重组大肠杆菌表达17β-羟基类固醇脱氢酶全细胞催化合成宝丹酮的研究

宝丹酮作为一种重要的蛋白同化雄性激素类固醇，具有提升肌肉质量和耐力的功能。宝丹酮的传统合成方法是以1,4-雄烯二酮（ADD）为底物通过化学法合成，但过程复杂、污染严重。17β-羟基类固醇脱氢酶（17β-HSD）可催化甾体化合物C-17位点的氧化还原反应，实现ADD和宝丹酮的相互转化。本研究通过基因序列同源性分析，筛选到6种不同来源的17β-HSD基因并对其在大肠杆菌中进行异源表达。利用不同重组菌转化ADD合成宝丹酮，结果表明重组菌BL21/pET28a-HSDPy的ADD转化率最高，因此选择BL21/pET28a-HSDPy进行进一步研究。鉴定了重组菌的酶学性质并优化其全细胞转化条件。结果表明在生物量为36 g·L^-1、底物浓度为5.40 g·L^-1条件下，经过两次补料，获得了3.66 g·L^-1宝丹酮，比优化前提高了4.1倍。而且在生物转化过程中未检测到副产物。为生物合成宝丹酮提供了可能。     

新型嗜热耐碱脂肪酶的纯化表征及应用

将来源于解脂嗜热互营杆菌（Thermosyntropha lipolytica）的脂肪酶（TlLipA）基因tll1导入大肠杆菌BL21（DE3）中表达，通过热处理和镍柱亲和层析获得纯酶，并对其酶学性质进行研究。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）显示TlLipA分子量为53×10³，其最适反应温度为65℃，最适反应pH为8.0。在55~65℃范围内酶活较高且比较稳定；在pH^{7.0~11.0于室温保存1 h后，残留相对酶活仍达80%以上。1 mmol/L 金属离子Zn2+、Fe3+和试剂SDS，0.05%（质量分数）Tween 80，对酶活力具有强烈的抑制作用，残留相对酶活皆低于15%；1 mmol/L Mg2+、Mn2+对酶活力表现出轻微的激活作用。由底物专一性实验可得，该酶对辛酸对硝基苯酯（C8）和癸酸对硝基苯酯（C10）偏好明显。以棕榈酸对硝基苯酯（p-NPP）为底物，该酶动力学参数K_m值为0.23 mmol/L，V_max为33.50 mmol/(L·min)，k_cat为22.83 _S-1。以重组脂肪酶为催化剂在无溶剂体系中制备生物柴油，含水率20%，酶加量200 U/g油，醇油比为4∶1的条件下，在55℃催化大豆油反应48 h，收率可达91.75%。}     

pH与HRT对植物酸化油废水厌氧处理的影响

采用厌氧序批式反应器,研究初始pH与HRT对植物酸化油废水厌氧生物处理的影响。结果表明,植物酸化油废水在厌氧反应初始pH=5.0、5.5时,pH、硫化物含量、VFAs含量在1个周期的反应阶段内的波动较小,COD的去除率仅为15%～20%;而在初始pH=6.0、6.5、7.0、7.5、8.0时,pH、硫化物含量、VFAs含量波动较大,且COD去除率可达50%～60%。植物酸化油废水在完全混合式的厌氧反应中存在有机物降解停滞现象,这主要是由于含高含量长链脂肪酸和硫酸盐的厌氧反应中产酸过程和产甲烷过程中,随生物毒性产物的积累和微生物种间竞争的加剧而逐渐受到抑制。建立的初始pH-废水HRT-COD去除率多元非线性回归模型显著性高,根据此模型,在初始pH为7.5、废水HRT为84 h时有最大的COD去除率。     

静电纺丝法制备ZnO构建酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

电化学生物传感器在环境监测、生物与食品分析等领域应用广泛。本文采用静电纺丝法制备了氧化锌微纳米纤维材料，并负载酪氨酸酶（Tyr）构建了检测邻苯二酚的生物传感电极。利用X射线粉末衍射（XRD）、扫描电子显微镜（SEM）表征了氧化锌微纳米纤维的形貌结构，采用循环伏安法（CV）和计时电流法（IT）优化了检测邻苯二酚的工作条件。结果表明，制备的Tyr/ZnO/CS/GCE生物传感电极具有良好的电化学性能，在反应过程中为扩散控制，对邻苯二酚的检测在5～50μmol/L的浓度范围内具有较好的线性关系，最低检测限为1.9041μmol/L，灵敏度为376.31μA/(mmol·L·cm²)，氧化锌的加入可增强酪氨酸酶的稳定性，在尿素、多巴胺和葡萄糖3种电化学活性相近物质存在的情况下仍对邻苯二酚的检测有较好的选择性，且具有良好的循环稳定性。     

软质纤维状纳米材料研究取得突破

<正>近日,中科院青岛生物能源与过程研究所的仿生智能材料团队在软质纤维状纳米材料方面有了新的研究进展。该课题组利用一种独特的蛋白质自组装结构——淀粉样纳米纤丝合成了边长接近半毫米的二维单晶金片。这种二维金单晶表面积超过104平方微米,厚度超过100纳米。该二维金单晶所具有的超过纳米尺度的几何形貌,对进一步拓展金单晶的应用空间具有重要价值。此外,这种肉眼可见的二维材料也可应用于光学及电子纳米器件、纳米天线1、传感和成像等领域。另外,通过与聚氨酯复合,他们制备了一种独特的柔性导电薄膜,具有应变应力传感行为。     

巴斯夫创新领先供应生物基聚四氢呋喃1000

<正>巴斯夫创新领先供应生物基聚四氢呋喃1000(PolyTHF1000)。巴斯夫中间体部门可再生二元醇资深总监AndrejBrejc表示:"PolyTHF1000与石化基产品的质量相同。"另外他还补充说道:"通过拓展利用可再生原料制造的产品的应用范围,我们与合作伙伴能够进一步扩大这种创新技术的长期市场接受度。"巴斯夫是全球领先的聚四氢呋喃供应商。聚四氢呋喃主要用于生产弹性氨纶纤维,而这种纤维可用     

山东橙功肥业建设年产30万吨生物有机肥项目

<正>山东橙功肥业有限公司拟投资5763.68万元,计划新征土地120亩,在山东省日照市莒县招贤镇工业聚集区新建一条年产30万吨生物有机肥生产项目。项目的建设符合国家的产业政策,符合当地规划及当地经济发展的要求,工艺技术成熟可靠,原料来源充足,产品具有较强的市场竞争力。项目建成投产后,可带动相关产业、促进地方经济的发展,