白结构发生改变;同时,在优化条件下超声波处理Zeta电位绝对值升高8.63 m V,推测经超声处理, SAP_(MW1ku)结构更加无序,官能团暴露,肽活性改变。本文为进一步探究超声波技术提高抗氧化肽活性机理提供理论基础。