内吗啡肽-2的合成

采用多肽固相合成法,以Rink Amide树脂为载体,Fmoc保护氨基酸为原料,以DIC/HOBt为缩合体系,按照内吗啡肽-2的肽序列,从C端向N端偶联,肽树脂经三氟乙酸裂解,得到内吗啡肽-2粗品,纯度为98.5%,再经制备型反相高效液相色谱法纯化和转盐,得到醋酸内吗啡肽-2纯品,纯度99.0%,收率为80%。     

双氧水-氢氧化钠结合对脱细胞猪真皮基质材料高度纯化的作用

以可溯源性猪皮为原料,采用特殊的化学、物理及生化方法对猪皮进行高度纯化处理,通过观察实验中皮块厚度、面积、废液中胶原蛋白与非胶原蛋白含量及组织学形貌变化,得出脱细胞猪真皮基质碱膨胀的最佳方案为双氧水4%-氢氧化钠6%。并制备了高纯度脱细胞猪真皮基质,检测其抗张强度为7.2 MPa,吸湿性能好,不含重金属,无经口急毒,细胞除去干净且细胞毒性1级,为今后脱细胞猪真皮基质在生物医用材料领域的应用奠定基础。     

固相萃取-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法检测芥子气染毒血样中的三肽加合物

三肽加合物,(S-2-羟乙基硫代乙基)-半胱氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸[(S-HETE)-Cys-Pro-Phe]是芥子气染毒后体内重要生物标志物之一。本文首先合成并纯化(S-HETE)-Cys-Pro-Phe,应用固相萃取-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法对其进行定性定量分析。将芥子气染毒血样经Hitrap Blue亲和柱提取白蛋白,选择链霉蛋白酶进行酶解,应用固相萃取柱进行富集净化,采用四级杆飞行时间质谱进行检测。     

推拿对坐骨神经损伤大鼠背根神经节降钙素基因相关肽表达的影响

目的:观察推拿对坐骨神经损伤后背根神经节神经元降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表达的影响。方法:48只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、模型对照组、推拿组,采用坐骨神经损伤(chronic constriction injury,SNI)模型,以按摩推拿手法模拟仪进行推拿手法干预,观察各组大鼠光热耐痛阈、痛敏分数变化及L3-5节段右侧背根神经节CGRP的表达情况。结果:造模7 d后,与同期正常组比较,模型组大鼠的耐痛阈值及痛敏分数均明显升高(P<0.01);模型组CGRP在背根神经节的表达升高(P<0.01)。在推拿治疗20次之后,与同期模型组比较,推拿组耐痛阈值及痛敏分数明显降低(P<0.05);与同期模型组和模型对照组比较,推拿组CGRP在背根神经节的表达明显升高(P<0.01)。结论:推拿可以提高周围神经损伤大鼠背根神经节内CGRP的表达,参与神经损伤修复过程,最终改善周围神经损伤大鼠的感觉功能。     

使用ACQUITY UPLC和Xevo TQ-S分析食品中致过敏物质肽

<正>食品过敏情况越来越多,对食品呈不良反应的人口数量也一直在增加。尽管许多食品会导致发生反应,但90%的食品过敏反应局限于少量所谓的关键过敏原。这些关键过敏原包含在牛奶、甲壳动物、卵、鱼、花生、大豆、坚果和小麦中。为了帮助那些出现食品过敏的人,全球范围内都有与食品安全问题相关的许多不同法规。     

基于细胞碳-氮-氧需求的补料批发酵策略促进杆菌肽合成

为了提高杆菌肽补料发酵的效率,在50 L罐水平研究了pH耦合、间歇-罐压控制和间歇-溶氧(dissolved oxygen,DO)耦合等补料策略对杆菌肽合成的影响。pH耦合策略的杆菌肽效价为1 006 U/mL,但存在对数中后期因pH低于设定值而无法补入葡萄糖的问题。间歇-罐压控制策略的效价(1 118 U/mL)比pH耦合策略提高了11%,但也存在发酵后期补糖量与DO不匹配的问题。间歇-DO耦合策略克服了以上缺陷,糖对杆菌肽的转化率(YP/S)比间歇-罐压控制策略提高了22. 7%。基于间歇-DO耦合补料策略并于24 h二次补入氮源后,其平均杆菌肽合成速率达到了40. 67 U/(mL·h),杆菌肽效价峰值达到了1 220 U/mL。建立了基于细胞需求的综合碳-氮-氧因素的补料策略,为工业化补料发酵生产杆菌肽提供了重要参考。     

