磷脂酶A1催化水解大豆油制备甘油二酯研究（Ⅱ）——分子蒸馏纯化产品

大豆油经磷脂酶Al催化水解生成甘油二酯和脂肪酸.在不同的温度下,用分子蒸馏除去粗甘油二酯中的脂肪酸.研究结果表明,在135℃,真空度1 Pa,刮膜速率250 r/min下进行两次分子蒸馏,可以得到酸值(KOH)为0.77 mg/g,碘值(I)为138.20 g/100 g的甘油二酯产品.分子蒸馏得到的轻相与原料大豆油相比,碘值下降,饱和度提高.     

油腊羰基价对丙烯酰胺形成的影响

利用H2O2诱导花生油产生羰基化合物,采用油脂与L-天冬酰胺反应构建模拟实验体系,研究了油脂羰基价对丙烯酰胺形成的影响.结果表明,油脂的羰基价与丙烯酰胺的形成量具有显著相关性,相关系数R2=0.9625.     

提取溶剂对青稞提取物总酚、黄酮含量及其抗氧化活性的影响

以3种不同的青稞为原料,采用不同的提取溶剂(水、60%乙醇、60%甲醇、60%丙酮、95%乙醇、100%甲醇、100%丙酮)对青稞进行提取。对各提取物的总酚、总黄酮进行测定,同时采用3种抗氧化方法:二苯代苦味酰自由基(DPPH)、2,2’-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐自由基(ABTS)和总抗氧化能力(FARP)评价青稞提取物的抗氧化活性。结果表明,95%乙醇和60%丙酮更有利于青稞多酚的提取。藏青2000的各溶剂提取物的总酚、总黄酮及抗氧化活性普遍高于相应溶剂的循化蓝青稞和香格里拉绿青稞。藏青2000的60%丙酮提取物含有最高的总酚含量,达到211.92mg GAE/100g DW;在60%乙醇提取时具有最高的总黄酮含量,达到60.11mg RT/100g DW;在60%乙醇提取时具有最强的DPPH清除能力,达到80.08%;而用60%丙酮提取时,具有最强的ABTS清除能力和总抗氧化能力,分别达到了1.85,9.28 mmol TEAC/100g DW。总酚含量与抗氧化活性均具有显著的相关性,FRAP法与DPPH、ABTS法具有极显著的相关性。综上表明,青稞富含总酚成分,是一种潜在的天然抗氧化剂资源。     

蒜氨酸的热分解及其机理分析

为明确蒜氨酸在水溶液中的热稳定性,研究了蒜氨酸水溶液的热分解动力学过程,拟合得到动力学参数:活化能为80.5 kJ/mol,指前因子为1.27×10~7。采用气相色谱-质谱联用方法检测蒜氨酸水溶液在不同反应温度条件下的热分解产物,发现随着反应温度的升高,二烯丙基二硫醚的含量由91.59%持续降低至53.62%,而二烯丙基三硫醚的含量则先增加后减少,二烯丙基四硫醚的含量始终呈增加趋势,说明高温可促进硫醚类化合物的断裂和重排。采用质谱和2,4-二硝基苯肼法分析液相产物,证实产物中含有S-烯丙基-L-半胱氨酸钠盐和丙酮酸。采用B3LYP方法,在3-21+G(d,p)基组条件下,优化反应物与产物的结构,对蒜氨酸的分解过渡态进行理论计算,结合蒜氨酸的分解动力学以及热分解产物分析后初步推断出:蒜氨酸分解过程中会形成一个五元环的过渡中间体,而后发生Cope消除生成次硫酸与丙酮酸,次硫酸进一步反应,形成二烯丙基二硫醚与二烯丙基三硫醚等一系列产物。     

