低温冷冻对CIK细胞诱导及活性影响的研究

目的 研究低温冷冻对CIK(cytokine-induced killer cells)细胞诱导及活性的影响,方法 用经过程序降温仪冷冻后的脐血单个核细胞定向诱导CIK细胞,其活性与用新鲜的脐血单个核细胞定向诱导生成的CIK细胞进行比较,并对冷冻过的经21d诱导生成的CIK细胞,与未冻存过的细胞进行活性比较。用乳酸脱氢酶(LDH)分析法分析细胞毒活性,用流式细胞分析仪分析CIK细胞的纯度。结果 冻存后的脐血单个核细胞诱导生成的CIK细胞在扩增能力、纯度和细胞毒性方面与新鲜细胞诱导生成的CIK细胞无明显差异;经过冻存的CIK细胞在纯度和细胞毒性方面与未冻存前也无明显差异。结论 对于CIK细胞的临床应用具有指导意义。     

表达GLP-1融合蛋白的重组大肠杆菌分批补料培养工艺优化

人胰高血糖素样肽-1(Glucagon Like Peptide-1,GLP-1)是一种有潜在应用价值的治疗糖尿病的药物。今以一株表达GLP-1融合蛋白的重组大肠杆菌为研究对象,在分批培养条件下,通过流加甘油并在诱导前0.5h添加氮源使菌体密度、融合蛋白表达水平、融合蛋白体积得率和融合蛋白细胞得率分别提高了138.0%、29.5%、216.9%和29.6%。在此基础上,进一步考察了甘油补加策略、氮源补料方式以及补氮液浓度等过程因素对菌体生长以及GLP-1融合蛋白表达的影响,发现氮源流加过程是提高融合蛋白表达水平的关键因素。进而通过对补料过程的优化,建立了高密度高表达的分批补料培养工艺,最终使菌体密度、融合蛋白表达水平、融合蛋白体积得率和融合蛋白细胞得率分别达到51.93g·L-1、34.6%、2.937g·L-1和0.057g·g-1cell,较分批培养分别提高了314.5%、100.0%、784.6%和111.1%。研究结果对GLP-1融合蛋白的产业化开发有一定的指导意义。     

重组大肠杆菌HT02高密度高表达HT-1融合蛋白发酵过程优化

发酵工艺放大是将实验室成果产业化的必要一环,随着发酵规模的扩大,工艺流程也会有相应的调整,导致微生物所处的生长环境以及生长代谢状态的改变,从而影响大体积发酵罐的发酵水平。本文以一株产HT-1融合蛋白的重组大肠杆菌HT02为研究对象,在200 L发酵罐中研究了分批补料培养时菌体生长与HT-1融合蛋白表达的特性,通过采用提前诱导、增加接种量的手段,解决了因增加二级种子培养工艺而导致的200 L发酵罐中HT-1融合蛋白表达水平下降的问题,最终使菌体密度、HT-1融合蛋白表达水平、融合蛋白细胞得率以及融合蛋白体积得率分别达到55.1 g·L^-1、27.4%、0.056 g·(g cell)^-1和3.103 g·L^-1,较工艺改进前发酵水平分别提高了9.8%、23.4%、14.3%和25.2%,实现了在200 L发酵罐中高密度高表达发酵,为HT-1工业化生产提供了指导。     

TD-LTE网络F频段系统间干扰的排查方法研究

TD-LTE网络是一个可以同频组网的全PS业务网络,网络干扰水平的大小直接影响承载各项业务的吞吐率高低以及网络整体的容量,进而影响到用户的实际体验和感知,因此TD-LTE网络的干扰排查工作显得尤为重要。文章在基于浙江移动相关经验总结的基础上,结合湖北移动现网实际情况,总结了TD-LTE网络干扰的主要因素与原因,针对最为复杂的系统间干扰进一步分析产生原因,并给出排查方法,对湖北移动TD-LTE建网以及后续网络质量提升工作在降低干扰方面有显著的指导和借鉴意义。     