米渣肽双酶两步水解法制备过程中物化特性与结构变化

探究双酶法制备米渣蛋白肽过程肽的组成结构变化。基于前期研究基础,采用双酶法以胰蛋白酶+风味蛋白酶,中性蛋白酶+风味蛋白酶4 h内分别连续制备两类米渣肽RDPH-1和RDPH-2。随着反应的进行,发现前者较后者水解更快速且程度更深,4 h时水解度分别为29.09与16.47;米肽产物平均粒度大多<1 000 nm,同时粒度与分子结构随着米肽的酶解与聚集发生动态变化;表面疏水性都呈先下降后上升的趋势,且前者较后者整体大10倍多;RDPH-1较RDPH-2二级结构更稳定,两者的氨基酸组成不同,但主要成分相似,营养价值相当。该法制备米渣肽的过程研究表明,胰蛋白酶和风味蛋白酶更适合酶解米渣得到小分子肽,且具有规律性,对肽的高效制备具有指导意义。     

甲状腺功能亢进症患者左心室峰值应变与血浆B型脑钠肽的相关性研究

目的:应用三维斑点追踪成像技术(3D-STI)评价甲状腺功能亢进症(甲亢)患者左心室整体收缩功能,并探讨左心室整体峰值应变与血浆B型脑钠肽(BNP)水平的相关性。方法:选取2015年5-11月本院收治的63例甲亢患者作为研究对象,根据甲亢及甲状腺心脏病诊断标准分为甲亢组31例和甲亢心组32例,另择同期健康志愿者30例作为对照组,三组均行常规和三维超声心动图检查,测量左室舒张末期内径(LVDD)、左室收缩末期内径(LVSD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWT)、左室射血分数(LVEF)、左室整体峰值纵向应变(GLS)、圆周应变(GCS)、面积应变(GAS)及径向应变(GRS)及血浆BNP水平。结果:GLS、GCS、GAS及GRS值甲亢组均低于对照组(P<0.05),甲亢心组均低于甲亢组及对照组(P<0.05);甲亢组LVDD、LVSD、IVST、LVPWT及LVEF值与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),甲亢心组LVDD、LVSD高于甲亢组和对照组(P<0.01),LVEF均低于甲亢组和对照组(P<0.01),三组间IVST、LVPWT值比较差异均无统计学意义(P>0.05);血浆BNP甲亢组高于对照组,甲亢心组高于甲亢组和对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);GLS、GCS、GAS及GRS值与BNP水平均呈负相关,其中与GLS与GAS相关性最好。结论:三维斑点追踪技术可早期评价甲状腺功能亢进症患者心脏功能受损情况,其与血浆BNP水平结合可较敏感地反应心功能的变化及心肌损害程度。     

Caveolae在CGRP保护人脐静脉内皮细胞中的作用及机制

目的探讨Caveolae对降钙素基因相关肽(CGRP)抑制过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤作用的影响及其机制。方法体外培养HUVECs,分别用CGRP和/或H2O2处理细胞,光学显微镜观察细胞形态学和密度的变化;流式细胞术观察细胞的增殖和周期分布;β-环糊精(β-CD)用于破坏caveolae结构;Western-blot检测caveolin-1表达。结果与正常组比较,CGRP组细胞密度增加,S期细胞数明显增多,H2O2组细胞密度降低,S期细胞数明显减少;CGRP预孵育细胞能抵抗H2O2引起的细胞数目减少;β-CD剥夺胆固醇,破坏caveolae结构,HUVECs形态学发生改变,但CGRP诱导的细胞密度和细胞增殖进一步提升,恢复胆固醇后,该作用被取消。与对照组比较,CGRP组细胞caveolin-1表达水平降低(P<0.05);H2O2组细胞caveolin-1水平上升(P<0.05),给予CGRP预孵育后,能显著逆转H2O2诱导的caveolin-1表达(P<0.05);β-CD破坏caveolae结构后,增强CGRP下调HUVECs caveolin-1表达的作用(P<0.05),增加胆固醇Caveolae结构有所恢复且该作用被削弱。结论 Caveolae结构完整性对CGRP保护H2O2损伤HUVECs有一定影响,破坏caveolae结构能增强CGRP对H2O2损伤的HUVECs的增殖作用,其机制可能与增强CGRP下调氧化应激导致的caveolin-1的表达有关。