脂肪酶抑制剂产生菌的筛选和鉴定

通过对不同地点采集样品,分离纯化得到的不同单菌落,再进行发酵培养,并以其产物是否对脂肪酶具有抑制活性作为筛选指标,从2013株野生菌中筛选到一株产脂肪酶抑制活性较高的菌株Sf16。对菌株Sf16的菌落、气生菌丝、孢子丝及孢子的形态特征和在不同碳源培养基上的生长表现的特征以及一些生理生化方面特性进行观察,并对菌株的DNA进行提取并扩增16SrDNA,通过对后者序列测定、数据库同源搜索和比对,进而构建菌株的系统进化树。通过形态学和分子生物学手段对产脂肪酶抑制剂菌株Sf16进行初步鉴定,结果确定其为Streptomyces sp.。     

浓香型大曲中可培养真菌的分离鉴定与系统发育学分析

采用传统微生物分离手段从浓香型大曲中分离纯化得到69株真菌。通过形态学观察、分子生物学鉴定以及系统发育学分析其分类地位。结果表明:采用ITS区序列进行真菌的分子鉴定可将大多数的真菌鉴定到属,部分真菌甚至能够鉴定到种;浓香型大曲内分离获得的真菌类群主要包括曲霉属(Aspergillus)、红曲霉属(Monascus)、根毛霉属(Rhizomucor)、横梗霉属(Lichtheimia)、青霉属(Penicillium)、拟青霉属(Paecilomyces)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、德巴利氏酵母属(Debaryomyces)、异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomala)、锁掷酵母(Sporidiobolus pararoseus)等目前已报道的大曲真菌类群,同时也发现了Merimbla ingelheimensis、踝节菌属(Talaromyces),尾孢菌属(Cercospora)、枝孢菌属(Cladosporium)、Acremonium impicatum、脉孢菌属(Neurospora)等霉菌类群在大曲中分布。其中曲霉属是优势种群,其菌株数目和种类最多,分别占43.48%和20.69%。本研究极大地丰富了对浓香型大曲中真菌种群的认识。     

传统豆腐干中主要腐败菌的分离及其系统发育

以腐败的豆腐干为材料,应用纯培养手段和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析,对豆腐干的腐败菌进行了分离及其系统发育鉴定研究。实验结果表明,获得的腐败菌DFG01为假单胞菌属,与恶臭假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的同源性为99.7%;另外,腐败菌DFG02为芽孢杆菌属,与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)高达99.5%。因此,传统豆腐干中腐败菌主要为恶臭假单胞菌和枯草芽孢杆菌,在豆腐干生产制作过程中要加强这两种菌的污染控制。     

一株聚丙烯酰胺降解菌株的分离培养及其系统发育分析

应用Hungate厌氧技术，从大庆油田聚合物配注站的母液罐中分离到一株水溶性超高分子量聚丙烯酰胺（HPAM）的降解菌株18，该菌株为短杆状，G^-，黑色圆形菌落，最适温度为38℃，最佳pH值为7．8，具有硫酸盐还原功能，产H2S气体，兼性厌氧．研究表明，该菌株能以HPAM为唯一碳源，降解侧链，部分官能团发生改变；浓度为600mg/L时，20d菌株生物降解率为63．17％，其溶液粘度下降效果显著．16S rDNA序列与Enterobacter cloacter cloacae础（ECL251469）的相似性为98％，通过形态、生理生化、G＋C含量以及16S rDNA序列鉴定，初步鉴定可能为肠杆菌属的一个新种，暂时命名为Enterobacter HPAM Degraded Bacteria I8，I8菌株的分离为HPAM的生物降解提供了新的微生物资源，图4,参14．     

小米发糕发酵剂中乳酸菌的筛选及其在小米发糕中的应用

以5种小米品种为研究对象,通过自然发酵法制备小米发糕发酵剂,测定菌落总数、感官评定发糕品质,获得品质差异较大的2种发酵剂,并对其中的乳酸菌进行分离、纯化,通过形态学、生理生化和测序进行鉴定。且研究了乳酸菌对小米发糕含水量、pH、TTA值、糖度和感官品质的影响。结果表明,乳酸菌的计数结果分别为6.48×10~7～8.57×10~9 cfu/g,1号(长农35)制备的小米发糕品质最好,6号(长谷4号)反之。2种发酵剂中鉴定出乳酸菌包括食窦魏斯氏菌(11株)、魏斯氏菌属(18株)和柠檬明串珠菌(4株),其中优势菌为魏斯氏菌属。乳酸菌LA6-40发酵制备的小米发糕含水量39.74%、pH 6.20、TTA值5.3、还原糖含量2.27 g/100 g,感官评分77.1分,色泽金黄、口感细腻、酸甜适中、咬劲适度、弹性良好,是较为适合小米发糕制备的乳酸菌菌株。     

