麦谷蛋白源外啡肽研究进展

食物来源生物活性肽的研究受到了广泛的重视。选择适当的蛋白酶 ,水解麦谷蛋白 ,经分离纯化可以得到大量的外啡肽。文中综述了麦谷蛋白源外啡肽的分离与纯化、阿片活性评定及其生理功能。根据麦谷蛋白资源丰富、成本低 ,安全性好的特点 ,建议选择与胃蛋白酶和胰弹性蛋白酶酶学性质相近的微生物蛋白酶 ,工业化生产麦谷蛋白源外啡肽     

核桃蛋白源血管紧张素转化酶抑制剂的分离纯化

从核桃蛋白源的胃蛋白酶水解物中分离纯化出具有高体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的抑制剂。利用超滤、凝胶色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,以体外ACE抑制活性为检测指标,并用N端氨基酸测序鉴定其结构为酪氨酸-谷氨酸-脯氨酸(Tyr-Glu-Pro,YEP),对筛选出的抑制剂进行体外模拟消化稳定性研究。结果表明,胃蛋白酶酶解液通过纯化所得ACE抑制剂的IC50值为0.32μg/mL,该ACE抑制剂在经过体外模拟消化后仍保持良好的ACE抑制活性。     

鳕鱼皮活性胶原的提取及酶解动力学研究

采用低温酸酶结合法提取鳕鱼鱼皮胶原,通过考察不同提取条件,优化了鳕鱼皮胶原的提取工艺,并对所提胶原进行特性分析。以经典的米氏方程理论为基础,研究胃蛋白酶酶促水解鳕鱼皮制备胶原的酶解反应特性,通过鳕鱼皮的酶解曲线,建立数学方程,表征胶原提取过程的水解动力学行为。结果表明:鳕鱼皮胶原提取的最佳工艺条件为:胃蛋白酶添加量为1.0%,料液比为1∶40,处理时间为24h,酸介质为柠檬酸,其浓度为0.20mol/L。在此条件下胶原提取率达到48.67%。胃蛋白酶水解鳕鱼皮制备胶原的动力学模型为:-rs=(2.9004E-3[S])/([S]+0.2156),其中米氏常数Km=0.2156。     

Purification of a novel pepsin inhibitor from Coriolus versicolor and its biochemical properties

A novel pepsin inhibitor was isolated from Coriolus versicolor. The purification was carried out by a 2-step ultrafiltration followed by DEAE-52 and Mono Q ion-exchange chromatography. SDS-PAGE and gel filtration chromatography analysis showed that the isolated inhibitor was a 22.3 kDa protein with a single subunit. Heat stability of this inhibitor was estimated and only 7% of its inhibitory activity lost after treatment at 98 °C. The inhibitor was more specific against pepsin than several other proteases. The dissociation constant (K(i)) and concentration required for 50% pepsin inhibition (IC50) were 5.84 × 10(-5) M and 26.26 μg/mL, respectively. Apparent decrease of α-helix and increase of random coil were observed in the circular dichroism spectra of pepsin when an equimolar amount of the inhibitor was added. The inhibition mechanism of this inhibitor differs from the reported aspartic protease inhibitors, according to the secondary structure and the kinetic studies of this inhibitor.     

采用生物酶法去除山羊绒肤皮屑

尝试采用生物酶法去除山羊绒染色中多年未根本解决的羊绒肤皮点问题。分别选用角质酶、胃蛋白酶和蛋白酶三种生物酶处理了山羊绒肤皮屑,考核去屑效果,研究各生物酶处理的工艺条件,同时考察了处理前后山羊绒损伤情况．结果表明,T.fusca角质酶去除山羊绒肤皮屑工艺条件为：角质酶用量8mL/g,pH=8.0,60℃,5h,浴比1：50,肤皮屑去除率29%．胃蛋白酶去除山羊绒肤皮屑工艺条件为：胃蛋白酶用量6%（o.w.f）,pH=2.2,4℃,6h,浴比1:50,肤皮屑去除率17%．蛋白酶Savinase 16L去除山羊绒肤皮屑工艺条件为：蛋白酶用量1mL/g,pH=8.5,45℃,4h,浴比1:50,肤皮屑去除率46%．在上述工艺条件下,角质酶和胃蛋白酶处理对羊绒有轻微的损伤,可以作为一种新的去除羊绒肤皮点的方法,蛋白酶对羊绒的损伤较严重,不能采用．生物酶法能部分去除山羊绒肤皮屑,有必要进行进一步的研究。     

酶法预处理硫酸软骨素原料除杂工艺优化

选用胃蛋白酶处理牛鼻软骨,研究酶法预处理硫酸软骨素原料的除杂工艺。通过单因素和正交试验对酶解工艺进行优化,确定的最佳条件：酶解时间8h、酶解温度35℃、加酶量0.2%、pH2.5和料液比1:5(g/mL),在此条件下软骨得率、硫酸软骨素得率和蛋白质去除率,分别达到85.12%、28.98%和10.3%。     

酶法制备乳铁蛋白抗菌肽的工艺

乳铁蛋白具有抗菌活性,胃蛋白酶酶解乳铁蛋白时得到的乳铁蛋白多肽的抗菌活性远高于其自身。通过响应面回归分析,得到了胃蛋白酶酶解乳铁蛋白的优化条件为:底物浓度30 mg/mL、水解时间2 h、温度45℃、加酶量1%(w/w)、pH 2.5。在优化酶解条件下,水解度约为11%,抑菌率为98.8%。高效液相排阻色谱分析表明,多肽的分子质量主要分布在200～6 000 u。     

米糠酸败对米糠蛋白体外胃蛋白酶消化产物结构特征的影响

将新鲜米糠贮藏不同时间后进行稳定化和脱脂制备米糠蛋白,研究米糠酸败对米糠蛋白体外胃蛋白酶消化产物结构特征的影响。结果表明：随着米糠酸败程度增加,米糠清蛋白亚基、谷蛋白酸性亚基和球蛋白亚基完全被胃蛋白酶消化降解的时间先提前后延迟,而米糠谷蛋白碱性亚基和醇溶蛋白亚基表现为更难被胃蛋白酶消化;分子质量分布和粒径分布结果表明,米糠酸败过程中形成的米糠蛋白氧化聚集体会抑制米糠蛋白体外胃蛋白酶消化;此外,随着米糠酸败程度的增加,米糠蛋白体外胃蛋白酶消化产物内源荧光峰位的红移幅度先增大后减小,表面疏水性则逐渐下降。总之,米糠酸败导致的米糠蛋白氧化对米糠蛋白消化产物的共价交联状态、聚集行为和表面疏水性等结构特征产生了重要影响。     

响应面法优化鹅全骨硫酸软骨素的酶法提取工艺

采用麻阳鹅鹅全骨为原料,以硫酸软骨素（chondroitin sulfate,CS）的提取率为指标,对运用碱提、复合酶解、醇沉法提取CS的工艺进行研究,确定使用胃蛋白酶进行酶解后,通过单因素试验和响应面优化试验,应用Box-Behnken实验设计建立二次多项式数学模型,进行响应面分析,确定胃蛋白酶酶解提取CS的最佳工艺参数。结果表明：碱提、复合酶解、醇沉法胃蛋白酶酶解提取鹅全骨CS的最佳工艺为加酶量1.55 g/L、酶解时间6.4 h、酶解温度42 ℃、pH值3.09,在此条件下CS的提取率为12.13%;通过高效液相色谱测定可知,提取物为CS和盐酸氨基葡萄糖。