重金属Cd对大鼠睾丸间质瘤细胞R2C孕酮合成的影响

探讨了Cd对体外大鼠睾丸间质瘤细胞R2C合成孕酮通路的影响,用MTT(噻唑蓝)比色法检测CdSO_4对R2C细胞生长抑制率的影响,通过数据分析,确定CdSO_4作用于R2C细胞的IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)浓度值,用IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)3种浓度的CdSO_4溶液培养R2C细胞,再采用碘标放射免疫法、流式细胞分析仪、ROS检测试剂盒和Western Blot法测定IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)对孕酮合成、线粒体膜电位、ROS和孕酮合成相关蛋白St AR、CYP11A1的影响。结果表明,CdSO_4可以显著抑制R2C细胞的增殖,且CdSO_4作用于R2C细胞的IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)浓度值分别为(24.93±0.023 5)、(44.80±0.047 9)、(80.51±0.035 7)μmol/L;IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)3种浓度均能影响R2C孕酮合成;CdSO_4可以增加R2C细胞ROS的产生和线粒体膜电位的损伤比率;CdSO_4可以下调St AR、CYP11A1蛋白的表达,且对St AR蛋白的影响更为显著。重金属Cd可刺激R2C产生过量的ROS、下调St AR、CYP11A1蛋白的表达,进而影响线粒体的正常作用以及阻碍孕酮合成通路,最终影响孕酮的合成。     

羧甲基赖氨酸在方便面中含量及其对雄性生殖和胚胎发育毒性的研究

采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对市售20个品牌方便面中游离态和结合态羧甲基赖氨酸(CML)含量进行了定量分析,并以体外细胞培养评价了CML的雄性生殖毒性和胚胎发育毒性。市售方便面中,游离态CML质量分数为0.39~0.80 mg/kg,结合态CML质量分数为19.42~34.99 mg/kg。CML作用于睾丸间质细胞R2C细胞24 h,浓度在1 mmol/L以下对细胞存活率没有显著抑制作用,浓度在2 mmol/L以下对孕酮分泌量没有显著的抑制作用;CML作用于胚胎干(ES)细胞D3和成纤维细胞3T3 10 d,浓度在4 mmol/L以下对3T3细胞存活率没有显著影响,浓度在0.5 mmol/L以下对D3细胞存活率没有显著影响。根据市售方便面中的CML浓度评估CML的摄入量,常规食用方便面摄入的CML不会对这几种细胞的存活率和R2C细胞的孕酮分泌量产生显著抑制作用,可认为不会产生雄性生殖和胚胎发育毒性。     

植酸及几种酚酸对牛奶蛋白体外消化率的影响

研究植酸和几种酚类物质(阿魏酸、单宁、水杨酸、对- 羟基苯甲酸)在常温和灭菌条件下(121℃,20min)对牛奶蛋白体外消化率的影响。结果表明：植酸和4 种酚类物质均降低蛋白质消化率,降幅为5%～27%;反应后延长静置时间可进一步降低蛋白质消化率;增加胃蛋白酶浓度可使蛋白体外消化率提高1%～9%。     

低聚糖阿魏酸酯含量的快速测定方法

分别以麦麸、玉米芯、玉米麸皮为原料,采用酶法制备低聚糖阿魏酸酯,探讨其快速检测方法,并通过高效液相色谱法验证该法的准确性。结果表明,采用Amberlite 树脂分离纯化可除去样品中的低聚糖(不含结合态的阿魏酸)、双波长分光光度法(345nm 和375nm)结合还原糖法可用于对低聚糖阿魏酸酯进行准确定量。     

罗非鱼酶解液中挥发性成分分析

采用顶空- 固相微萃取(HS-SPME)技术结合气相色谱- 质谱联用(GC-MS)对罗非鱼蛋白酶酶解液中挥发性成分进行研究,优化顶空固相微萃取的条件,并对挥发性成分进行鉴定和分析。结果表明最佳萃取条件为样品中添加30g/100mL 氯化钠,采用以聚二甲基硅氧烷/ 二乙烯基苯(PDMS/DVB)为涂层的萃取头在60℃条件下搅拌萃取40min。实验共鉴定出69种挥发性物质,其中与罗非鱼酶解液气味相关的成分主要是相对分子质量为80～200的C6～C9 挥发性羰基化合物、醇类和含氮类物质,这些挥发性成分的协同作用构成了酶解液的特征风味。     

酶解麦麸制备阿魏酸和低聚糖的研究

本研究以黑曲霉(Aspergillus niger)作菌种,采用液体深层发酵法制备出含有阿魏酸酯酶(FAE)和阿拉伯木聚糖酶(AX)的混合酶制剂,探讨了它们协同作用麦麸制备阿魏酸和低聚糖的工艺条件。结果表明,FAE和AX协同作用的最适反应pH为4.4,最适反应温度为50℃。采用混合酶制剂作用于去淀粉麦麸(DSWB)发现,通过3次降解后,麦麸降解率达55.46%,大大高于文献报道的、采用单一酶作用的结果。扫描电子显微镜(SEM)观察发现,DSWB在酶处理前后的微观结构发生了显著变化。