短C肽人胰岛素原突变体的设计与其编码基因的套叠PCR合成

基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物，自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究，发现了一些或长效或速效或高活性的突变体，丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型，设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基（GPGA）的胰岛素突变体，期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性，设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明，所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异，但是氯基酸序列保持一致。     

农杆菌介导的浸花法（Floral—dip）存在的问题及对策

随着植物基因工程研究技术的不断深入,绝大多数具有重要经济意义的农作物品种的遗传转化方法都已建立。1998年Bechtold最早采用真空渗透法将农杆菌菌液转化拟南芥即将开花的植株,得到大量T—DNA插入突变植株,该法将早期植物花穗浸入含农杆菌菌液的液体培养基,真空处理后恢复常压,使农杆菌菌液渗入到植物组织内部从而达到遗传转化的目的。     

不同鸡蛋中鸡卵黄免疫球蛋白的比较

采用PEG分步沉淀法分别从京红一号鸡蛋、市售鸡蛋、土鸡蛋中制备鸡卵黄免疫球蛋白(IgY).通过SDS-PAGE分析提取物,发现存在2条主要的蛋白带:分别为66.4kDa和29.0kDa,与文献报道的IgY重链(～ 60kDa)和轻链(～ 30kDa)的分子量相符.     

拟南芥AtDPBF4基因的分子克隆

本研究采用RT-PCR法扩增拟南芥哥伦比亚型的AtDPBF4基因,克隆至pMD-T载体上,经蓝白班筛选获得阳性转化子(白斑),并测序.结果表明:AtDPBF4基因克隆序列与GenBank中Arabidopsis thaliana bZIP protein DPBF4 (AF334209.1)序列同源性100％.     

巴斯德毕赤酵母GS115基因组研究进展

毕赤酵母生物表达系统已成功地表达了多种重组外源活性蛋白,广泛地被应用于能源、医疗、科学研究等方面的研究.综述了2008年以来毕赤酵母GS115基因组研究,以期从分子水平解释转录调控、表达调控及翻译后修饰等机理,进而解决毕赤酵母发酵过程中产量低、过糖基化等瓶颈.     

黑曲霉ZM-8菌株菌丝体中葡萄糖氧化酶活力测定

以黑曲霉(Aspergillus niger ZM-8)真空冷冻干燥菌丝体为材料,经缓冲液提取得到葡萄糖氧化酶粗提液.粗提液经硫酸铵盐析、透析、真空冷冻干燥得到粗酶干粉.利用靛蓝胭脂红褪色分光光度法测定葡萄糖氧化酶活性.结果表明:粗酶干粉葡萄糖氧化酶比活力达到63.08U·mg-1.     

马铃薯渣酸水解工艺条件的研究

针对马铃薯渣中不溶性的碳水化合物,采用硫酸热水解法使其中的淀粉、纤维素、半纤维素等成分在以硫酸做催化剂的条件下水解成还原性糖。在酸浓度、酸固比、水解时间、水解温度四个单因素实验基础上,采用正交实验设计优化工艺条件。结果表明,在酸浓度为32％,酸固比为3：1,水解时间为1h,水解温度为90℃下,1g马铃薯渣经水解上清液中总还原糖重量最高N0．5213g。     

浅谈动态模拟器

叙述了动态模拟器产生的历史背景，介绍了动态模拟器的概念、组成和应用，并对使用动态模拟器的经济效益进行了初步分析和评估。     

浅谈动态轨道衡在钢铁企业的应用

本文结合动态轨道衡在安钢的应用情况。针对动态轨道衡计量过程中存在的问题，提出了相应的技术，管理措施，解决了动态轨道衡计量失准的难题。