卤醇脱卤酶催化合成(S)-2-溴-1-苯基乙醇的工艺优化

以新型卤醇脱卤酶AbHHDH为催化剂,催化拆分外消旋2-溴-1-苯基乙醇生成光学纯的(S)-2-溴-1-苯基乙醇,通过单因素实验探究了缓冲液pH值、缓冲液浓度、催化剂用量、底物浓度以及温度对催化合成反应的影响。结果表明,在NaH_2PO_4-Na_2HPO_4缓冲液pH值为8.0、NaH_2PO_4-Na_2HPO_4缓冲液浓度为200 mmol·L~(-1)、催化剂用量为37.5 g·L~(-1)、底物浓度为20 mmol·L~(-1)、温度为28℃的最优工艺条件下反应15 min,(S)-2-溴-1-苯基乙醇的ee值为100%,收率为35.11%。     

红色红曲菌组蛋白去乙酰化酶MrSir2的原核表达及活性分析

根据基因组序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)得到了红色红曲菌中组蛋白去乙酰化酶mrsir2基因的完整cDNA序列,其编码序列(coding sequence,CDS)为1539 bp,编码512个氨基酸,含有一个SIR2蛋白保守结构域。根据大肠杆菌的密码子的偏好性对mrsir2序列进行优化,优化后的序列与p ET-28b载体连接后转入宿主菌E.coli BL21中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。实验结果表明:在16℃条件下用终浓度为0.25 mM的IPTG诱导培养16 h后,目的蛋白Mr Sir2可溶性表达效果良好。Ni2+柱亲和层析纯化后的Mr Sir2重组蛋白在SDS-PAGE上显示为一条约75 ku大小的条带,蛋白定量浓度达1.97 mg/mL,经Western blot鉴定为目的蛋白,测定酶活为78.5(OD/min/mg),780μM的二氢香豆素(dihydrocoumarin,DHC)对Mr Sir2蛋白的酶活抑制率为47%。Mr Sir2蛋白的可溶性表达为全面了解其酶学特征提供了材料,也为体外分析蛋白相互作用奠定了基础。     

草甘膦残留致烟草药害症状及成因分析

[目的]草甘膦作为全球销量最大的农药品种,明确其导致烟草药害症状、引起药害的原因和剂量至关重要。[方法]通过室内盆栽试验和大田试验,结合农艺性状分析、残留量分析、药害部位激素含量分析等进行综合研究。[结果]草甘膦造成药害症状表现为顶部叶片丛生,叶片卷曲,出现白色点状药斑,底部叶片枯萎坏死,茎秆底部腐烂坏死,整个烟株黄化严重,烟株矮化,节距变短。草甘膦的施用剂量与药害存在明显的时间-剂量效应关系,即随着暴露时间的增加和施药剂量的增大,草甘膦残留对烟株生长发育抑制作用明显增加。产生药害烟叶内部生长素IAA、赤霉素GA_3含量显著低于对照组,脱落酸ABA含量明显升高。草甘膦在烟叶以及土壤中降解过程均符合一级动力学方程,在土壤中的降解半衰期为14.4 d。[结论]草甘膦的降解速度较快,半衰期短,产生药害时在土壤中的临界浓度为391μg a.i./kg,在烟叶中的临界浓度为328.4μg a.i./kg,推荐安全间隔期为86 d。     

酵母菌的致孔作用对PVA/CMC水凝胶性能的影响

利用酵母菌发泡制备了聚乙烯醇/羧甲基纤维素多孔水凝胶(D-PC)，采用FTIR对其化学结构进行了表征和Zeta电位分析共同证明了酵母菌和材料之间的相互作用；利用SEM和BET分别对其三维网络结构进行了观察以及比表面积、孔径进行了测定；研究了D-PC在不同条件下对亚甲基蓝(MB)的去除，通过纤维素降解酶实验测试了D-PC的降解性。研究结果表明：酵母菌通过静电作用包覆在D-PC内；随着酵母菌量的增加，D-PC的比表面积增大、平均孔径减小；D-PC对MB的去除机制以化学吸附为主，且吸附动力学符合伪二级动力学方程；去除效率随着酵母菌的增加而增大，随着pH、温度的增加先增大后减小；一定条件下D-PC能降解水凝胶中的聚乙烯醇。     

鲟鱼肝酶解条件优化及酶解液对双歧杆菌增殖效果的研究

为提高鲟鱼肝脏的加工附加值，使用碱性蛋白酶，以水解度为评价指标，在单因素试验的基础上，通过Plackett-Burman试验、响应面分析法优化鲟鱼肝蛋白酶解条件。在此条件下，进一步探究了酶解液对双歧杆菌的促生长效果。结果表明，最优酶解条件为碱性蛋白酶添加量10 540 U/g鱼肝蛋白、体系初始pH值10.0、酶解时间8.6 h、酶解温度45 ℃、料液比1∶10（g∶mL），此条件下水解度（81.7%）是优化前（40.4%）的1.02倍。鲟鱼肝蛋白酶解液对青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌和婴儿双歧杆菌6种均具有显著的促生长效果。研究结果为鲟鱼加工副产物利用提供了新途径，同时也为双歧杆菌促生长因子的研发提供新思路。     

酶解海蛇工艺探索

近几十年来,酶解法制备海洋活性肽一直是国内外研究的热点。本实验以海蛇干品为试验对象,采用胰蛋白酶对海蛇进行酶解,通过单因素试验及正交实验设计,对酶解海蛇的工艺进行探索,确定最佳酶解条件为:酶量3%,pH 6.0,温度40℃,酶解时间24h。     

缓冲溶液法制备高效的铁基类芬顿催化剂

负载型金属催化剂在水处理中起着重要的作用，浸渍法是制备负载型催化剂的重要方法。为了克服传统浸渍方法的缺点，本文通过使用甘氨酸/盐酸作为缓冲溶液，严格控制pH，获得高分散的活性组分并以此方法制备了铁基类芬顿催化剂。对苯酚催化降解的实验表明，使用缓冲溶液法制备的催化剂比未使用的样品可以更高效地去除苯酚，1h内对苯酚的降解可达89.3%。此外，通过调节浸渍温度、浸渍时间和缓冲溶液的pH等参数来精确控制活性组分的量和催化活性。更重要的是，此催化剂制备方法可以用于其他负载型金属催化剂的制备，比如过硫酸盐催化剂，并取得了良好的催化效果。     

漆酶催化木质素与硫酸铝结合鞣制工艺的研究

木质素是自然界中唯一能提供可再生芳香族化合物的生物质材料,由于其主要结构单元的活性较低,直接应用于皮革的鞣制工段不能取得理想的鞣制效果。本文以漆酶为催化剂,以1-羟基苯并三唑(HBT)为介体对木质素磺酸钠进行催化氧化得到漆酶/介体催化后的木质素磺酸钠(OL),对其相对分子质量进行分析,并将其与硫酸铝用于绵羊酸皮的结合鞣制工艺研究,对鞣前浴液的pH、OL和硫酸铝的用量以及鞣制顺序等工艺条件进行优化,最后考察了坯革相关的物理机械性能。结果表明,当鞣前浴液pH为6,OL和硫酸铝的用量分别为12%和5%,先OL鞣再硫酸铝鞣制所得成革的各项指标最佳。成革收缩温度(Ts)可以达到82.3℃,与未做任何处理的木质素结合硫酸铝鞣制的皮革相比,各项物理机械性能均得到了较大的提升。