乙二胺四乙酸对SLC30A溶质转运家族部分成员影响的研究进展

乙二胺四乙酸(EDTA)是一种能与Mg~(2+)、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Fe~(2+)等二价金属离子结合的螯合剂。由于多数核酸酶类和有些蛋白酶类的作用需要Mg~(2+),故常用做核酸酶、蛋白酶的抑制剂;也可用于去除重金属离子对酶的抑制作用。锌作为一种微量营养元素,参与到多种结构蛋白和功能酶的合成与分泌中,是保持良好的内环境所必需的矿物质。锌转运蛋白(Zn T)负责将锌保持在不引起毒性的可控浓度范围内。Zn Ts在细胞膜到细胞器均有表达,其主要的作用是将锌从胞浆运送到细胞外和转运到细胞器或囊泡中。多数锌转运蛋白在细胞中的表达水平取决于锌的浓度和不同的生理环境,病理条件下Zn Ts的表达变化可以在一定程度上揭示疾病发展中的内在机制。这篇文章的目的是提供有关于当EDTA作为锌离子拮抗剂作用时与Zn Ts锌转运蛋白和健康问题间联系的信息。     

嗜水气单胞菌RecA和Gap-2作为内参蛋白的评价

为确定嗜水气单胞菌中可用于Western Blot的适宜内参蛋白,考察了重组酶RecA和3-磷酸甘油醛脱氢酶Gap-2在该菌不同培养阶段及培养条件下的表达稳定性.以嗜水气单胞菌基因组为模板扩增recA和gap-2基因,并对蛋白进行异源表达.利用亲和层析和凝胶过滤层析技术纯化蛋白,制备多克隆抗体.通过Western Blot技术研究了RecA和Gap-2蛋白在嗜水气单胞菌不同培养时间、不同培养温度和培养环境中铁离子浓度差异条件下的表达情况.结果显示,重组表达载体pET-28a-recA和pET-28a-gap-2构建成功,可与His标签融合表达.纯化后得到了纯度较高的RecA和Gap-2,以二者为抗原制备的多克隆抗体效价均达到1:512000.Western Blot结果表明,RecA在细菌生长稳定期表达情况与前期有所差异,而Gap-2蛋白在该菌不同培养时期、温度及铁离子浓度差异的环境中表达较为恒定.研究表明,Gap-2更适合作为嗜水气单胞菌Western Blot检测用内参蛋白.     

缓香型玉米醇溶蛋白微胶囊乳液的制备及应用

为改善皮革的特殊气味并提升其应用性能,该研究以玉米醇溶蛋白（Zein）、艾叶香精（AAE）以及普兰尼克F127等为原料,通过反溶剂法制备缓香型玉米醇溶蛋白微胶囊（AAE@ZMs）乳液,再将AAE@ZMs乳液与成膜剂己内酰胺改性酪素复配后应用于皮革涂饰。结果表明,Zein与F127、AAE和戊二醛通过化学交联和氢键相互作用,同时F127和AAE可使Zein中的氨基酸重排并发生荧光猝灭;制得的AAE@ZMs乳液中微胶囊平均粒径约为298.6 nm且具有较好的分散性和稳定性;AAE@ZMs的包覆率和负载率分别可以达到73.2%和5.8%,在良溶剂中释放120 h时的AAE累积释放率约为83.1%。将AAE@ZMs应用于皮革涂饰后,涂饰革样中AAE的释放周期为6周,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有较好的抑制效果,同时涂饰革样还展现出较好的机械性能。     

负载活性组分的核壳结构纤维膜的制备及性能

采用同轴静电纺丝技术将蛛丝蛋白（Ss）和美洲大蠊提取物（PAE）分别负载于纳米纤维的壳层与核层。随着Ss的增加,纤维直径从350 nm降至280 nm,核层直径由120nm升至140 nm,壳层厚度由115 nm降至70 nm。Ss的加入使纳米纤维膜具有良好的机械性能和亲水性,纳米纤维膜的拉伸强度可达到4.31 MPa,溶胀率可达到150%,水蒸气透过率可达到1834 g/(m2?24h),水接触角减小到 32.7 ?。纳米纤维膜核壳结构能够有效抑制药物突释,实现药物长效释放,7天内药物释放可达77%;纳米纤维膜能够有效抑制细菌生长,促进细胞增殖,相较于未负载Ss的纳米纤维膜,负载20%Ss的纤维膜的细胞增殖效果提高25%,说明Ss和PAE在伤口愈合过程中能够起到协同作用。     

单细胞蛋白(SCP)的应用与发展前景

主要就单细胞蛋白(SCP)的特征及营养评价,单细胞蛋白的6个生产种类(烷烃SCP、天然气SCP、甲醇SCP、乙醇sCP、菌蛋白、纤维素蛋白)进行较为详细的论述,最后指出单细胞蛋白的大规模应用主要取决于技术的进步、原料价格的下降,以降低产品成本,使其产品价格与其它如大豆、鱼粉等蛋白质相比能有较强的竞争优势。     

重组人白细胞介素-4融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达的影响因素

目的　提高人重组白细胞介素 4 (rhIL 4 )在大肠杆菌中的表达量。方法　研究rhIL 4的体外诱导条件 ,包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度、菌体密度对表达量的影响。结果　最佳表达条件是诱导时间为 4h ,诱导温度为 4 2℃ ,A6 0 0 为 0 7～ 1 0 ,而IPTG的浓度对表达量无显著影响。结论　诱导时间、诱导温度和菌体密度的优化能提高外源基因在大肠杆菌中的表达产量。     

妊娠相关血浆蛋白A的分离及纯化

采用人胎盘血为原料,利用Sephadex G-200,DEAE-Sephadex A-50层析,Sepharose 4B反相免疫亲和层析技术,获得妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)纯品,经8.0％聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳、双向免疫扩散证明,所提取的PAPP-A纯品为单一成分。免疫家兔获得抗血清,其效价在1:16以上。     

链霉亲和素-蛋白A融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达

将合链霉亲和亲-蛋白A（Streptavidin－proteinA）融合蛋白基因的表达质粒pTSAPA导入大肠杆菌BL21（DE3），成功地表达了该融合蛋白，经SIJS－PAGE及免疫印迹等方法证实该蛋白既具有IgG的结合活性，又具生物素结合活性。     

重组B7-H1IgV融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

目的以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性。结果所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H1IgV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清。经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞。结论rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用。