体外培养环境对脐血CD34~+造血干/祖细胞基因表达的影响

目的研究体外培养环境对脐血CD34+造血干/祖细胞基因表达的影响。方法脐血单个核细胞(MNC)在静态和动态培养系统中培养7d后,收集CD34+造血干/祖细胞,利用SMART-PCR技术从少量RNA中扩增cDNA用于标记探针,与基因芯片杂交后分析培养前后以及不同培养模式下培养的CD34+造血干/祖细胞基因表达的差异。结果在所检测的588个基因中,45个基因在培养前后的CD34+造血干/祖细胞中差异表达,其中20个基因在培养后表达上调,25个基因表达下调。另外,12个基因在不同培养模式中差异表达,只有CCL2在动态培养中高表达,而其余11个基因均在静态培养中高表达。结论通过分析体外培养环境对CD34+造血干/祖细胞基因表达的影响,可以在分子水平上理解CD34+造血干/祖细胞对培养环境的生理响应。     

胸腔镜肺叶切除术术后早期肺功能变化

目的探讨完全电视胸腔镜(VATS)下肺叶切除术治疗早期肺癌对术后早期肺功能的影响。方法2012年1月至2013年5月期间,连续收集我院早期肺癌肺叶切除术患者138例,其中完全电视胸腔镜肺叶切除71例(VATS组),传统开胸肺叶切除67例(开胸组)。比较两组患者术前肺功能及术后第7天,术后30d肺功能。监测的肺功能指标包括第1秒用力呼气容积(FEV1)、最大自主通气量(MVV)及最大呼气流量(PEF)。结果两组患者均顺利完成手术。VATS组与开胸组两组患者术前肺功能指标FEV1,MVV及PEF差异均无统计学意义(P>0.05)。术后第7天VATS组与开胸组FEV1[(1.8±0.4)vs(1.64±0.38)L]、MVV[(72.1±15.3)vs(62.8±14)L/min]、PEF[(5.16±1.19)vs(4.82±1.26)L/s],差异有统计学意义(P<0.05)。术后第30天VATS组与开胸组FEV1[(1.91±0.39)vs(1.74±0.38)L]、MVV[(76.6±15.9)vs(66.9±12.7)L/min]、PEF[(5.32±1.23)vs(4.9±1.14)L/s],差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔镜肺叶切除术治疗早期肺癌安全可行,对肺功能影响小,提高了患者术后生活质量。     

考虑土体内部病害情况下顶管施工引起的路面沉降分析

结合某顶管穿越道路项目,采用三维数值方法分析理想情况下顶管施工对地表沉降影响的总体规律。结合地质雷达对施工影响范围内土体中可能存在的空洞、疏松等病害探测结果,建立考虑土体内部病害的三维数值模型,对比分析理想情况与考虑土体内部病害情况下顶管施工引起地表沉降规律的异同。结果表明:①理想土体情况下,顶管施工引起地表下沉量总体较小;②考虑土体内部病害后,无论施工过程中的沉降规律还是最终沉降量,都与理想情况下差异不大。测点沉降变化规律与数值分析结果表现出较好的一致性,表明数值分析结果具有一定的合理性。分析认为,如果顶管施工过程控制理想,对周围土体扰动较小,即使土体局部存在空洞、疏松等病害,施工引起的该区域地表沉降与不考虑病害情况下无显著不同。     

pH调控方式和温度对透明质酸发酵过程的影响

本文以一株产透明质酸(hyaluronic acid, HA)的兽疫链球菌为研究对象,在5.00 L发酵罐和250 mL摇瓶中考察了温度和pH对HA发酵过程中菌体生长、HA产量、HA分子量大小以及分布的影响。结果显示,当pH为7.00时适合菌体生长,而在产物合成阶段更高的pH条件8.00下HA比生成速率更高。据此,设计了分段和周期性改变发酵过程pH的调控模式,研究表明:分段pH调控方式与pH为7.00时相比HA浓度没有提高,但是pH在7.00和8.00之间进行的分段调节时分子量提高了10.60%,同时显著降低了多分散系数,另外在pH在7.00和8.00之间进行的分段调节的同时在33℃的培养温度下收获时HA分子量提高了18.70%,而为后续工业化生产分子量更为集中的HA,同时降低不同分子量HA分离成本提供了方向。