用18S rRNA序列探讨8种绿藻分子系统发育

测定了宽礁膜Monostroma latissimum、浒苔Enteromorpha prolifera、孔石莼Ulva pertusa的18S rRNA基因序列,并与肠浒苔E.intestinalis、穿孔石莼U.fenesrtata、石莼U.lactuca、礁膜M.nitidum和格氏礁膜Monostroma grevillei5种已知的大型海洋绿藻的同一基因序列合并进行比较,分析了核苷酸序列差异和碱基替换特点,并构建系统发生树。结果表明:浒苔与肠浒苔之间的Kimura双参数距离大于浒苔与石莼属3个物种之间的Kimura双参数距离;用UPGMA法和MP法构建的系统树基本一致,在构建的系统发生树中,浒苔与石莼属物种聚为一类,表现出与石莼属物种更近的亲缘关系。     

16SrRNA基因测序确定根瘤菌的系统发育

采用聚合酶链反应和ＤＮＡ测序技术分析了两个新根瘤菌群的代表菌株的部分１６ＳｒＲＮＡ基因序列，并对所得序列进行了聚类分析。在系统发育树状图中，菌株ｓｈ２２６２３所代表的根瘤菌群与菜豆根瘤菌、豌豆根瘤菌及发根土壤杆菌等构成一个亚群，另一个菌群的代表菌株ｓｈ１９３１２与土壤杆菌的３个种构成一亚群。这些结果初步确定了两菌群的系统发育地位，并提示了根瘤与土壤杆菌两属间进化上的密切关系。     

一株产抗菌活性物质解淀粉芽孢杆菌的筛选及鉴定

从菜园土壤中分离筛选到1 株产广谱抗菌活性物质的菌株K6,其抗菌活性物质对藤黄微球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、酿酒酵母、匍枝根霉和白色念珠菌均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,对霉菌的抑制作用相对较弱。通过形态特征、16SrDNA 序列分析和系统发育分析,菌株K6 与B. amyloliquefaciens 位于同一簇群,同源性达99%,将其初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌。     

下向流曝气生物滤池工艺处理藻浆压滤液特性及微生物种属分析

对从太湖打捞的蓝藻进行离心脱水后获得藻浆压滤液，其中含有大量藻类细胞液，N、P以及微囊藻毒素(MCLR)含量较高，如不经处理直接排放，必将引起二次污染。采用下向流曝气生物滤池（BAF）工艺处理藻浆压滤液，考察了对COD、氨氮、TN、TP、MCLR等污染物的去除效果。结果表明，当水力负荷为0.40 m 3/(m 2·h)时，出水COD、氨氮、TN、TP、MCLR平均去除率分别为73.4%、91.6%、39.6%、13.2%和88.3%。出水COD、氨氮达到《城镇污水处理厂污染物排放标准(GB 18918-2002)》中的一级A标准，MCLR低于《生活饮用水卫生标准(GB 5749-2006)》的限值。对BAF系统中微生物种属进行分析，通过构建系统发育树确定其优势菌种分别为赖氨酸杆菌、气单胞菌、芽孢杆菌、不动杆菌、无色菌、梭状杆菌和假单胞菌，启动期投加的藻毒素降解菌T1在BAF系统中生长良好并形成优势菌种。     

传统农家大酱中耐盐性乳酸菌的分离与鉴定

农家大酱作为东北地区传统的发酵性食品,在其发酵过程中,乳酸菌是影响农家大酱香气、滋味、色泽等的重要微生物。所以传统的农家大酱中,乳酸菌资源较为丰富。该实验旨在从农家大酱中筛选出耐盐性优良的乳酸菌菌株,有助于缩短大酱的生产周期、提高食品安全性和稳定产品质量,为构建东北地区乳酸菌菌种资源库做出贡献。实验中从传统农家大酱中筛选出耐盐性优良的乳酸菌菌株5株,当Na Cl浓度增加到12%时,菌株SY4-2、DL3-1、DL4-5、FS1-11、FS5-5的OD600值在0.097⁰.137之间。对菌株提取DNA,经PCR扩增后,测其16S r DNA序列,并与基因库中基因序列进行同源性比较,经鉴定2株为屎肠球菌,3株为植物乳杆菌。